饲料中添加虾青素对斑节对虾生长和免疫指标的影响*

温为庚 ， 林黑着 ， 吴开畅 ， 杨其彬 ， 黄建华 ， 江世贵

(中国水产科学研究院南海水产研究所，广东 广州 510300)

虾青素(astaxanthin),又名虾黄质、虾黄素，在医药、化妆品、保健品中有广泛的用途。有着色、促生长和增强免疫力的生物功能[1-2]，在水产养殖中也开展了广泛的研究[3-4]。

斑节对虾Penaeusmonodon是暖水性虾类，适温范围15～35 ℃，个体大，离水存活时间长，肉味鲜美，深受消费者的青睐，是市场的畅销品种。早在20世纪80年代末，就在中国广东、广西、海南等地开展养殖。目前，斑节对虾养殖遇到生长缓慢、个体大小参差不齐、疾病频发，等等问题。为了斑节对虾养殖业健康、持续发展，水产科技工作者开展了深入的研究[5]。虾青素对斑节对虾的生长和免疫力的影响尚未见报道。本文在这方面展开探讨，为斑节对虾健康养殖提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料来源

虾青素是郑州荔诺生物科技有限公司生产，含量5%以上。基础饲料是湛江恒兴集团生产的斑节对虾预混粉料。分别添加虾青素(0，10，20，40，80，160 mg·kg-1)，搅拌均匀, 用挤条机制成直径1.0 mm的颗粒, 凉干，- 20 ℃冰箱中保存备用。实验虾是自行培育的斑节对虾苗，在室外4×3 m2水泥池标粗。标粗海水经沙滤，pH 8.2，盐度32，温度28～30 ℃.培育密度1万尾/ m2，水深1 m，投喂人工配合饲料、鱼肉，培育到约3 cm体长，备用。

1.2 饲养条件及方法

饲养用水同1.1，容器是0.5 m3的玻璃钢桶，底面积0.64 m2，置于室外实验棚中，盖遮光率为60%的遮阳网，鼓风机连续充气增氧。挑选大小均匀的对虾，每个梯度设3个平行，每个平行30尾。吸去对虾体表水份，电子天平(精确度0.01 g)称重(湿质量)。空胃1 d，每天过量投喂自制饲料3次：8:00、15:00、20:00。投料后2 h吸底，流水养殖，流速1 000 mL·min-1，饲养30 d。

1.3 血清制备及免疫指标测定

饲养结束时，用1 mL无菌注射器从对虾围心腔内抽取血样置于离心管中,4℃冰箱保存,待血液凝固后,5 000 r·min-1离心10 min,移出上清液即得血清。PO相对活力测定用王雷等[6]的方法。ALP、POD、SOD的测定用试剂法，南京建成生物工程研究所生产。

1.4 数据分析处理

数据记录用，SPSS13.0软件处理，进行单因素方差分析，Duncan多重比较，差异显著性水平P<0.05。

2 结果

2.1 虾青素对生长的影响

添加不同剂量虾青素，实验组对虾增质量率比对照组增加显著(P<0.05)，而160 mg·kg-1组比其它组增加量略小。在存活率方面，除20,40 mg·kg-1组外差异显著。特定生长率也有显著差异(P<0.05)，见表1。

表1 虾青素对斑节对虾生长的影响1)

1)同列数据中上标不同字母者之间差异显著(P<0.05)

Means with in the same list with the different superscript letter are significantly different(P<0.05)

2.2 虾青素对免疫指标的影响

饲料中添加虾青素40 mg·kg-1以上时对斑节对虾PO活力影响显著(P<0.05)，80 mg·kg-1以下时酶活力随虾青素的增加而增加。160 mg·kg-1时，PO活力略有下降。对ALP、POD、SOD活力没有显著影响，见表2。

表2 虾青素对斑节对虾免疫指标的影响1)

1)同列数据中上标不同字母者之间差异显著(P<0.05)

Means with in the same list with the different superscript letter are significantly different(P<0.05)

