川芎、当归炮制前后挥发性成分分析

刘凤臣，蔡广知，杨建龙，张彦飞，贡济宇

(长春中医药大学药学院，吉林 长春 130117)

当归和川芎的化学成分主要为挥发油，具有平喘、解痉等作用[1-2]，对痛经、哮喘、抗免疫、心肌缺血、脑缺血、哮喘持续状态、发热等有明显疗效[3-7]。2味药在临床应用时主要是其饮片的炮制品，超临界CO2萃取技术萃取温度低，可大量保存对热不稳定成分及易氧化的挥发性成分[8]，为了解饮片炮制之后挥发油的变化,本实验采用超临界CO2萃取技术萃取挥发油，采用GC-MS计算机联用技术对其成分变化进行研究。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验材料与试剂 当归和川芎药材(购于吉林大药房)，石油醚、乙醇、黄酒、蒸馏水。

1.1.2 主要设备 超临界萃取仪Spe-ed SFE-Ⅱ(Applied Separations Inc.)，电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)，科伟牌高速万能粉碎机(北京科伟永兴仪器有限公司)，热恒温鼓风干燥箱DHG-9070A型(上海精宏实验设备有限公司)，QP-2010型GC-MS联用仪(日本岛津公司)。

1.2 试验方法

1.2.1 药材炮制 酒炙当归：取当归片，加入定量黄酒拌匀，稍闷润，待酒被吸尽后，文火炒至深黄色，取出放凉(100 kg，用黄酒10 kg)。

酒炙川芎：川芎片，加入定量黄酒拌匀，稍闷润，待酒被吸尽后，置炒制容器内，用文火加热，炒至棕黄色时，取出晾凉。筛去碎屑(100 kg用黄酒10 kg)。

1.2.2 药材粉碎、处理 分别精密称取川芎、当归生品及酒炙品各20 g，粉碎、干燥，过40目筛,即得。

1.2.3 挥发油的提取 采用超临界CO2萃取法萃取其挥发油，将药材粉末置于萃取釜中调压力为30 MPa，温度40 ℃，连续萃取180 min，收集挥发油，即得。

1.2.4 色谱条件

1.2.4.1 GC条件 HP-5MS石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)；柱温80～240 ℃，程序升温4 ℃/min；

柱流量1.0 mL/min；进样口温度250 ℃；柱前压100 kPa；进样量0.2 μL；分流比10∶1；载气为高纯氦气。

1.2.4.2 MS条件 电离方式EI；电子能量70 ev；接口温度240 ℃；离子源温度230 ℃；质量范围35～450。

1.2.5 样品制备及测定 分别精密称取挥发油0.2 g，置5 mL容量瓶中，加石油醚定容至刻度，过0.22 μL滤膜，即得。取0.2 μL注入GC-MS联用仪，记录总离子流图，保留时间和峰面积，再通过谱库检索，确定挥发油的组成和相对含量。

2 结果

2.1 当归、川芎酒炙前后挥发油含量及提取率比较 见表1。

表1 药材酒炙前后挥发油含量及提取率比较

2.2 GC-MS分析结果 采用超临界CO2萃取所得当归生品及酒炙品总挥发油，利用GC-MS联用仪分析，得到的图谱与标准图谱对照，鉴定出16种化学成分，参考标准图谱和相关文献[9]确定其化学结构，用峰面积归一化法计算各组分的质量分数，生品、酒炙品总离子流图分别见图1、图2，结果见表2。

图1

图2

图3

图4

表2 超临界CO2萃取当归的挥发油成分GC-MS分析结果

表3 超临界CO2萃取川芎的挥发油成分GC-MS分析结果

同样方法，从川芎酒炙前后所得的挥发油中鉴定出12种化学成分，生品、酒炙品总离子流图分别见图3、图4，结果见表3。

3 讨论

本实验采用超临界CO2萃取技术，整个过程耗时短，效率高，萃取温度低，可大量保存对热不稳定的成分及易氧化的挥发性成分。

酒炙川芎和当归挥发油含量较生品降低，可能是由于药材加工处理和炮制过程中有所损失，2种饮片炮制前后挥发油组分发生了变化，2味药挥发油中多数成分的相对含量均有升高趋势，少部分挥发油减少甚至消失，川芎和当归炮制前后挥发油变化的研究对临床应用具有重要价值。

酒炙可以改变药材的药性、化学组成及含量，本文的研究为药材酒炙法炮制的规范化及临床应用积累了条件，今后在制定药材炮制标准时，应充分考虑药材炮制前后化学成分组成及含量变化，条件允许应配合开展相关药理实验研究。

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