表皮生长因子测定在判断帕金森病认知障碍中的价值

李普蕾 恽文伟 梅雨晴 岑 岭 冯益萍 杨静婷（通讯作者）南京医科大学附属常州市第二人民医院神经内科 常州 213003

表皮生长因子测定在判断帕金森病认知障碍中的价值

李普蕾 恽文伟 梅雨晴 岑 岭 冯益萍 杨静婷（通讯作者）
南京医科大学附属常州市第二人民医院神经内科 常州 213003

目的 探讨帕金森病患者血浆EGF水平及事件相关电位P300电位测定波幅和潜伏期改变与PD认知障碍间的关系，为临床医生诊断病情，判断预后提供更准确有效的参考依据。方法 选择我院2010—2012年门诊及住院的原发性PD患者50例和健康体检者50例为研究对象，应用蒙特利尔认知评价量表（MoCA）进行认知功能评估，分为PD组认知损害28例，PD组认知正常22例及对照组认知正常24例，认知损害26例，应用蒙特利尔认知评价量表（MoCA）对4组患者进行评分，采用双抗体夹心ABC-ELISA法测量血浆EGF浓度，采用短音刺激测定P300电位的潜伏期及波幅，分析并比较三者间的相互关系。结果 在MoCA各项评分方面，除定向不存在差异（P＞0.05），PD组定向障碍与PD组正常间其余各项均存在差异（P＜0.05）；对照组定向障碍与正常组正常之间存在差异（P＜0.05）；在EGF浓度方面，PD组定向障碍与PD组正常间存在显著差异（P＜0.01），对照组定向障碍与正常组正常间存在显著差异（P＜0.01）；在P300电位方面，PD组定向障碍与PD组正常间存在显著差异（P＜0.01），对照组定向障碍与正常组正常间存在显著差异（P＜0.01）；患者MoCA总分、血浆EGF浓度及P300电位潜伏期及波幅两两行Pearson相关分析，均存在相关性（P＜0.05）。结论 PD患者血清表皮生长因子（EGF）浓度与PD认知功能障碍存在密切关系，低浓度的EGF对判断帕金森病认知障碍及预后有预测价值。

帕金森病；蒙特利尔认知评价量表；血浆EGF；事件相关电位；P300电位

帕金森病（PD）是以静止性震颤、强直、动作缓慢和姿势协调性障碍等运动症状为主要临床表现的神经系统慢性变性疾病，在确诊初期即有20％会出现轻度认知障碍（MCI），20％～80％会在以后发生痴呆（PDD）［1］。MoCA评定认知障碍受到多因素影响，有时并不能真实反映患者的认知功能障碍［2-3］。因此，加强对PD相关的认知障碍的早期判断和适当干预，对PD患者的治疗和改善远期生活质量有重要意义。研究显示［4］，在模拟PD的小鼠中也发现EGF浓度低于正常水平的现象，给予小鼠EGF将阻止多巴胺能神经元变性，因此说明EGF浓度水平与帕金森病认知障碍间存在密切关系。本次课题旨在探讨帕金森病患者血浆EGF水平及事件相关电位P300电位测定的波幅和潜伏期改变与PD认知障碍间的关系，结果如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料 选择我院2010—2012年门诊及住院的原发性PD患者50例，所有患者诊断均符合英国脑库PD诊断标准和2006年制定的PD诊断标准，经头颅CT或MRI检查，排除脑血管病、脑炎、外伤、药物所致的帕金森综合征、帕金森叠加综合征、恶性肿瘤，排除视力、听力、肢体严重功能障碍，不能用语言交流及精神疾病患者，另选取健康体检者50例为研究对象，应用蒙特利尔认知评价量表（MoCA）进行认知功能评估，分为PD组认知损害28例，PD组认知正常22例及对照组认知正常24例，认知损害26例，4组间性别构成和年龄比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 实验方案

1.2.1 仪器及设备：采用BIO-RAD 680酶标仪，上海医疗器械有限公司的80-2台式低速离心机（最高转速4 000r/min）、上海一恒科学仪器有限公司的隔水式恒温培养箱及keypoint.net肌电-诱发电位仪进行测试。

