三阴乳腺癌组织中p27、survivin的表达及临床意义

(武汉科技大学附属天佑医院，武汉 434000)

三阴乳腺癌(TNBC)是指ER、PR、HER-2免疫组化标记均为阴性的乳腺癌［1］。2010年5月 ～2011年5月，我们采用免疫组化SP二部法检测TNBC组织中 p27、survivin的表达情况，旨在两者在TNBC发生、发展中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料 选择我院手术切除的TNBC组织标本(肿瘤组)56份(患者均为女性，年龄25～72岁，平均60.2岁，其中≤50岁20例);肿瘤直径≤2 cm 32例，淋巴结转移34例。按WHO乳腺临床TNM分期标准(2003)，Ⅰ～Ⅱ期30例，Ⅲ～Ⅳ期26例。另选非特殊类型乳腺浸润性导管癌(浸润组)及良性乳腺增生症(增生组)组织标本各56份作为对照。各组一般资料无统计学差异。p27、survivin抗体购于上海长岛生物技术开发有限公司(即用型)。

1.2 p27、survivin表达检测 采用SP二步法做免疫组化染色。所有操作按试剂盒说明书进行，采用已知阳性片做阳性对照，同时用磷酸盐缓冲液(PBS)替代第一抗体作阴性对照。结果判定标准:采用双盲法，所有病理切片均由两位医师进行评价，p27表达于细胞核，见图1a;survivin表达于胞质，见图1b。每张切片随机观察10个高倍视野(×200)，每个高倍视野计数100个癌细胞，计数阳性细胞百分数。按阳性细胞所占百分比记分:阳性细胞数＜10%为“－”，10% ～25%为“+”，25% ～50%为“++”，＞50%为“+++”。

图1 p27、survivin在TNBC中的表达(SP×400)

1.3 统计学方法 采用SPSS11.5统计软件，应用χ2检验及Spearman等级相关分析检验。检验水准α =0.05。

2 结果

2.1 p27、survivin表达 肿瘤组、浸润组、增生组p27 阳性表达率分别为 41.1%、67.8%、91.1%，肿瘤组明显低于其余两组，浸润组明显低于增生组(P均 ＜0.01);survivin 阳性率分别为 69.6%、60.7%、5.3%，肿瘤组及浸润组明显高于增生组(P均＜0.01)。

2.2 p27、survivin表达与TNBC临床病理参数的关系 见表1。

2.3 相关性分析 p27与survivin在TNBC中表达呈负相关关系(r= －0.401，P ＜0.01)。

3 讨论

文献报道，TNBC发病率占浸润性乳腺癌的10% ～17%［1］，本研究 TNBC占浸润性乳腺癌的10.5%，与文献报道相近。

p27是Polyak等［2］在1994年发现的一种存在于细胞中的热稳定蛋白原，人p27cDNA长594 bp，含198个氨基酸，相对分子质量27 kDa，是高度保守的蛋白分子。具有限制性调节细胞周期进程的作用，主要抑制细胞周期蛋白E-CDK2和D-CDK4等G1期激酶复合物，阻断细胞S期增殖［3］。p27低表达可加速肿瘤细胞由G1期向S期转化，肿瘤细胞合成增多，促进肿瘤发展。研究发现，p27蛋白的降低与乳腺癌的增殖、高级别以及ER、PR阴性的状态密切相关［4，5］。p27存在于大多数哺乳动物白细胞中，组织中发现缺失、突变或重排的事件非常罕见。本研究肿瘤组p27阳性表达率明显低于浸润组及增生组，表明肿瘤恶性程度越高，p27的表达缺失的情况越普遍。本研究还发现，p27表达与TNBC患者年龄、肿瘤直径、临床分期及淋巴结转移有关，说明p27表达的缺失与肿瘤的恶性程度及预后息息相关。

表1 p27、survivin表达与TNBC临床病理参数的关系

survivin是凋亡抑制因子，具有抑制细胞凋亡、调节细胞分裂的双重功能［6］。本研究肿瘤组 survivin明显高于增生组，说明survivin发挥了抗凋亡的功能，使细胞失去了正常细胞增殖周期中凋亡检验点的限制，细胞分裂异常，造成癌细胞分裂增殖，形成原发肿瘤附近侵犯和远处转移灶的形成;同时survivin的异常表达还能促进肿瘤新生血管、淋巴管的形成，降低放、化疗诱导的凋亡。这些因素直接导致survivin阳性表达者乳腺癌患者生存率降低。国内外许多研究表明，凋亡抑制因子survivin与多种肿瘤的预后密切相关［7］。TNBC中Notch1信号增强和survivin过度表达使肿瘤细胞分化降低，凋亡减少并易产生耐药性，预后不良［8］。陈刚等［9］发现，在乳腺癌组织中survivin蛋白表达与临床分期和淋巴结转移有关。王丽等［10］发现，survivin在有淋巴结转移乳腺癌组织中的表达明显高于无淋巴结转移者，而在其他临床病例因素组中未见差异。毛杰等［11］、桑占发等［12］报道，survivin 的表达与肿瘤的临床分期、淋巴结转移呈正相关，也提示survivin阳性表达的乳腺癌患者预后不良。岳喜成等［13］指出，survivin的表达与stat-3的表达呈正相关关系(P＜0.05)。由于stat-3与survivin在乳腺癌表达的特异性，提示阻断stat-3/survivin可以作为临床不同分期的乳腺癌治疗靶点［14］。本研究显示，survivin与TNBC的患者年龄、肿瘤直径有关。p27与survivin在TNBC中表达呈负相关关系，提示p27的低表达与survivin的高表达在TNBC的演进过程中起一致作用。

总之，p27、survivin的异常表达可能与TNBC的发生、发展及预后密切相关。

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