负离子添加剂对肉鸡血液及免疫指标的影响

■李雅茹 高印林 全世元 张敏

（1.敦化市畜牧局，吉林敦化 133700；2.敦化市动物检疫站，吉林敦化133700；3.延边大学，吉林延吉 133000）

由于抗生素、激素、高锌和高铜添加剂在养殖业和生态环境中引起的负面影响，各国相继推出对这些饲料组分限制使用的法规。开发具有替代抗生素效果的饲料，同时又能保护生态环境是动物营养与饲料领域研究的热门话题。因此，饲料研究领域开发了许多新型的绿色添加剂，其中包括酶制剂、寡糖制剂、益生素、合生元、中药制剂和纳米矿物质等，这些添加剂都在不同程度上促进了动物对营养素的吸收利用，刺激动物自身免疫力的提高，改善畜产品质量。研究资料证明，本试验使用的负离子添加剂是采用纳米技术生产的新型添加剂，与普通添加剂相比具有特殊功能，能够替代饲料中的抗生素，可以清除动物组织中的残留药物，促进动物机体免疫力的提高，降低动物养殖过程的死亡率[1-3]。为研究负离子添加剂对肉鸡血液常规指标和肉鸡免疫能力的影响，我们进行了关于血液指标和免疫指标的分析，以验证负离子添加剂在肉鸡养殖业中的可应用性。

1 材料与方法

1.1 试验用负离子添加剂组成

负离子添加剂组成：由硫磺矿物粉（为纳米技术处理）、电气石粉、锗矿粉、铁矿粉、硒矿粉、硅粉和稀释剂通过特殊的加工工艺配制而成。

普通添加剂组成：以市售的禽通用型微量矿物元素为主与稀释剂配制而成。

1.2 试验设计及供试动物的选择

试验自2012年12月1日起至2013年1月11日止在敦化肉鸡场进行，饲养试验为期42 d。试验选择健康的1日龄AA肉仔鸡(公鸡)360只，按体重随机分成两组，分别为硫磺负离子矿物质组和普通矿物质组（即对照组），分别添加0.2%负离子添加剂和0.2%市售添加剂，基础日粮组成及营养水平见表1。每组试验鸡180只，组内设3个重复，每个重复组60只。经方差分析各组肉鸡平均初始体重差异均不显著（P＞0.05）。

鸡舍在入雏前15 d先用生石灰撒于地面消毒，入雏前10 d开始每两天用5%百毒杀消毒液对平网、料槽、水槽、鸡舍墙壁和地面进行喷雾消毒1次，前4 d给鸡舍供暖，用高锰酸钾进行24 h熏蒸消毒（注意：把所有的窗口、通气口堵严，熏蒸时舍温要求在25℃以上，湿度应在75%以上），熏蒸后及时放出有害气体。所有鸡只全部采用网上平养。全期采用常规管理制度，以干粉料饲喂，保证自由采食和饮水，进行常规免疫和消毒。每周带鸡消毒两次，免疫期间不带鸡消毒。入雏后前3 d保持24 h光照，3 d后改为23 h光照，即晚间关灯1 h。

1.3 样品采集与测定方法

1.3.1 血液指标分析

40日龄时，每个重复组取10只鸡（每组10×3=30只鸡），用一次性注射器进行翼下静脉采血，采血量为5 ml/只。采血后静置12 h，用XYJ80-2型电动离心机离心10 min（3 500 r/min），取血清样置于低温冰箱（-80℃）中保存。

表1 AA肉鸡日粮组成及营养水平

血清总蛋白含量的测定采用微量凯氏（Kjeldahl）定氮法；血清尿素氮、甘油三酯、胆固醇含量的测定采用比色法；血清葡萄糖浓度(GLU)采用葡糖糖氧化酶法；血清钙、钾浓度的测定采用比色法；谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性的测定采用改良金氏（King）法；血中免疫球蛋白含量采用半自动生化分析仪测定，其全部指标值的测定均在延边医院完成。

1.3.2 免疫器官指数

剥离脾脏、法氏囊和左侧胸腺(去除周围的脂肪)，迅速称其鲜重，计算免疫器官指数。

1.4 统计分析

所有数据采用SPSS12.0软件处理，差异显著性检验采用单因素方差分析。

2 试验结果与分析

2.1 负离子添加剂对肉鸡血清蛋白和肝功的影响（见表2）

由表2可知，试验组的血清总蛋白含量相对于对照组提高21.85%，差异极显著（P＜0.01）。试验组的谷丙转氨酶和谷草转氨酶酶活比对照组提高1.76%和0.14%（P＞0.05）。

