HPLC法同时测定氯雷他定糖浆中氯雷他定和苯甲酸钠的含量

郭 玉，王瑞梅，吴善霞

（鲁南制药集团股份有限公司，山东临沂276000）

HPLC法同时测定氯雷他定糖浆中氯雷他定和苯甲酸钠的含量

郭 玉，王瑞梅，吴善霞

（鲁南制药集团股份有限公司，山东临沂276000）

目的采用高效液相色谱法同时测定氯雷他定糖浆中氯雷他定和苯甲酸钠的含量。方法采用Agilent Zorbax Eclipse XDB－pheny（4.6 mm×150 mm，3.5μm）色谱柱，以甲醇－乙腈－0.05 mol·L－1磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.5）（15∶10∶75）为流动相；流速：1 mL·min－1，检测波长：254 nm，柱温：30℃。结果氯雷他定在40.18～140.62μg·mL－1范围内线性关系良好（r＝0.999 9），苯甲酸钠在39.94～139.78μg·mL－1范围内线性关系良好（r＝0.999 9），平均回收率分别为100.05%（RSD＝0.52%，n＝6）、100.18%（RSD＝0.36%，n＝6）。结论本方法简便、快速、准确，重复性好，可用于氯雷他定糖浆中氯雷他定和苯甲酸钠的含量测定。

高效液相色谱；氯雷他定；苯甲酸钠；含量测定

氯雷他定为长效三环类抗组胺药，具有选择性抗外周组胺H1受体的作用，在治疗剂量范围内无嗜睡作用，可用于缓解过敏性鼻炎有关的症状，亦适用于缓解慢性荨麻疹及其他过敏性皮肤病的症状［1，2］。苯甲酸钠为食品和药品中的常用防腐剂，被广泛使用，也为氯雷他定糖浆中的防腐剂，但过量摄入防腐剂会对人体产生一定的毒性［3～6］，我国对食品及口服药品中苯甲酸及钠盐的使用量均有限制，中国药典规定不得超过0.3%［7］。目前能同时测定氯雷他定和苯甲酸钠含量的方法尚未见有文献报道［8，9］，我们通过试验建立了同时测定氯雷他定糖浆中氯雷他定和苯甲酸钠含量的HPLC法，并进行了方法学考察研究，本方法操作简单，结果可靠，重现性好，可作为氯雷他定糖浆的质量控制方法之一。

1 仪器与试药

Agilent1200系列高效液相色谱仪（安捷伦科技有限公司，配四元泵、自动进样器、VWD检测器）；十万分之一电子天平（Mettler Toledo XS205）；氯雷他定对照品（来源：中国食品药品检定研究院；批号：100615－200602）；苯甲酸钠对照品（来源：中国食品药品检定研究院；批号：100433－200301）；氯雷他定糖浆（鲁南贝特制药有限公司提供，批号：130901，130902130903）；甲醇（色谱纯）；磷酸二氢钾（分析纯）；磷酸（色谱纯）；水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent Zorbax EclipseXDB－pheny（4.6 mm×150 mm，3.5μm）色谱柱；流动相：甲醇－乙腈－0.05 mol·L－1磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.5）（15∶10∶75）；流速：1.0 mL·min－1；检测波长：254 nm；柱温：30℃；进样量：20μL。理论塔板数按氯雷他定峰计算不低于2 000，氯雷他定与苯甲酸钠的分离度应符合规定。

2.2 对照品溶液的制备 取氯雷他定对照品和苯甲酸钠对照品各适量，精密称定，加乙腈－水（40∶60）溶解并稀释制成每1 mL中约含氯雷他定与苯甲酸钠均为100μg的混合溶液，摇匀，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 用内容量移液管精密量取本品适量（约相当于氯雷他定5 mg），置50 mL容量瓶中，加乙腈－水（40∶60）溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.4 阴性空白溶液的制备 用内容量移液管精密量取空白糖浆适量（约相当于氯雷他定5mg），置50 mL容量瓶中，加乙腈－水（40∶60）溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为阴性空白溶液。

照上述色谱条件，分别精密量取对照品溶液、供试品溶液、阴性空白溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明：理论板数按氯雷他定峰计算为9 912，氯雷他定与苯甲酸钠的分离度为20.39，均符合要求；空白辅料对二者含量测定无干扰。色谱图分别见图1－A、图1－B、图1－C。

图1 氯雷他定糖浆含量测定HPLC图谱

2.5 线性关系考察 精密称取氯雷他定对照品／苯甲酸钠对照品各25 mg，置50 mL容量瓶中，加乙腈－水（40∶60）溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2、3、4、5、6、7 mL分别置25 mL容量瓶中，用乙腈－水（40∶60）稀释至刻度，摇匀，依法测定。以浓度C（μg·mL－1）为横坐标，峰面积A为纵坐标，进行线性回归，得氯雷他定和苯甲酸钠的回归方程分别为：A＝30.63C＋9.36（r＝0.999 9）、A＝6.00C＋1.19（r＝0.999 9）。结果表明氯雷他定和苯甲酸钠检测浓度线性范围分别为：40.18～140.62μg·mL－1、39.94～139.78μg·mL－1。