3 讨 论

3.1 关于虾青素对斑节对虾生长的影响

金征宇等[3]在罗氏沼虾Macrobrachiumrosenbergii研究中发现：虾青素能显著提高罗氏沼虾的增质量率和存活率。裴素蕊等[4]在凡纳滨对虾Litopenaeusvannamei饲料中添加虾青素。结果发现：虾青素可显著提高凡纳滨对虾的特定生长率，对存活率无显著影响。在本实验中，添加虾青素能显著提高斑节对虾的增质量率和特定生长率， 但160 mg·kg-1组比其余组增加量稍为减小。而存活率没有明显规律性。

Petri 等[7]在小白鼠饲料中添加虾青素，饲养一段时间后，小白鼠组织中虾青素含量不再升高。虾青素具有生物活性，参与多种代谢过程，含量应保持动态平衡。就是说，虾青素添加过量后，对虾会增加代谢把多余的排出体外。这会额外消耗对虾体能，导致对虾在高添加量时生长略有下降。虾青素对斑节对虾存活率的影响有待在大规模生产中进行深入研究。

3.2 关于虾青素对斑节对虾免疫的影响

谢剑华等[8]在日本沼虾Macrobrachiumnipponensis研究中发现：虾青素可显著提高日本沼虾的免疫力。在本实验中，虾青素能显著提高斑节对虾PO活力。PO活力随虾青素添加量缓慢上升，160 mg·kg-1时略有下降。对ALP、POD和SOD活力影响不显著。

PO以酶原的形式存在于大颗粒细胞和小颗粒细胞中,可被β-葡聚糖、脂多糖和肽聚糖等激活。虾青素的作用可能是激活了酚氧化酶原系统。额外的代谢会消耗对虾体能，这可能是一种胁迫，进而导致对虾PO活力在高剂量时反而略有下降。杨志彪[9]等的研究认为：水中添加少量Cu2+,中华绒螯蟹EriocheirsinensisALP先升后降。ALP是一种含Zn2+酶，可由Cu2+激活，但过量时会造成机体损伤，因此ALP活力先升后降。虾青素可能不能激活ALP，因而ALP活力无变化，POD 和SOD是重要的抗氧化酶,具有催化超氧化物阴离子自由基的歧化反应,清除自由基，阻止自由基引起连锁反应,对机体起保护作用。虾青素是一种抗氧化剂，本实验中，POD 和SOD活力没有变化，可能是虾青素发挥了抗氧化作用。

参考文献：

[1]PAN C H, CHIEN Y H, CHENG J H.Effects of light regime, algae in the water, and dietary astaxanthin on pigmentation, growth, and survival of black tiger prawnPenaeusmonodonpost-larvae [J].Zoological Studies, 2001, 40:371-382.

[2]蔡明刚,王杉霖,李文权,等.天然虾青素在水产养殖业中的应用研究进展 [J].台湾海峡，2003,22(3)：377-385.

[3]金征宇,过世东,吕玉华.饲料中添加富含虾青素的法夫酵母对罗氏沼虾的体色及生长状况的影响 [J].饲料工业，1999,20(10)：29-31.

[4]裴素蕊,管越强,马云婷.饲料中添加虾青素对凡纳滨对虾生长、存活和抗氧化能力的影响 [J].水产科学，2009,28(3)126-129.

[5]刘栋辉,阳会军,刘永坚.β_葡聚糖和维生素C对斑节对虾生长和抗病力的效果 [J].中山大学学报：自然科学版，2002,41(4)：59-62.

[6]王 雷,李光友,毛远兴.口服免疫药物后中国对虾某些血淋巴因子的测定及方法研究 [J].海洋与湖沼,1995,26(1):34-41.

[7]PETRI D, LUNDEBYE A K.Tissue distribution of astaxanthin in rats following exposure to graded levels in the feed [J].Comp Biochem Physiol, 2007,(145):202-209.

[8]谢剑华,管越强,王静波.虾青素对日本沼虾血细胞密度及吞噬活力的影响 [J].河北渔业，2008,169(1)：8-11.

[9]杨志彪,赵云龙,周忠良,等.水体铜对中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)代谢酶活力的影响 [J].海洋与湖沼，2006,37(02):118-124.