Livin在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达及其与Ki-67表达的关系

2012-08-15 00:48李敬果翟晓翔张翠侠陈向辉
肿瘤基础与临床 2012年2期
关键词:阳性率试剂盒淋巴结

李敬果,翟晓翔,张翠侠,陈向辉

(徐州市中医院皮肤科,江苏徐州221003)

Livin是近年来发现的人类凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptos protein,IAP)家族的新成员,特异性高表达于某些实体肿瘤组织和肿瘤细胞系,能抑制许多凋亡刺激剂诱发的细胞凋亡。Ki-67是反映肿瘤细胞增殖活性的指标,与肿瘤的发展、转移及预后高度相关。作者应用免疫组织化学方法检测皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,CSCC)组织中 Livin 的表达,并探讨其表达与细胞增殖及CSCC临床病理特征的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 40例CSCC标本取自徐州市中医院病理科2003年至2010年存档蜡块。40例患者中,男性22例,女性18例;年龄38~81岁,平均年龄66岁;面、颈等暴露部位27例,胸、背、四肢及阴部等非暴露部位13例;根据Broders分类,Ⅰ级12例,Ⅱ级18例,Ⅲ~Ⅳ级10例;有淋巴结转移者8例,无淋巴结转移者32例。另取10例正常皮肤组织作为对照。

1.2 检测方法 采用免疫组织化学S-P法检测Livin及Ki-67的表达。Livin单克隆抗体购自武汉博士徳公司,Ki-67单克隆抗体、S-P试剂盒、DAB酶底物显色试剂盒均购自福州迈新生物技术开发有限公司。检测具体步骤按试剂盒说明书进行,用已知阳性切片作为阳性对照,PBS代替一抗作阴性对照。Livin以肿瘤细胞的细胞质出现棕黄色颗粒为阳性信号;Ki-67以肿瘤细胞的细胞核出现棕黄色颗粒为阳性信号,随机选择10个高倍镜(×400)视野,每个视野计数100个肿瘤细胞,计算阳性细胞数占肿瘤细胞总数的百分比,即Ki-67的增殖指数。

1.3 统计学处理 采用SPSS 11.0进行统计学分析,计量资料比较采用t检验,计数资料比较采用χ2检验,检验水准 α=0.05。

2 结果

2.1 Livin的表达 40例CSCC组织中Livin的阳性率为70.00%(28/40),而正常皮肤组织中无表达,差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2 Livin的表达与Ki-67增殖指数的关系 CSCC组织中Ki-67的阳性率为75.00%(30/40),Livin阳性表达CSCC的Ki-67增殖指数为(36.15±20.27)%,Livin阴性者的Ki-67增殖指数为(20.36±10.82)%,差异有统计学意义(P<0.05)。

2.3 Livin的表达与CSCC临床病理特征的关系Livin的表达与CSCC的病理分级、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与患者性别、年龄及肿瘤部位无关(P均 >0.05)。见表1。

3 讨论

CSCC在我国的发病率居皮肤恶性肿瘤之首,占皮肤恶性肿瘤的78.5% ~90.9%[1],且发病率呈上升趋势。目前,CSCC发病机制仍不十分清楚,但多数肿瘤的发生是细胞凋亡与增殖失衡所致,受细胞内外多种因素控制。随着肿瘤分子生物学的研究进展,人们试图从分子水平揭示肿瘤发生、发展的机制,并期望通过调节细胞的凋亡和增殖达到治疗肿瘤的目的。

越来越多的研究表明,Livin基因在肿瘤的发生、发展中起重要作用,并逐渐成为人们研究的热点[2-3]。Livin是凋亡抑制因子,在多种肿瘤细胞中表达,其抑制细胞凋亡主要作用机制如下:BIR区与Caspases家族结合,抑制其活性,尤其是抑制Caspase-3、Caspase-7和Caspase-9的活性,阻止Caspases家族蛋白在细胞凋亡时执行蛋白切除功能,进而阻断凋亡受体及以线粒体为基础的凋亡途径[4],使有利于细胞的增殖及异常基因进一步积聚,从而促进细胞向恶性方向转化及肿瘤的发展。目前针对CSCC组织中Livin表达状况的研究较少。本研究结果显示,Livin在正常皮肤组织中不表达,而在CSCC组织中的阳性率为70.00%,提示其可能通过抑制肿瘤细胞凋亡对CSCC的发生、发展起重要作用,检测Livin可能对CSCC的诊断有重要价值;病理分级Ⅲ~Ⅳ级的CSCC组织中Livin的阳性率为90.00%,明显高于Ⅰ、Ⅱ级的41.67%和77.78%;有淋巴结转移的CSCC组织中Livin的阳性率为100.00%,明显高于无淋巴结转移者的62.50%。这些均表明检测Livin的表达对CSCC恶性程度及预后的判断有一定的参考价值,对CSCC的发生、临床进展和生物学行为评估也可能具有一定指导意义。

Ki-67是反映肿瘤细胞增殖活性的指标,其表达随细胞周期不同而发生改变,在有丝分裂G1期到晚期出现,S期和G2期逐渐增加,M期达到最高值,在细胞分裂晚期很快消失,G0期不表达。Ki-67仅在增殖细胞核中表达,其半衰期短,脱离细胞周期后迅速降解,已成为检测肿瘤细胞增殖活性的可靠指标[5]。Ki-67增殖指数高低与许多肿瘤的分化程度、浸润、转移及预后密切相关[6]。本研究结果显示,Ki-67在CSCC组织中的阳性率为75.00%,且Livin表达与Ki-67增殖指数有关,提示Livin蛋白促进细胞的增殖,两者有可能在CSCC的发生、发展中共同发挥作用。

综上所述,Livin不仅参与了凋亡的调控,还促进了细胞的增殖,在CSCC的发生、发展中起重要作用,可作为判断CSCC恶性程度、评价预后的指标。

[1]赵辨.临床皮肤病学[M].3版.南京:江苏科学技术出版社,2001:1106-1110.

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