气相色谱法测定吡喹酮及片剂的残留溶剂

郑 静，王小兵，徐志洲

（山东省食品药品检验所，山东济南250101）

气相色谱法测定吡喹酮及片剂的残留溶剂

郑 静，王小兵，徐志洲

（山东省食品药品检验所，山东济南250101）

目的建立气相色谱法测定吡喹酮及片剂中的四种残留溶剂。方法采用DB－624（30 m×0.5 mm，0.5μm）色谱柱，柱温箱程序升温，采用FID检测器对乙醇和乙酸乙酯进行检测，采用ECD检测器对三氯甲烷和二氯甲烷进行检测。结果乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、二氯甲烷四种残留溶剂分别在0.051 0～5.102 4 mg·mL－1，0.050 0～4.995 0 mg·mL－1，0.515 8～51.58μg·mL－1，5.008 0～500.8μg·mL－1范围内呈良好的线性关系，相关系数均大于0.999 5。结论建立的气相色谱法简单、快速、准确，可用于吡喹酮原料及其制剂中的残留溶剂的检测，为国家评价性抽验工作提供技术支持。

吡喹酮；残留溶剂；气相色谱法

吡喹酮片为国家基本药物，主要是政府采购，作为卫生部、国家战略储备药物，免费发放使用。现主要用于治疗各种血吸虫病、华支睾吸虫病、肺吸虫病、姜片虫病以及绦虫病和囊虫病［1，2］。《中国药典》2010年版及各国外药典吡喹酮原料及其制剂均未在各论中规定残留溶剂检查。但吡喹酮原料及制剂在生产过程中所使用的残留溶剂有乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷及二氯甲烷［3～5］。其中，乙醇、乙酸乙酯是第三类溶剂，限度均是0.5%，三氯甲烷、二氯甲烷是第二类溶剂，限度分别为0.006%、0.06%。因此，本文建立了气相色谱法对吡喹酮及其片剂中的残留溶剂进行快速、准确的检测。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 7890气相色谱仪（含FID、ECD，美国Agilent公司），BP211D电子天平（德国Sartorius公司）。

1.2 试药 吡喹酮原料：2个生产厂家，共2批；吡喹酮片：2个生产厂家，共12批，均为0.2 g规格，其中相同批号2批为不同使用单位取得；试剂：均为色谱纯，天津市康科德科技有限公司。

2 方法与结果

2.1 溶液配制 对照品溶液A：分别精密称取乙醇及乙酸乙酯各50 mg置同一100 mL量瓶中，加二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀。

对照品溶液B：分别精密称取三氯甲烷6 mg及二氯甲烷60 mg置同一10 mL量瓶中，加二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL置100mL量瓶中，加二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀。

供试品溶液：精密称取片粉或原料约1 g置10 mL量瓶中，加二甲基甲酰胺溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液。

2.2 色谱条件

2.2.1 条件1 适用于测定乙醇及乙酸乙酯，色谱柱：Agilent DB－624（30 m×0.5 mm，0.5μm）；柱温：初始温度为50℃，保持10 min，以30℃·min－1升温至200℃，保持5 min；其余色谱参数见表1。

2.2.2 条件2 适用于测定三氯甲烷及二氯甲烷，色谱柱：Agilent DB－624（30 m×0.5 mm，0.5 μm）；柱温：初始温度为70℃，保持3.5 min，以50℃·min－1升温至200℃，保持3 min，平衡时间：1 min；其余色谱参数见表1。

表1 气相参数设置表

2.3 线性关系

2.3.1 标准储备液的配制 分别精密称取乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、二氯甲烷适量，用二甲基甲酰胺稀释至刻度，使浓度分别为5.102 4、4.995 0、0.051 58、0.500 8 mg·mL－1，作为标准储备液。

2.3.2 标准曲线溶液的配制 分别精密量取标准储备液0.1、0.5、1.0、2.0、10 mL分别置10 mL量瓶中，加二甲基甲酰胺稀释至刻度，作为标准曲线工作溶液。分别精密量取1μL进样，记录色谱图，以峰面积（A）对其浓度（C）进行线性回归，得线性方程，见表2。

表2 各残留溶剂的线性方程及相关系数

2.4 进样精密度 取对照品溶液A、对照品溶液B，照“2.2”项下的色谱条件，连续进样5次，分别计算各残留溶剂的峰面积的RSD，分别为0.5%、0.7%、1.2%、1.0%。

2.5 溶液稳定性考察 取供试品溶液，照“2.2”项下的色谱条件，于0、1、2、4、6、8 h，分别注入气相色谱仪，计算各残留溶剂的峰面积的RSD，结果均小于2.0%。

