黄芪多糖对小鼠免疫功能影响的实验研究

高 旭，李丽芬，刘斌钰

(山西大同大学医学院，山西 大同 037009)

黄芪为一种扶正固本的临床常用中药,中国药典规定,药用黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根.黄芪味甘、性温，有补气升阳、固表止汗、脱毒排脓和生肌等功效[1].近年来研究发现，黄芪中除黄芪甲甙、黄酮等小分子化合物具有较强的生物活性外，大分子化合物如黄芪多糖 (Astrgalus Polysaccharides APS)也同样具有多方面的活性，其利用价值日益受到重视.黄芪多糖是一种具有代表性的大分子多糖，由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等组成.现代药理学研究表明，黄芪多糖能增加超氧化物歧化酶(SOD)活性、降低丙二醛(MDA)含量，具有延缓衰老[2]、双向调节血糖、保护肾脏[3-5]、增强耐力[6]减轻心肌损伤[7]等作用，本实验旨在探讨黄芪多糖对小鼠免疫功能及血常规的影响,为临床应用提供理论基础和实验依据.

1 材料

1.1 试验药物

黄芪多糖购于陕西宝鸡方晟生物开发有限公司，用前配成所需浓度.

1.2 动物

昆明种小白鼠，♀♂皆用，由山西大同大学动物室提供.

2 方法

2.1 黄芪多糖对小白鼠生长情况及对血常规的影响

实验取体重20 g左右小白鼠30只，随机分为3组，黄芪多糖大、小剂量组和生理盐水组，黄芪多糖大、小剂量组分别灌胃黄芪多糖150 mg·kg-1.d-1，50 mg·kg-1·d-1，对照组灌胃等剂量的生理盐水，连续7 d.在末次给药后2 h从小鼠尾部取血检测血常规.实验参照文献[8]进行.

2.2 黄芪多糖对小白鼠免疫器官重量的影响

实验取体重10～12 g幼鼠30只，随机分为3组，黄芪多糖大、小剂量组和对照组(简称A、B、C组)，给药剂量同上，连续10 d，在末次给药后2 h处死小鼠，分别称取体重、胸腺和脾脏的质量，以胸腺、脾脏的质量(mg)与体质量(g)之比作为胸腺、脾脏的指数.实验参照文献[9]进行.

2.3 黄芪多糖对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

实验取体重22～24 g小白鼠30只，随机分为3组，黄芪多糖大、小剂量组和生理盐水组，给药剂量同上，连续7 d.在末次给药后1 h每只小鼠腹腔注射5%的可溶性灭菌淀粉1 mL，24 h后再次腹腔注射5% 鸡红细胞生理盐水悬液0.5 mL，30 min后处死动物，打开腹腔作腹腔液涂片，“瑞氏”染液染色，镜下观察并计算巨噬细胞吞噬百分率及吞噬指数[10].

吞噬百分率=具有吞噬能力的巨噬细胞数/巨噬细胞观察数×100%

吞噬指数=吞噬的鸡红细胞总数/巨噬细胞观察数×100%

2.4 统计学处理

3 结果

3.1 肉眼观察动物生长情况及对血常规的影响

服用黄芪多糖组小鼠(A、B组)比对照组(C组)小鼠个头大、粗壮，毛顺而光亮，非常活泼，体格健壮，活动度与进食增加，血常规及血红蛋白检测结果见表1.

表1 黄芪多糖对小白鼠血常规和血红蛋白的影响n=10()

表1 黄芪多糖对小白鼠血常规和血红蛋白的影响n=10()

注：与对照组相比 *P ＜ 0.05，**P ＜ 0.01

组别 RBC/(1012·L-1) Hb/(g·L-1) WBC/(109·L-1) LC/% 中性粒细胞/% 单核细胞/%A 组 7.39±0.46** 138±12 1.73±0.41** 74.1±7.9** 35±8.3 0.8±0.3 B 组 7.14±0.52* 131±15 1.55±0.37* 71.5±6.8* 32±7.5 0.7±0.6 C 组 6.58±0.34 127±14 1.08±0.34 62.3±7.4 34±8.9 0.9±0.5

从表1可见，黄芪多糖可以使红细胞、白细胞和淋巴细胞增加，与对照组比较有显著性差异，血红蛋白、中性粒细胞及单核细胞与对照组比较无显著性差异.