表2 负离子添加剂对肉鸡血清蛋白和肝功的影响

血清总蛋白一般分为清蛋白和球蛋白两大类，主要作用是维持动物血管内正常胶体渗透压和酸碱度、运输多种组织代谢物、调节被运输物质等多种生理功能；同时与肉鸡机体免疫功能有着极为密切的关系。血清总蛋白水平主要反映肉鸡肝脏的合成功能和肾脏病变引起蛋白质丢失的情况，也可以通过血清总蛋白间接了解肉鸡机体的营养水平，判断肉鸡日粮中营养素的代谢状况。纳米硫磺负离子和锗负离子均具有促进血清总蛋白含量提高的作用。铁矿粉中的亚铁离子是合成血红蛋白的重要成分，因此对血清总蛋白含量的提高也具有一定的促进作用。谷丙转氨酶和谷草转氨酶在正常情况下，主要存在于肝细胞中，当肝细胞受损时，这两种酶会被释放到血液中，通过血液检查谷丙转氨酶和谷草转氨酶酶活可判断肉鸡的肝脏功能。通常在肉鸡患有肝脏疾病时这两种酶会超出正常值范围而极剧升高。负离子添加剂组的谷丙转氨酶和谷草转氨酶与对照组相比变化不明显，说明负离子添加剂对肉鸡肝脏无明显损伤。

负离子添加剂具有促进血清总蛋白含量提高作用，而对于血中的谷丙转氨酶和谷草转氨酶酶活无显著影响。

2.2 负离子添加剂对肉鸡甘油三酯和胆固醇含量的影响（见表3）

表3 负离子添加剂对肉鸡甘油三酯和胆固醇含量的影响（mmol/l）

由表3可知，试验组的甘油三酯和胆固醇含量分别比对照组降低53.57%和64.53%，差异极显著（P＜0.01）。

甘油三酯（TG）是长链脂肪酸与甘油缩合脱去三个水分子而形成的。甘油三酯是肉鸡体内的主要贮存能量的形式，血中的甘油三酯与肝脏中蓄积脂肪量是正相关关系，当血中甘油三酯降低时，意味着肝脏中的甘油三酯也会降低。胆固醇是一种环戊烷多氢菲的衍生物。胆固醇广泛存在于肉鸡的脑和神经组织中，同时在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也比较高，作为肉鸡细胞膜的组成成分，也是合成胆汁酸、维生素D以及甾体激素的重要原料，主要溶解于脂溶性溶剂。胆固醇虽然在人和动物体内具有广泛的生理作用，但高胆固醇血症会导致人类的动脉粥样硬化、静脉血栓形成与胆石症，因此含胆固醇高的动物性食品也是导致这些疾病在现代人类社会迅速增长的主要原因。当肉鸡血中胆固醇含量降低时，在鸡肉中沉积的胆固醇的含量会降低，并减少了肉鸡皮下脂肪和脏器周围的脂肪，鸡肉产品更符合目前百姓的消费理念。负离子添加剂具有降低血中甘油三酯和胆固醇的作用。

2.3 负离子添加剂对肉鸡尿素氮含量和其他血液指标的影响（见表4）

表4 负离子添加剂对肉鸡尿素氮含量和其他血液指标的影响（mmol/l）

从表4可知，试验组血中尿素氮和血糖含量分别比对照组降低了31.22%和20.66%，差异显著（P＜0.05）。试验组血清钙相对于对照组提高50.27%，差异极显著（P＜0.01）。

