果蝇饲养和保种的探索与研究

2012-04-29 05:59吕亚慈
考试周刊 2012年61期
关键词:保种果蝇琼脂

吕亚慈

摘要: 本文介绍了实验所用果蝇的饲养方法和不同品种的果蝇保种时需要注意的事项。

关键词: 果蝇饲养保种

在20世纪生命科学发展的历史长河中,果蝇扮演了十分重要的角色,科学家们用果蝇证实了孟德尔遗传定律,摩尔根以果蝇为实验材料发现了伴性遗传和连锁与交换定律,此外数次获得诺贝尔奖的奖项的科学家们都以果蝇为试验材料来开展科学研究工作。本文介绍培养果蝇及果蝇保种的一些技术和注意事项。

1.果蝇生活史

卵→受精卵→一龄幼虫→二龄幼虫→三龄幼虫→化蛹→成虫。卵和受精卵为卵期,从一龄到三龄属于幼虫期。不同温度条件下果蝇的生长时间差异很大。20℃条件下,从卵到幼虫阶段需8天,蛹到成虫需5天;25℃条件下,分别需要6天和4天。普通果蝇生活的最适温度为20~25℃,当温度低于10℃时,生活周期将延长至57天以上,而且生活力明显下降;若高于30℃时则引起不育或死亡。

2.果蝇的饲养方法

2.1培养基的制备。

果蝇以酵母菌为食,所以能发酵产生酵母菌的基质均可作为培养果蝇的培养基,常见的有玉米粉培养基、香蕉粉培养基等。本实验室用玉米粉培养基,其成分为:玉米粉15g、琼脂1.5g、白糖27g、酵母1.5g、丙酸1mL、水150mL。若所需量不同,可根据此比例进行调整。具体步骤如下:把水分成两份,大部分加热煮沸,加上白糖搅拌均匀;另一部分凉水状态加入玉米面,搅拌均匀成玉米糊状态,两部分混合煮沸后加入琼脂,搅拌均匀沸腾,关掉电源。待稍凉后加入酵母粉、丙酸搅拌均匀,分装到灭过菌的培养瓶。

2.2培养基的分装。

培养果蝇通常使用指形直管、锥形瓶、广口瓶等。短期保种、品种纯化或是小型预实验使用指形直管,便于多管用橡皮筋捆扎在一起,好存放;锥形瓶空间比较大,适合存放做杂交实验的果蝇,观察后代数量方便;广口瓶壁厚观察果蝇不方便,但是空间较大,适合长期保种的需要。无论哪种容器用前都需要灭菌,本实验室采用微波炉光波灭菌2分钟,所用棉塞均为现制。

分装培养基时要注意务必趁热分装,因为成分中含有琼脂,培养基凉了琼脂会凝固,导致无法分装。配方中所用水的量是使用电炉子作为加热电源的量,如果加热电源功率较大,如电磁炉等对水分损耗较多时,适当增加水的用量,以免培养基黏稠不好分装。分装过程避免培养基沾到瓶口或瓶壁。黏稠的培养基分装到瓶后要水平晃动培养瓶,防止培养基干后分层。

一般培养基的厚度为1.5~2㎝比较合适。培养基厚了,果蝇无法食用下层培养基,既是培养基的浪费,又减少果蝇的活动空间。如果作为保种用的培养基应该适当厚一点,基本也不超过培养瓶的三分之一。

3.饲养过程中的注意事项

3.1果蝇的转移。

分装好的培养基,待瓶壁和培养基表面干燥后,才可转移果蝇。果蝇转移过程不同的文章中建议的方法不同,有的是新瓶在上或是新瓶在下[2-3]。本实验室转移果蝇新瓶和旧瓶均为水平放置两口相对,首先降低旧瓶中真菌落入新瓶,其次防止个别培养基与瓶底分离给果蝇带来的损害,最后防止死去的果蝇和旧培养基块转入新瓶降低新培养基污染的几率。打开瓶塞以前注意先将果蝇震落到瓶底,迅速将两瓶口相对,以防止果蝇的飞出。随后用手掌挡住旧瓶,利用果蝇的趋光性使果蝇转移至新培养基瓶中。

3.2培养温度。

果蝇的最适培养温度为20~25℃,这个温度下果蝇的生长发育正常。但实验项目不同时,培养温度也应进行适当调整。如:保种时把温度控制到15℃左右即可,低温下果蝇生活史延长,代谢降低减缓,资源消耗下降;做果蝇的杂交试验则需要将温度提高至25~27℃,果蝇代谢活动增强,生活史缩短,世代间隔缩短,便可加快实验进程。

3.3培养基的补救办法。

春夏季温度较高,天气干燥时,培养基表面很容易干燥,但不能加水湿润,水会粘住果蝇的翅膀使其无法飞翔而死。这时可用解剖针挑破表面干燥的培养基或是用小药勺刮去表面干硬部分。做果蝇唾腺染色体观察实验时为使1龄2龄幼虫加快成长至3龄幼虫,可在培养基的表面洒些干酵母粉,加快幼虫的成长速度。

4.保种的注意事项

4.1保种的温度。

对于生活力旺盛的品种,可设在15℃左右暗培养,可延长其生活史,减少培养基的损耗,降低转移次数减少人力投入,也同时保证种性的纯度。对于部分生活力比较低的品种,如残翅突变体的果蝇,不易温度过低,20~25℃间饲养比较合适。

4.2保种的防杂。

防杂是保种的重要工作,转移前先检查要转移的果蝇品种是否纯正,混杂的丢弃不要;转移过程中有飞出的果蝇要及时捕杀,或是不同品种分时或分室转移;转移前新培养基瓶也应塞有棉塞,避免飞出来的果蝇飞入瓶中导致种间杂交。

生物学教学中和果蝇相关的实验项目很多,果蝇的饲养和保种是进行果蝇相关实验的基本步骤和保障。实验室培养果蝇也是一项长期性、连续性的工作,看似简单但是比较琐碎,需要注意的事项很多。无论哪个步骤出现问题都会对果蝇的培养有影响。本文就其中的一些注意事项加以总结,希望给予从事相关工作的同行提供一定的帮助。

参考文献:

[1]祝水金.遗传学实验指导(第2版).北京:中国农业出版社,2005:1-14.

[2]贾永红.实验果蝇的一些饲养技巧和注意事项.生物学通报,2007,42(7):55-56.

[3]王彩丽.实验用果蝇饲养及保种的注意事项.生物学通报,2009,44(11):49-50.

基金项目:本文属衡水学院2012年教育教学改革项目(jg2012060)。

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