老年眼睑基底细胞癌患者癌组织中空泡膜蛋白1、磷酸酶及张力蛋白同源蛋白和抗转移蛋白23的表达及意义

云亚歌

(青海大学附属医院眼科，青海 西宁 810001)

眼睑基底细胞癌在老年人发病率高，多种蛋白的异常表达促进肿瘤的发生和进展。空泡膜蛋白(VMP)1是近年发现的一种蛋白质，编码406个氨基酸，含6个跨膜单环结构，在激发细胞自噬、参与细胞间黏附和紧密连接、调控细胞周期等方面发挥重要作用〔1〕。研究显示VMP1正常表达可能对抑制肿瘤的发生和进展有一定作用〔2〕。磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)是人类发现的第一个具有磷酸酯酶活性的抑癌基因，在正常组织中高表达，并能通过脱磷酸化作用调节细胞内信号传导的通路，从而有效调节细胞的生长、发育及抑制肿瘤细胞增殖、黏附和转移〔3,4〕。抗转移蛋白(NM)23为肿瘤转移抑制蛋白，其低表达或表达丢失后可以促进肿瘤进展和转移〔5〕。本实验检测老年眼睑基底细胞癌患者术后癌组织VMP1、PTEN和NM23蛋白的表达，关注其临床意义。

1 资料和方法

1.1临床资料 2012年3月至2013年6月我院眼科行眼睑基底细胞癌手术的老年患者97例作为观察组，均符合世界卫生组织(WHO)中的诊断标准，并经病理学主治医师确诊。其中男50例，女47例，年龄60～84岁，中位年龄67岁。肿瘤最大径0.5～7.3(平均4.5)cm。选择上述肿瘤周边切缘正常(经病理学证实)的鳞状上皮组织60例作为对照组，年龄60～83岁，其中男30例，女30例，中位年龄66岁。两组一般临床资料无明显差别，具有可比性。

1.2VMP1、PTEN和NM23的检测 VMP1、PTEN和NM23蛋白的试剂盒均购自武汉博士德生物技术公司，均为浓缩液，依不同配比浓度稀释后进行预实验，选择最理想的染色浓度进行正式实验。正式实验应用免疫组织化学染色二步法，采用DAB染色，均由病理科技师操作完成，严格按说明书进行，严格质量控制，努力减少误差。

1.3VMP1、PTEN和NM23阳性的判断标准 VMP1、PTEN和NM23显色部位是细胞质，以出现棕黄色颗粒为阳性细胞，选择5个高倍视野，计数阳性细胞的百分数，取平均值，阳性率≥25%为阳性，<25%为阴性。

1.4统计学分析 应用SPSS13.0软件进行χ2检验和线性相关分析。

2 结 果

2.1两组VMP1、PTEN和NM23阳性表达率比较 观察组VMP1、PTEN和NM23阳性表达率明显低于对照组(P<0.05)，见表1。

2.2观察组VMP1、PTEN和NM23表达与临床病理特征的关系 观察组VMP1、PTEN和NM23表达阳性率与肿瘤最大径、是否侵犯皮肤外结构、有无转移及Ki67表达密切相关。见表2。

表1 两组VMP1、PTEN和NM23阳性表达率比较〔n(%)〕

表2 观察组VMP1、PTEN和NM23阳性表达与临床病理特征的关系〔n(%)〕

2.3观察组VMP1、PTEN和NM23表达的相关性 观察组VMP1和PTEN(r=0.46，P=0.048 0)、VMP1和NM23(r=0.49，P=0.037 7)、PTEN和NM23(r=0.44，P=0.025 0)的表达均具有正相关性。

3 讨 论

眼睑好发基底细胞癌，尤其在老年人，病变发展中基底细胞异型增生，分化障碍，使肿瘤细胞不仅向表面生长，同时向下生长、浸润，破坏周围组织。在此过程中，可以出现转移。目前认为基底细胞癌发展过程中多种蛋白表达失调，可以有效地调节并促进肿瘤进展〔6,7〕。本实验结果提示肿瘤中VMP1、PTEN和NM23表达失调或丢失是引起肿瘤恶变和进展的重要蛋白。VMP1作为一类跨膜蛋白，在肿瘤进展中可以对细胞增殖起明显的抑制作用〔8,9〕。有观点认为VMP1低表达时可以抑制由肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的细胞凋亡作用，加速细胞增殖〔10,11〕。PTEN在正常鳞状上皮和正常基底细胞中均表达，但是在多种癌组织中表达下降。当PTEN在正常组织中强表达时，不仅可以抑制细胞增生，还可以抑制细胞凋亡〔12〕。NM23在作用过程中可以通过其产物核苷二磷酸激酶影响细胞内信号传导系统，同时影响微管、微丝等细胞骨架系统的运动，NM23也参与细胞周期的有效调控，有效抑制肿瘤细胞的生长和播散〔13〕。本实验结果提示VMP1、PTEN和NM23三者可能具有协同作用。研究认为VMP1可能通过转化生长因子(TGF)、Wnt和糖原合酶激酶(GSK)信号转导系统发挥作用参与肿瘤的生物学进展〔14,15〕，而PTEN和NM23也可以通过上述调节过程实现的，因此三者的协同作用可能与其他相关蛋白作为中介作用有关，但是具体机制尚有待更多实验来证实。

本实验结果提示VMP1、PTEN和NM23 三种蛋白异常表达参与肿瘤的生长、肿瘤的侵犯、转移及增殖过程。肿瘤生长的速度快，尤其是恶性程度越高的肿瘤，在此过程，VMP1、PTEN和NM23的抑癌作用完全消失，而促癌基因表达明显升高，使肿瘤的失控性增生明显增强，肿瘤体积增大。同时肿瘤以其独特的蟹足样生长向周围组织中生长，使肿瘤对周围组织的破坏能力增强。VMP1、PTEN和NM23蛋白对肿瘤的正常抑制作用可能是通过抑制癌细胞的增殖实现的，Ki67增殖的通路也可能是VMP1、PTEN和NM233种蛋白协同作用的关键中介因子。也有观点认为NM23和PTEN异常表达时通过癌相关的细胞因子、生长因子和连接蛋白，进而对生长因子的生物利用度进行持续而高效调控，诱导细胞生长，同时肿瘤细胞的增殖活性提高，肿瘤细胞更具有侵袭性，肿瘤癌化加速，恶性程度和恶性潜能均增强〔16〕。王秀丽等〔17〕认为PTEN基因可以抑制肿瘤细胞浸润转移，加速细胞凋亡，阻止细胞增殖；而当PTEN表达减弱或缺乏时，可以使上皮细胞发生恶性转化，有效促进肿瘤的进展。

4 参考文献

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