尿素氮是肉鸡蛋白质代谢的最终产物。氨基酸脱掉的NH3在肝脏中与CO2合成尿素。肾脏是排泄尿素的主要器官，尿素从肾小管经过时，各段均可重吸收，当肾功能损害时，血中的尿素浓度就会增加。当肉鸡体内蛋白质的合成速度大于分解速度时，血中的尿素浓度就会降低。负离子添加剂具有降低血中尿素氮浓度的作用，说明负离子添加剂具有促进肉鸡体内蛋白质合成作用，对肾脏也无损伤。肉鸡血液中的糖大部分是葡萄糖。肉鸡体内各个组织器官细胞的活动所需要的能量都是由葡萄糖供给。当血糖高出或低于正常生理常数时，说明血糖无法在肉鸡体内转化和代谢，胰岛素和胰高血糖素分泌紊乱。负离子添加剂具有降低血糖作用，且不低于正常值。钙是肉鸡体内含量最多的阳离子，99%以上钙存在于骨骼中，少量的钙在细胞外液中维持神经肌肉的正常兴奋性。非疾病状态下，血中钙浓度升高说明肉鸡从消化道中吸收入血的钙离子增多，有利于钙在骨骼中的沉积，维持神经肌肉组织的正常兴奋性[4-5]。本试验中血钙浓度升高，说明负离子添加剂具有促进饲料中钙离子吸收的作用，有利于肉鸡的正常生长，并维持神经肌肉组织的正常功能。

试验组血清钾离子略高于对照组，但统计分析表明各组之间差异不显著（P＞0.05），说明使用负离子添加剂不会影响血中钾离子浓度，对动物的钾离子代谢不会有不良影响。

2.4 负离子添加剂对肉鸡免疫球蛋白含量的影响（见表5）

表5 负离子添加剂对肉鸡免疫球蛋白含量的影响（g/l）

由表5可知，试验组的IgG含量为2.96 g/l，对照组为0.90 g/l，相对提高228.89%，差异极显著（P＜0.01）。试验组的IgA和IgM相对于对照组分别提高154.54%和110.34%，差异极显著（P＜0.01）。

免疫球蛋白G（IgG）是肉鸡免疫球蛋白的主要成分，一般占肉鸡总免疫球蛋白含量的75%以上，是肉鸡体内初级免疫应答中最持久、最重要的免疫球蛋白，无论是对肉鸡的主动免疫还是被动免疫都起重要作用。肉鸡的IgA可分为血清型和分泌型两种，血清型IgA具有介导调理吞噬ADCC功能；分泌型IgA是肉鸡机体黏膜防御系统的主要成分，主要覆盖在鼻、咽、气管、肠和膀胱黏膜的表面，它能抑制病菌和病毒在呼吸道上皮附着，能够更加有效地减缓病毒繁殖，是黏膜极为重要的屏障。免疫球蛋白M（IgM）是肉鸡产生的三个重要抗体类型之一。IgM抗体结合的抗原分子，有中和破坏抗原的免疫应答作用[4-6]。肉鸡免疫系统是防止细菌和病毒入侵肉鸡体内的第一道屏障。负离子添加剂具有促进血清中三种免疫球蛋白含量提高的作用，说明负离子添加剂对肉鸡自身免疫力提高具有积极的促进作用。

2.5 负离子添加剂对肉鸡免疫器官指数的影响（见表6）

表6 负离子添加剂对肉鸡免疫器官指数的影响（g/kg）

由表6可知，试验组的法氏囊指数、胸腺指数和脾脏指数分别比对照组提高13.07%、21.16%和12.88%（P＜0.05）。法氏囊是肉鸡体液免疫器官,在肉鸡整体免疫机制上起着重要的作用。法氏囊指数的提高说明肉鸡抵抗疾病的能力提高了。在基础日粮中负离子添加剂具有促进胸腺指数提高的作用，从组织学角度看，负离子添加剂提高了肉鸡的抗病力。肉鸡的脾脏是最大的周围淋巴样器官，肉鸡脾脏由红髓和白髓构成，具有造血和血液过滤作用，同时也是肉鸡淋巴细胞迁移和接受抗原刺激后发生免疫应答、及时产生免疫效应分子的重要场所[7-8]。脾脏指数提高也说明了在基础日粮中添加负离子添加剂具有提高肉鸡免疫力的作用。

3 结论

试验结果表明，负离子添加剂提高了血清总蛋白含量、免疫球蛋白含量、免疫器官指数和血钙含量；降低了血中的甘油三酯、胆固醇、血糖和尿素含量。负离子添加剂具有提高肉鸡免疫力的作用。负离子添加剂可以在肉鸡养殖业大面积推广，在一定程度上可以替代抗生素在肉鸡饲料中的使用，使鸡肉产品安全可靠，符合目前市场上的需求。