2.6 回收率与重复性 取空白辅料，按处方比例制备模拟样品，并于供试品溶液中分别加入对照品溶液A及对照品溶液B，分别配置低、中、高3个浓度，每个浓度3份，以确定本法的回收率及重复性，结果见表3。

表3 回收率与重复性实验结果

2.7 样品测定 取吡喹酮原料2批，吡喹酮片12批，按“2.1”项下方法处理，精密量取1μL注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得，结果二氯甲烷与乙酸乙酯均未检出，乙醇、三氯甲烷检验结果见表4。

表4 各残留溶剂检测结果表

续表4：

3 讨论

3.1 吡喹酮原料及其片剂中，乙酸乙酯和二氯甲烷检出率为0，经分析，这两种溶剂为原料合成过程中上游反应所涉及的溶剂，在后续试验过程中已基本没有残留，我们的试验结果与厂家测试结果一致。

3.2 乙醇和三氯甲烷的检出率则为100%，其中乙醇在原料的合成过程及薄膜衣的包衣过程中均有使用，而三氯甲烷是吡喹酮原料合成过程中所用到的有机溶剂，且在后续处理过程中不易除去。

3.3 该方法操作简便、测定准确、数据可靠，为吡喹酮及片剂中残留溶剂的测定提供一种有效的测定方法。

［1］黄一心，肖树华.抗蠕虫药吡喹酮的研究与应用［M］.北京：人民卫生出版社，2008.

［2］杨振坤，汪伟，梁幼生.吡喹酮抗血吸虫的免疫机制研究进展［J］.中国热带医学，2013，13（2）：240－244.

［3］王东升，沙娜，陈勇.吡喹酮合成新方法研究［J］.化学世界，2013，54（11）：666－669.

［4］马丽霞，陈伟利，刘阳，等.吡喹酮缓释植入剂的研制［J］.药学研究，2013，32（6）：342－344.

［5］王风军，马淑涛，翟吉胜.吡喹酮中间体N－苯乙基氯乙酰胺的合成工艺改进［J］.药学研究，2013，32（12）：740－741.

表1 加样回收试验结果

结果显示：本品回收率均在95.0%～105.0%之间，RSD＝1.39%，回收率良好。

结论：经验证，本方法线性、精密度、溶液稳定性、重复性、回收率良好，可以用于补气活血胶囊中芍药苷的含量测定。

2.2.9 样品含量测定及限度的确定 按上述测定方法，测定9批样品中芍药苷的含量，结果见表2。

根据上述测定结果，考虑到实际生产中赤芍的来源及产地不同，暂定本品每粒含芍药苷不得少于1.10 mg。

表2 9批样品中芍药苷的含量测定结果

3 讨论

在补气活血胶囊质量标准研究中，黄芪、赤芍、红花的薄层鉴别斑点清晰，效果较好，阴性无干扰；用HPLC法测得的芍药苷含量较高，且在本条件下，其HPLC峰不受杂质峰的干扰，测定结果准确、可靠，可用于本品的质量控制。

参考文献：

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版（一部）［S］.北京：中国医药科技出版社，2010.

［2］王艺纯，王东平，王明翠，等.痔康胶囊的质量标准研究［J］.齐鲁药事，2011，30（10）：567－569.

Determ ination of residual solvents in praziquantel and its tablets by GC

ZHENG Jing，WANG Xiao-bing，XU Zhi-zhou
（Shandong Institute for Food and Drug Control，Jinan 250101，China）

ObjectiveTo establish an GCmethod for the determination of residual solvents in praziquantel and its tablets.MethodsAgilent DB－624（30 m×0.5 mm×0.5μm）column was used，the column temperature was programmed.Ethanol and ethyl acetate were detected by FID，chloroform and methylene chloride were detected by ECD.ResultsThe calibration curve of four residual solvents was linear in the concentration range of 0.051 0～5.102 4 mg·mL－1，0.050 0～4.995 0 mg·mL－1，0.515 8～51.58μg·mL－1，5.008 0～500.8μg·mL－1，respectively.The correlation coefficient r＞0.999 5.ConclusionThemethod was simple，rapid，accurate and can be used for the determination of residual solvents in praziquantel and its tablets.

Praziquantel；Residual solvents；GC

R927.1

：A

2095－5375（2014）03－0145－003

国家药品评价性抽验项目（No.2011－57）

郑静，女，主管药师，研究方向：药品检验，药品标准起草、复核，E－mail：13573142128＠163.com

徐志洲，男，主任药师，研究方向：药品标准起草、复核，Tel：0531－81216555，E－mail：sdyjxzz＠163.com