60Co-γ射线对盐酸四环素原料灭菌的研究

黄波，赵全如，刘莉萍

南京白敬宇制药有限责任公司，南京 210038

60Co-γ射线对盐酸四环素原料灭菌的研究

黄波，赵全如，刘莉萍

南京白敬宇制药有限责任公司，南京 210038

采用不同剂量的60Co-γ射线对盐酸四环素原料进行辐射灭菌，结合稳定性考察数据，最终确定盐酸四环素原料的60Co-γ射线的辐射剂量为9 kGy时，其理化检测指标符合USP的要求，且无菌检查符合要求。

60Co-γ射线；无菌；灭菌；盐酸四环素；稳定性

随着盐酸四环素的应用从普通的口服和局部皮肤给药制剂，向滴眼液、眼膏、注射液等无菌剂型延伸。对于盐酸四环素原料的微生物负荷的要求，被提高到无菌级别。由于盐酸四环素不耐高温，水中易分解，所以不能使用传统热力学灭菌法进行灭菌；而常用的环氧乙烷气体灭菌法，对含氯的物品不宜使用，因此盐酸四环素只能采用辐射法进行灭菌。

辐射灭菌法最常用的是60Co-γ射线辐射灭菌。本试验即针对60Co-γ射线的剂量对盐酸四环素的影响展开研究。

1 材料

盐酸四环素原料（华北制药天星有限公司，药用级）。

2 方法与结果

2.1 微生物限度检查

取3个批号的盐酸四环素原料（20120117、20120326、20120540），按照《中国药典》2010年版二部微生物限度检查法，进行微生物限度检查和无菌检查。微生物限度检查结果为细菌数和真菌数均小于10 cfu/g，控制菌未检出；无菌检查结果3个批号的盐酸四环素原料均为非无菌产品。

2.2 辐射灭菌

在百级洁净工作台上，将每个批号分成4份（每份分成20小包，双层包装密封）。其中1份不进行辐射灭菌，另外3份委托江苏瑞迪生科技有限公司进行辐射灭菌。

根据灭菌法的过度杀灭原则[1]，结合江苏瑞迪生科技有限公司辐射设备运行情况，选择灭菌至无菌的可能的辐射剂量，从低到高依次为4 kGy、6 kGy、9 kGy，进行辐射灭菌[2-5]。根据灭菌后结果决定是否再增加辐射剂量。

灭菌前后的原料，按照USP[2]中的检验项目（性状、鉴别、pH、比旋度、干燥失重、重金属、盐酸4-差向脱水四环素限度、盐酸四环素含量、无菌检查）和检验方法进行对比检验。见表1。

表1 辐射前后原料检测结果

2.3 稳定性考察

将经辐射灭菌的原料3份和未辐射灭菌的原料1份，按照温度25℃±2℃，相对湿度60%±10%的条件进行长期稳定性考察12个月；按照温度40℃±2℃，相对湿度75%±5%的条件进行加速稳定性考察6个月。结果见表2。选择对盐酸四环素原料中容易发生变化的降解物质盐酸4-差向脱水四环素限度、原料盐酸四环素（结构式见图1）的含量进行稳定性考察检测[2]。

表2 辐射灭菌前后原料加速6个月稳定性考察及灭菌前后原料长期12个月稳定性考察数据表

图1 盐酸四环素和盐酸4-差向脱水四环素的结构式

3 讨论

3.1 从3个批号的原料辐射灭菌前后的数据对比来看，4 kGy、6 kGy和9 kGy辐射灭菌后，所有理化指标，基本没有发生变化，从外观上来看，原料的颜色只是发生了微小的变化。

3.2 从3个批号的原料辐照前后的稳定性数据来看，不论是加速稳定性还是长期稳定性，辐射灭菌前后的原料的盐酸4-差向脱水四环素、含量的变化趋势一致。温度对四环素原料的稳定性有影响，室温下保存的原料，盐酸4-差向脱水四环素变化较小，但在40℃下做加速稳定性考察的原料，其盐酸4-差向脱水四环素在加速稳定性考察过程中有明显上升趋势，而且在加速6个月后基本都接近了2%的上限。

3.3 从无菌检查角度看，3批原料在辐射灭菌前均不是无菌产品，在得出2批原料在未辐射灭菌前的无菌检查结果为不合格的同时，还对此两批的原料进行了微生物限度的检查，检测结果为细菌数＜10 cfu/g，真菌数＜10 cfu/g。从这个结果可以看出，原料在微生物限度检查法中测出的相当于0的生物负荷，并不代表产品就是无菌的。在经过4 kGy、6 kGy和9 kGy进行辐射灭菌后，有2个批号的原料在经过4 kGy辐射灭菌后仍旧是非无菌状态。灭菌中为保证无菌，必须采取过度杀灭的原则，在比较了不同辐射灭菌剂量对原料理化性质影响结果不大的情况下，选择最大的灭菌剂量9 kGy，作为盐酸四环素的60Co-γ射线灭菌剂量。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：二部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录190-2.

[2] 美国药典委员会.美国药典：USP32-NF27[S].美国：3695.

[3] 孙建宇.60Co-γ射线辐照灭菌在中药及制剂中的应用[J].中国药师，2006，9（5）：464-5.

[4] 赵小俊，史建军，孙志明.虫草头孢菌粉辐照灭菌及对其主要成分的影响[J].中国农业科学，2003，36（9）：1081-5.

[5] 李奉勤，马振嗣，史冬霞，等.不同60Co-γ射线辐照对三黄片中大黄粉含量及消毒效果的影响[J].中国消毒学杂志，2006，23（24）.

Impact of60Co-γ-ray Sterilization of Tetracycline Hydrochloride Raw Materials

HUANG Bo,ZHAO Quan-ru,LIU Li-ping
Baijingyu Nanjing Pharmaceutical Co.,Ltd.,Nanjing 210038

Different doses of60Co-γ rays were compared for radiation sterilization on raw materials of tetracycline hydrochloride.Bycheckingstabilitydata,theoptimalradiationdoseof60Co-γrayson tetracycline hydrochloride raw materials was 9 kGy,at which its physical and chemical detection indicators were in line with the requirements of USP,and the sterility test results met the requirements..

60Co-γ rays;Sterile;Sterilization;Tetracycline hydrochloride;Stability

R953

A

1673-7806（2014）06-519-02

黄波，男，工程师 E-mail:lichunhua48@hotmail.com

2014-06-05

2014-08-24