1.2.2 试剂：采用北京四正柏生物科技有限公司生产的人EGF定量EIA试剂盒。

1.3 操作步骤

1.3.1 MoCA评分：应用蒙特利尔认知评价量表（MoCA）对4组患者进行评分：包括视空间执行能力、命名、记忆、注意、语言流畅、抽象思维、延迟记忆、定向力等八个方面，共计30分；受试者受教育年限≤12a者，在MoCA测试结果上加1分以矫正文化程度的偏倚；MoCA评分在26分以下属于认知障碍。

1.3.2 EGF浓度测量：采用双抗体夹心ABC-ELISA法测量血浆EGF浓度：抽取清晨空腹静脉血3mL，离心15min，取血清-20℃储存待测。

1.3.3 采用短音刺激测定P300电位的潜伏期及波幅：检查方法：应用丹麦产keypoint.net肌电-诱发电位仪，采用听觉Oddball程序测定P300。靶刺激发声频率2kHz，随机出现，占20％；非靶刺激发声频率1kHz，占80％；刺激强度80dB，灵敏度为10uv/cm，带通范围1～30Hz，靶刺激叠加30次。受试者清醒，取舒适坐位，嘱其微闭双眼，集中注意力。要求受检者在测试中出现靶刺激时，迅速按键。每位受检者均重复测两轮，取其平均值。记录P300的潜伏期（PL）和波幅（Amp），记录电极置于Cz点，参考电极置于一侧耳垂，前额接地，电极与皮肤间阻抗＜5Ω。判断标准：PL、Amp取正常对照组的均值±2.5倍标准差（±2.5s）为正常范围。

1.4 统计方法 所有统计数据均采用SPSS17.0统计软件进行分析，计量资料采用（±s）表示，采用t检验，计数资料以率（％）表示，采用χ2检验，血浆EGF水平、P300测定电位的潜伏期及波幅变化与MoCA评分相互关系采用Pearson相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 4组患者MoCA评分比较 在MoCA各项评分方面，除定向不存在差异（P＞0.05），PD组定向障碍与PD组正常间其余各项均存在差异（P均＜0.05）；对照组定向障碍与正常组正常之间存在差异（P均＜0.05），PD组定向障碍与对照组定向障碍无差异（P＞0.05），PD组正常与对照组正常无差异（P＞0.05）。见表1。

表1 4组患者MoCA各分检测状况分析（±s，分）

表1 4组患者MoCA各分检测状况分析（±s，分）

总分PD组定向障碍28 2.43±1.63 2.62±0.68 4.93±1.12 2.46±0.86 1组别 n 视空间和执行 命名 注意力 语言 抽象 延迟回忆 定向 MoCA .09±0.84 1.67±1.48 5.72±0.97 20.92±4.02 PD组正常 22 4.56±0.81 2.94±0.28 5.68±0.66 2.97±0.29 1.86±0.43 3.75±1.01 5.98±0.13 27.74±1.35对照组定向障碍26 2.20±1.57 2.51±0.70 3.98±1.45 1.76±1.05 0.97±0.78 2.01±1.48 5.18±1.51 18.61±4.57对照组正常 24 4.53±0.83 2.98±0.25 5.86±0.49 2.94±0.32 1.79±0.45 4.21±0.95 5.86±0.15 28.17±1.39

2.2 4组患者血浆EGF浓度测定及P300电位的潜伏期及波幅状况 在EGF浓度方面，PD组定向障碍与PD组正常间存在显著差异（t＝14.47、P＝0.00＜0.01），对照组定向障碍与正常组正常间存在显著差异（t＝12.22，P＝0.00＜0.01），PD组定向障碍与对照组定向障碍存在显著差异（t＝2.938，P＝0.004＜0.01），PD组正常与对照组正常无差异（P＞0.05）；在P300电位方面，PD组定向障碍与PD组正常间存在显著差异（t＝5.204，6.404，P＝0.00＜0.01），对照组定向障碍与正常组正常间存在显著差异（t＝3.302，10.19，P ＝0.00＜0.01），PD组定向障碍与对照组定向障碍存在显著差异（t＝3.638，2.55，P＜0.05），PD组正常与对照组正常间波幅上存在显著差异（t＝5.270，P＜0.01），潜伏期无差异（P ＞0.05）。见表2。