3.2 黄芪多糖对小白鼠免疫器官重量的影响

实验计算幼鼠的胸腺和脾脏的指数，结果见表2.

表2 黄芪多糖对小白鼠免疫器官重量的影响(n=10)

从表2可见黄芪多糖能促进正常小鼠胸腺和脾脏重量的增加，经单因素方差分析，与对照组比较有显著性差异.

3.3 黄芪多糖对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

实验分组与给药剂量同上，连续7 d，常规染色，镜下观察，结果见表3、图1，均为HE染色×400倍.

表3 黄芪多糖对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响(n=10)

从表3可见，黄芪多糖能增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率，并且使吞噬指数提高，黄芪多糖大剂量组的作用明显强于小剂量组.经单因素方差分析，组间比较，黄芪多糖大、小剂量组与对照组比较有显著性差异.从图1可见，对照组的巨噬细胞吞噬的鸡红细胞很少，而黄芪多糖大、小剂量组的巨噬细胞吞噬的鸡红细胞很多.

图1 黄芪多糖对小白鼠巨噬细胞吞噬的鸡红细胞的影响

4 讨论

30多年前，人们对中草药免疫药理进行研究时发现，许多补益类中药的活性成分是以多糖的形式存在.大量的实验研究证明多糖对机体特异性免疫与非特异性免疫、细胞免疫与体液免疫有广泛的影响[11].多糖可分为植物性多糖、动物性多糖、微生物多糖和海藻多糖四类.黄芪多糖属于植物性多糖.

目前认为，中药及中药提取物本身并没有抗菌或抗病毒的作用，而是通过提高机体免疫力，从而起到增强机体抗炎和抗病毒的效应.由于体内的免疫细胞大多分布在胸腺和脾脏中，所以胸腺和脾脏是动物的重要免疫器官.一般胸腺在动物生长到一定时候就萎缩了，所以必须选择幼鼠来观察胸腺，胸腺的免疫功能主要是诱导T细胞的分化和成熟，辅助T细胞产生抗体；动物成熟后脾脏就成为其最大的免疫器官，内含大量的免疫细胞，其中T淋巴细胞约占40%左右，B淋巴细胞约占60%左右，在体液免疫中的地位极其重要[12].因此研究黄芪多糖对机体免疫器官的作用是研究多糖免疫调节作用的一个重要方面.胸腺和脾脏与免疫的产生密切相关，若指数都增加，说明对细胞免疫和体液免疫都有促进作用，相对地表明机体免疫功能增强.因此测定动物胸腺和脾脏重量指数能反映机体免疫力.巨噬细胞是一种非特异性免疫细胞，它能吞噬和消灭外来异物和自身死亡细胞.小鼠黄芪多糖灌胃10 d后，红细胞、白细胞、淋巴细胞、吞噬率和吞噬指数与对照组比较均有显著性差异.由此表明黄芪多糖能明显提高巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数.

已知机体的衰老不仅出现易疲劳、免疫功能低下的反应，而且还伴有外观行为的变化，从而出现了临床年迈体衰病多的现象.如果设法增强机体的免疫功能、应激能力和耐力，将有助于延缓衰老过程和老年病的防治.随着对祖国传统医学研究的不断深入，越来越多的中草药及中草药提取物的应用得到了大家的重视，特别是中药多糖的应用，必将在医疗方面为人民提供新的视野和方法.

综上所述，黄芪多糖能提高小鼠红细胞、白细胞和淋巴细胞数量，促进正常小鼠胸腺和脾脏重量的增加，增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率，并且使吞噬指数提高.本实验揭示黄芪多糖延缓衰老的作用可能是通过增强机体免疫功能来实现的.

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