结核分枝杆菌感染者TB-IGRA试验检测IFN-γ的临床意义

肖作汉，孟 冈，孙文锦，王立志

(湖北省鄂州市中心医院感染科 436099)



·临床研究·

结核分枝杆菌感染者TB-IGRA试验检测IFN-γ的临床意义

肖作汉，孟 冈，孙文锦，王立志△

(湖北省鄂州市中心医院感染科 436099)

目的 探讨结核分枝杆菌γ-干扰素(IFN-γ)在不同类型结核分枝杆菌感染者中的表达水平及临床意义，为结核分枝杆菌IFN-γ体外释放(TB-IGRA)定量试验的临床诊断提供依据。方法 选择该院112例结核分枝杆菌感染住院患者为疾病组，其中痰涂菌阳肺结核(活动性)患者55例；痰涂菌阴肺结核患者28例；痰涂菌阴肺外结核患者29例。选择同期健康体检者22例为健康对照组。采用TB-IGRA定量试验测定两组患者血浆中特异性IFN-γ水平，同时与血抗结核抗体、痰涂片抗酸染色及痰菌培养、结核菌素试验(TST)等方法进行比较。结果 疾病组血浆IFN-γ水平均明显高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；痰涂菌阳肺结核患者血浆IFN-γ水平均明显高于其他患者，差异有统计学意义(P<0.05)。TB-IGRA定量试验对结核分枝杆菌感染者的敏感性达87.5%，准确率89.7%，经比较均高于其他诊断方法(P<0.05)。而特异性除TST方法除外，其他方法比较差别无统计学意义(P>0.05)。结核患者血浆IFN-γ浓度不受TST红肿硬结直径的影响。结论 结核分枝杆菌感染者血浆IFN-γ水平普遍升高，特别是痰涂菌阳性肺结核患者升高明显，TB-IGRA定量试验对结核分枝杆菌感染诊断具有较高的临床意义。

γ干扰素； 结核分枝杆菌； 痰涂片； 肺结核

目前临床结核病病原学诊断主要依赖细菌学涂片和培养检查。但涂片敏感性低，特异性差；培养时间长，阳生率也只有30%或更低。多年来国内外学者一直在探索快速、敏感、特异、简便的实验室诊断方法。其中结核分枝杆菌γ-干扰素(IFN-γ)体外释放(TB-IGRA)定量试验作为一种早期的诊断方法迅速发展，在国外已得到广泛应用[1-3]。本研究通过TB-IGRA定量试验法测定112例结核分枝杆菌感染者血浆中特异性IFN-γ的水平，探讨TB-IGRA定量试验用于结核病的临床诊断、疗效观察的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择本院2011年6月至2013年6月112例结核分枝杆菌感染住院患者为疾病组，其中男92例，女20例，平均年龄(50.4±14.12)岁。痰涂菌阳肺结核(活动性)患者55例，其中男49例，女6例，平均年龄(54.45±10.73)岁。痰涂菌阴肺结核患者28例，男19例，女9例，年龄(35.10±2.80)岁。痰涂菌阴肺外结核患者29例，男24例，女5例，平均年龄(37.17±12.68)岁。所有患者均经临床表现，细菌学，影像学及抗结核药物疗效明确诊断。选择同期健康体检者22例为健康对照组，其中男15例，女7例，平均年龄(50.4±11.20)岁。两组间一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，组间具有可比性。

1.2 仪器和试剂 TB-IGRA定量检测试剂盒(北京万泰公司)，结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)成都生物制品研究所，AF2/FAME16/20全自动酶标仪(瑞士Hamilton公司)；Heal Forle二级生物安全柜(苏州安泰空气技术有限公司)。

1.3 检测方法 (1)TB-IGRA检测。按照说明书操作，采集患者肝素抗凝静脉血3～5 mL，常温送检。尽快分装到本底对照管绿色(N)；测试培养管无色(T)，阳性对照培养管红色(P)3个培养管中，于37 ℃恒温箱培养22 h后，全血4 000 r/min离心10 min，吸取血浆进行聚合酶链反应(ELISA)检测IFN-γ水平。检测范围10～240 pg/mL；检测管-本底对照大于或等于14 pg/mL为阳性。(2)结核菌素试验(TST)。所有研究对象在采血后于前臂皮内注射PPD 5个单位，由本院结核病科有经验人员操作。72 h检测反应，结果用直尺量取硬结平均直径并记录。以红肿硬块直径是否大于5 mm作为判断是否感染结核分枝杆菌的标准。(3)血清标本结核抗体检测，痰涂片及痰结核分枝杆菌培养均按常规结核分枝杆菌实验室检测方法进行。

