羊鲜精常温保存技术研究

肖广庆

（洛阳市畜牧良种繁育推广中心，河南 洛阳471013）

在目前冻精人工授精技术尚未成熟之际，本交及鲜精人工授精仍然是羊场主要的繁殖方式。但因为鲜精保存技术领域发展滞后，传统的稀释方法因保存时间短、稀释倍数低，严重影响种羊利用效率及良种覆盖率。笔者探索羊鲜精稀释液科学配方，拟在不改变原精生理环境前提下，加入精子可吸收能量及营养物质，为精子运动补充能源，同时保护精子少受损伤，抑制精子过量耗能，达到保存时间延长、活力衰减缓慢等效果。

1 羊人工授精鲜精处理技术

1.1 羊场现有配种繁殖技术方案

目前，大多羊场仍采用本交及鲜精人工授精技术。专用稀释液市面较少，大多羊场采用0.9%生理盐水、2.9%枸橼酸钠或脱脂鲜奶等方式临时稀释，或直接用现采鲜精直接配种。稀释比例通常在1∶1～1∶3，每只母羊输精0.2～0.3 ml，两次输精完成配种。

1.2 现有技术的缺点

传统稀释方法稀释比例低、保存时间短。有些羊场在种羊充足条件下采取原精直接输精。要求鲜精短时间必须用完，同时好的种羊由于稀释比例问题只能配少量母羊，采精和配种两边都要有人，耗费人力，种羊利用效率低下。

2 技术方案

通过测试羊原精pH 值及渗透压，将羊鲜精稀释液配方调整至和原精基本一致，然后稀释观察鲜精活力、运动状态及顶体完整率、畸形率的质量指标及存放时间，达到延长保存时间、减少活力衰减等效果。

采集新鲜公羊精液，在37℃对精子的表观活率、活力及密度进行质量评定：用带有刻度的集精杯计算每次采精体积；在显微镜100 倍视野下观察鲜精的表观活率，0级为没有波动，5 级为快速漩涡状波动；在400 倍视野下评定鲜精活力，用密度仪测出精液密度；只有精液表观活率为4 级，活力大于0.65且密度大于20亿/ml才能用于稀释配种；等温加入稀释液，按原精与稀释液1∶5～1∶10 比例稀释。稀释后用保温棉套罩住集精杯配种待用。

3 专用稀释液与现有稀释液对比

3.1 不同稀释比例常温保存时间对比（见表1）

用同只羊精液等分后用不同稀释液按不同比例稀释，放置常温环境下定时用显微镜观察活力，直至精子停止运动，对比各稀释液保存时间。结论：目前常用稀释液常温保存稀释比例1∶2 以内可保存2～3 h，稀释比例大于1∶3 时，保存时间在1 h 以内。而专用稀释液稀释比例越大保存时间越长，最长可达16 h。

表1 不同稀释液常温保存时间及稀释比例情况

3.2 专用稀释液与常用稀释液不同稀释比例受胎率对比（见表2）

表2 不同稀释液不同稀释比例受胎率对比

结论：常用稀释液稀释比例一般在1∶3 以内，大多1∶1或1∶2稀释，超过1∶3稀释受胎率会有影响，而专用稀释液在1∶10以内均有较高受胎率。按照每只羊输精1次0.2 ml（两次输精），1只种羊两次采精平均2 ml，专用稀释液可配50～100只母羊（见表3）。

表3 1只种羊可配母羊头数

4 讨论

羊专用稀释液能够有效延长鲜精保存时间，只需常温避光隔热保存，简单实用，可有效提高种公羊利用效率，增加良种覆盖率，减少人工授精人员配置，提高劳动效率。同时鲜精稀释液制作工艺操作简单，生产成本低，可有效提高人工授精受胎率及人工授精效率，便于大规模推广应用。