表2 4组患者血浆EGF浓度测定及P300电位的潜伏期及波幅状况（±s）

表2 4组患者血浆EGF浓度测定及P300电位的潜伏期及波幅状况（±s）

组别 n 血浆EGF（μg/L）电位潜伏期（ms）波幅（uV）P300 PD组定向障碍28 0.52±0.07 389.47±32.53 6.12±1.27 PD组正常 22 0.89±0.11 342.73±30.18 8.94±1.84对照组定向障碍26 0.58±0.08 357.69±31.57 7.03±1.35对照组正常24 0.93±0.12 328.94±29.84 11.96±2.03

2.3 PD患者MoCA总分、血浆EGF浓度及P300电位潜伏期及波幅相关关系分析 对MoCA总分、血浆EGF浓度及P300电位潜伏期及波幅间行Pearson相关分析，MoCA总分与血浆EGF浓度存在正相关（r＝0.486，P＝0.026＜0.05），MoCA总分与P300电位潜伏期存在负相关（r＝-0.621，P ＝0.007＜0.01），MoCA总分与P300电位波幅存在正相关（r＝0.533，P＝0.010＜0.05），血浆EGF浓度与P300电位潜伏期存在负相关（r＝-0.512，P＝0.012＜0.05），血浆EGF浓度与P300电位波幅存在正相关（r＝-0.607，P＝0.008＜0.01）。见表3。

表3 PD患者MoCA总分、血浆EGF浓度及P300电位潜伏期及波幅相关关系分析

3 讨论

帕金森病（PD）是以静止性震颤、强直、动作缓慢和姿势协调性障碍等运动症状为主要临床表现的神经系统慢性变性疾病［5］。随着对PD认识的加深，PD患者的非运动症状，包括精神症状、自主神经功能异常，特别是认知障碍日渐受到重视。PD患者在确诊初期即有20％会出现轻度认知障碍（MCI），20％～80％会在以后发生痴呆（PDD）。PD相关的认知障碍和痴呆增加了患者的致残率和病死率，也给家人和社会带来沉重负担。因此，加强对PD相关认知障碍的早期判断和适当干预，对PD患者的治疗和改善远期生活质量有重要意义。PD患者认知功能障碍主要表现在视空间功能、执行功能、记忆力、注意力等方面［6］。研究表明，氧化应激、线粒体功能障碍、泛素蛋白酶体系统功能障碍、炎性反应、兴奋性氨基酸毒性和凋亡均参与PD的发病过程。PD主要病理特征是黑质多巴胺等神经元的变性坏死和残存神经元内路易小体形成。文献报道［7］，PD患者存在额叶功能受损，认为PD患者出现认知障碍和痴呆可能与额叶纹状体环路破坏有关。多巴胺能、非多巴胺能系统（包括乙酰胆碱、去甲肾上腺素、5-羟色胺等）均与PD认知障碍有关。

目前，对PD患者认知功能评定主要依赖于神经心理学测试，如简易智能状态检查量表（MMSE）及蒙特利尔认知评估量表（MoCA）等，最近多项研究表明MoCA作为一种新的认知筛查工具较MMSE更适合用于PD患者早期认知障碍的筛查［8］。但由于量表的评价受多方面因素（如文化程度、年龄、抑郁情绪、药物不良反应等）的影响，所以有时并不能真实反映患者的认知功能障碍。表皮生长因子（EGF）为一种低分子量的多肽类生长因子，是一种强有力的细胞分裂促进因子，存在于人体组织和细胞外液，与胚胎发生与生长、组织修复和再生以及肿瘤发生等均有密切关系［9］。EGF可促进神经系统的生长发育，促进神经干细胞的增殖，并参与神经元的氧化性损伤。EFG对中脑多巴胺神经元产生神经营养活性，测量PD患者死后脑中EGF含量［10］，发现患者额前皮质和新纹状体中EGF和酪氨酸羟化酶减少，且EGF受体的表达在前脑区也明显下调。在模拟PD的小鼠中也发现这种现象，给予小鼠EGF将阻止多巴胺能神经元变性，从而揭示了EGF神经营养活性是由中脑多巴胺神经元传入信号维持的，而在PD患者中EGF的营养活性受损。

综上所述，PD患者血清表皮生长因子（EGF）浓度与PD认知功能障碍存在密切关系，低浓度的EGF对判断帕金森病认知障碍及预后有预测价值。

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（收稿2015-02-12）

R742.5

A

1673-5110（2015）21-0041-03

获2012年常州市科技局立项（编号CY 20120011）及2012年南京医科大学科技发展基金重点项目立项（编号2012NJMU130）