2.6 精密度试验 取“2.2”项下对照品溶液，依法测定，连续进样6次，以峰面积考察精密度，结果氯雷他定与苯甲酸钠峰面积的 RSD分别为0.21%、0.18%。

2.7 溶液的稳定性试验 取对照品溶液，分别在配制后0、1、2、4、6和8 h取样测定，氯雷他定与苯甲酸钠峰面积的RSD分别为0.12%和0.07%，表明溶液至少在8 h之内稳定。

2.8 回收率试验 取氯雷他定对照品／苯甲酸钠对照品各约25 mg，共6份，精密称定，分别置50 mL容量瓶中，按处方量比例加入空白糖浆，加乙腈－水（40∶60）溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取5 mL，各置25 mL容量瓶中，加乙腈－水（40∶60）稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取氯雷他定对照品和苯甲酸钠对照品各适量，加乙腈－水（40∶60）溶解并稀释制成每1 mL中约含氯雷他定与苯甲酸钠均为100μg的混合溶液，作为对照品溶液。取样依法测定并计算回收率，氯雷他定与苯甲酸钠的平均回收率分别为100.05%（RSD＝0.52%，n＝6）、100.18%（RSD＝0.36%，n＝6）。

2.9 定量限与检测限 取对照品溶液，经逐步稀释后测定，以信噪比S／N≈10时的浓度为定量限浓度、S／N≈3时的浓度为检测限浓度，结果显示：氯雷他定的定量限为2.4 ng，检测限为0.8 ng；苯甲酸钠的定量限为1.6 ng，检测限为0.6 ng。

2.10 样品测定 取本品3批，按上述方法进行含量测定，结果见表1。

表1 氯雷他定糖浆含量测定结果

3 讨论

苯甲酸钠在《中国药典》2010年版（二部）［7］中有收载，含量采用滴定法测定，操作比较繁琐。本品中苯甲酸钠含量较低，若仍采用滴定法测定，结果可能会有较大误差，而本试验建立的HPLC法能同时测定氯雷他定糖浆中苯甲酸钠与氯雷他定的含量，操作简单，结果可靠，专属性强，可有效控制本品的质量。

试验初期曾选用C18柱，分别以甲醇－磷酸盐缓冲液（色谱图见图1－D）以及乙腈－磷酸盐缓冲液作流动相（色谱图见图1－E）试验，效果均不理想，苯甲酸钠由于出峰较快，易受到溶剂峰的干扰。后换用苯基柱，以甲醇－乙腈－磷酸盐缓冲液作流动相试验，峰形良好，且能排除干扰，系统稳定，可用于氯雷他定糖浆的质量控制。

［1］应作霖，吴瑞勤，徐晓寅，等.咪唑斯汀和氯雷他定抗炎作用的比较研究［J］.中国麻风皮肤病杂志，2006，22（5）：377－379.

［2］蔡霞，李桂冬.抗过敏新药－地氯雷他定［J］.齐鲁药事，2006，25（6）：382.

［3］吕娜.食品防腐剂苯甲酸钠的急性毒性及致畸性实验［J］.毒理学杂志，2006，20（5）：326－327.

［4］吕娜，沈明浩.食品防腐剂苯甲酸钠的蓄积毒性及精子毒性研究［J］.毒理学杂志，2011，25（3）：241－242.

［5］邹志飞，吴赤莲，郑立新，等.苯甲酸钠的毒性兴奋效应及其所致损害［J］.毒理学杂志，2010，24（4）：300－302.［6］王思文，巩江，高昂，等.防腐剂苯甲酸钠的药理及毒理学研究［J］.安徽农业科学，2010，38（30）：16724，16846.

［7］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版（二部）［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：437.

［8］张带荣，周利娟.高效液相色谱法测定氯雷他定糖浆中氯雷他定含量［J］.中国医院药学杂志，2007，27（9）：1316－1317.

［9］张德强，柯东华，莫祝荣.氯雷他定糖浆含量及有关物质的HPLC测定［J］.今日药学，2011，21（3）：167－169.

Simultaneous determ ination of loratadine and sodium benzoate in Loratadine Syrup by HPLC

GUO Yu，WANG Rui-mei，WU Shan-xia
（Lunan Pharmaceutical Group Co.，Ltd.，Linyi276000，China）

ObjectiveTo establish an HPLCmethod for the simultaneous determination of loratadine and sodium benzoate in Loratadine Syrup.M ethodsAgilent Zorbax Eclipse XDB－pheny column（4.6 mm×150 mm，3.5μm）was adopted with methanol－acetonitrile－0.05 mol·L－1potassium dihydrogen phosphate（pH was adjusted to 3.5 by phosphate）（15∶10∶75）asmobile phase.The flow rate was 1.0 mL·min－1，the detection wavelength was 254 nm and the column temperaturewas30℃.ResultsThe linear rangeswere40.18～140.62μg·mL－1for loratadine（r＝0.999 9）and 39.94～139.78μg·mL－1for sodium benzoate（r＝0.999 9），the average recoveries were 100.05%（RSD＝0.52%，n＝6）and 100.18%（RSD＝0.36%，n＝6），respectively.ConclusionThemethod was simple，sensitive and accurate，and it can be applied to the concentration determination of loratadine and sodium benzoate in Loratadine Syrup.

HPLC；Loratadine；Sodium benzoate；Determination

R927.2

A

2095－5375（2014）10－0581－003

郭玉，男，研究方向：西药质量控制分析，E－mail：vipguoyu＠163.com