1.4 观察指标 观察两组IFN-γ水平及各自的阳性率，比较TB-IGRA检测与结核菌素试验、痰涂片抗酸染色、结核抗体等其他检测方法的符合率。

2 结 果

2.1 两组IFN-γ检测结果比较 疾病组血浆IFN-γ水平明显高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。菌阳肺结核患者血浆IFN-γ水平均明显高于其他组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组IFN-γ检测结果比较

注：同健康对照组比较，aP<0.05，同菌阳肺结核组比较，bP<0.05。

2.2 TB-IGRA实验同其他方法的比较 TB-IGRA对结核分枝杆菌感染者的敏感性达87.5%，准确率89.7%，经比较均高于其他诊断方法(P<0.05)。而特异性除TST(PPD)方法外，其他方法比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3 结核分枝杆菌感染者PPD试验与血浆IFN-γ浓度的关系 疾病组痰涂菌阳肺结核患者IFN-γ浓度为(199.00±113.00)pg/mL；痰涂菌阴结核病患者IFN-γ浓度为(202.00±189.00)pg/mL。结果显示血浆IFN-γ浓度同TST(PPD)皮肤试验的直径大小之间并无线性关系(P>0.05)。

表2 TB-IGRA同其他方法检测结果比较(%)

注：与其他方法比较，aP<0.05；与TST(PPD)方法比较，bP>0.05。

3 讨 论

感染结核分枝杆菌后人体内产生针对结核分枝杆菌的特异性效应T细胞，利用结核特异性抗原再刺激效应T细胞，可使其分泌特异性IFN-γ，通过ELISA技术定量检测IFN-γ，间接反映人体内结核分枝杆菌感染情况[4-5]。本研究结果表明，疾病组血浆特异性IFN-γ水平均明显高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；痰涂菌阳肺结核组血浆IFN-γ水平明显高于其他组，差异有统计学意义(P<0.05)。说明感染了结核分枝杆菌的患者血浆IFN-γ表达水平普遍上调，发展为活动性肺结核后血浆IFN-γ水平明显升高，这与伍仕敏等[6]和刘佳文等[7]所报道的观点一致。此外，TB-IGRA试验对结核病诊断的灵敏性达87.5%，特异性达91.1%，阳性预测值为93.1%，阴性预测值79.3%，准确性为89.7%，明显高于其他几种方法(P<0.05)。而且以外周血为检测标本采样方便，可有效诊断结核分枝杆菌感染和抗结核治疗效果。另外，本研究进一步分析了TST(PPD)试验与血浆IFN-γ浓度的关系，结果表明血浆特异性IFN-γ浓度不受皮肤硬结直径的影响，这与刘旭晖和肖和平[8]观点不一致，具体原因还有待进一步探讨。

总之，快速诊断结核分枝杆菌感染对于预防和控制结核病非常重要。TB-IGRA显示出了很多优点，对于快速判断结核分枝杆菌感染有可靠的参考价值，随着方法的改进以及新抗原的应用，以后会成为新一代的诊断方法。

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[6]伍仕敏，项杰，周虹，等．γ-干扰素释放试验在肺结核和肺外结核诊断中的应用[J]．武汉大学学报:医学版，2013，34(3)：403-406．

[7]刘佳文，康丽军，翁绳凤，等．干扰素体外释放酶联免疫法在结核病诊断中的价值[J]．中国防痨杂志，2011，33(9)：600-603．

[8]刘旭晖，肖和平．γ-干扰素释放试验(IGRA)对于诊断结核分枝杆菌感染的应用[J]．临床肺科杂志，2009，14(5)：672-674．

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.04.050

A

1672-9455(2015)04-0549-02

2014-07-14

2014-09-28)

△通讯作者,E-mail:41246751@qq.com。