熊去氧胆酸治疗HBeAg阳性高病毒载量乙肝肝硬化患者疗效分析及其对外周血Th17、Treg水平影响

沈扬，俞逊婕，方年，杨朝晖

(浙江省台州市第一人民医院 感染科，浙江 台州 318020)

肝硬化为临床常见慢性进行性肝病，而长期高病毒载量(HBV-DNA≥107拷贝/mL)的存在是导致肝硬化的重要原因[1-2]，早期由于肝脏代偿功能较强患者无明显症状，后期主要表现为肝功损伤以及门脉高压，受累多系统，晚期常出现肝性脑病、上消化道出血、腹水、继发感染、癌变等并发症[3-4]。肝硬化是由于组织结构紊乱导致的肝功能障碍，目前尚无有效根治方法，主要在于早期发现，及时阻止病程进展[5-6]。近年研究发现熊去氧胆酸尚具有保护肝细胞膜和改善免疫的作用，本研究探讨熊去氧胆酸对HBeAg阳性高病毒载量乙肝肝硬化患者抗病毒疗效及安全性，对患者外周血Th17、Treg水平影响现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2012年11月至2014年2月浙江省台州市第一人民医院感染科诊治的80例HBeAg阳性高病毒载量乙型肝硬化患者，男48例，女32例;年龄33～58岁，平均年龄(51.6±5.7)岁，依据Child-Pugh评分标准，25例 A级，27例 B级，28例C级。按2010年发布的《慢性乙型肝炎防治指南》中有关乙肝肝硬化的诊断标准，所有患者HBeAg阳性，且HBV-DNA≥107拷贝/mL。将患者随机分为对照组和观察组，每组各40例。其中观察组男25例，女15例，年龄33～57岁，平均年龄(50.9±6.0)岁，12例A级，13例B级，14例C级;对照组男23例，女17例，年龄33～58岁，平均年龄(52.3±5.4)岁，13例A级，14例B级，14例C级。对照组与观察组患者在性别、年龄、病程等方面比较差异无统计学意义，具有可比性。

1.2 排除标准 肝恶性肿瘤，肾功能不全，自身免疫性肝炎和严重心脑血管疾病，代谢性肝病，药物性肝炎，精神病患者等。

1.3 治疗方法 对照组患者根据病情给予常规对症治疗，观察组则在对照组的基础上加服熊去氧胆酸片[格林菲尔德(江苏)药业有限公司，国药准字H32024014]50 mg/d，疗程12个月。治疗前患者均签署知情同意书，随访时间12个月。

1.4 指标检测 治疗过程中患者血常规、肝功、HBV等监测，采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA的含量(杭州艾康生物技术有限公司)，采用ELISA法检测血清乙型肝炎病毒标记物(上海实业科华生物技术有限公司);采用Olympus AU2700型全自动生化分析仪测定肝功能相关指标。患者于治疗前后清晨空腹抽取外周血3 mL，细胞分离培养后流式细胞仪检测(美国Becton-Dickson公司)，记录Th17、Treg细胞占外周血CD4+淋巴细胞比例[7]。

1.5 随访 患者治疗过程中定期监测肝肾功能/HBV-DNA定量，随访时间12个月，观察并记录并发症发生情况。

1.6 统计学方法 采用SPSS 18.0统计软件进行分析，计数资料用率表示，采用χ2检验;计量资料用“”表示，采用 t检验;以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 患者治疗前后肝功指标情况比较 与治疗前比较，治疗后观察组ALT、AST、ALB、TBil水平均显著性降低(P＜0.01)，差异具有统计学意义，对照组ALT、AST、ALB、TBil水平均显著性降低(P＜0.01)，差异具有统计学意义;治疗后观察组ALT、AST、ALB、TBil水平均显著性低于对照组(P＜0.01)，见表1。

表1 患者治疗前后ALT、AST、ALB、TBil水平比较()Tab.1 Comparison of levels of ALT，AST，ALB，TBil of patients before and after treatment()

表1 患者治疗前后ALT、AST、ALB、TBil水平比较()Tab.1 Comparison of levels of ALT，AST，ALB，TBil of patients before and after treatment()

＊＊P ＜0.01，与治疗前比较，compared with before treatment;ΔΔP ＜0.01，与对照组比较，compared with control group

组别 例数 时间 ALT(U/L) AST(U/L) ALB(g/L) TBil(μmol/L)对照组 40 治疗前 106.5±17.8 151.5±33.1 123.7±16.4 68.2±14.9治疗后 72.4±18.3＊＊ 92.1±22.7＊＊ 78.9±15.4＊＊ 49.4±16.1＊＊观察组 40 治疗前 105.2±22.9 152.8±19.8 124.2±17.1 66.9±13.2治疗后 36.9 ±11.6＊＊ΔΔ 47.6 ±12.1＊＊ΔΔ 43.2 ±6.7＊＊ΔΔ 28.7 ±7.5＊＊ΔΔ

2.2 患者治疗后HBV-DNA转阴率、HBV-DNA下降幅度比较 治疗后，2组患者HBV-DNA转阴率、HBV-DNA下降幅度比较，观察组的 HBV-DNA转阴率(85.0%)显著高于对照组(7.5%)，差异具有统计学意义(χ2=48.322，P ＜0.01);观察组的HBV-DNA下降幅度显著高于对照组，差异具有统计学意义(t=11.490，P ＜0.01)，见表2。

表2 患者治疗后HBV-DNA转阴率、HBV-DNA下降幅度比较Tab 2 Comparison of the negative rate and descend range of HBr-DNA of patients after treatment

2.3 患者治疗后ATL复常率、HBeAg转阴率比较 治疗后，2组患者ATL复常率、HBeAg转阴率比较，观察组的ATL复常率(52.5%)显著高于对照组(15.0%)，差异具有统计学意义(χ2=12.579，P ＜0.01);观察组的 HBeAg转阴率(57.5%)显著高于对照组(17.5%)，比较差异具有统计学意义(χ2=13.653，P ＜0.01)，见表3。

表3 患者治疗后ALT复常率、HBeAg转阴率比较(%)Tab 3 Comparison of the recovery rate of ALT，HBeAg negative rate of patients after treatment(%)

2.4 患者治疗后并发症情况比较 80例患者经治疗后随访12个月并发症发生情况比较，其中观察组患者均未出现死亡、原发性肝细胞癌、自发性腹膜炎，出现消化道出血2例(5.0%)，对照组死亡1例(2.5%)，原发性肝细胞癌 2例(5.0%)，自发性腹膜炎3例(7.5%)，消化道出血3例(7.5%)，2 组比较差异均无统计学意义(χ2=1.01，χ2=2.05，χ2=3.12，χ2=0.21，P ＞0.05)。

表4 患者治疗后并发症情况比较[n(%)]Tab 4 Comparison of complications of patients after treatment[n(%)]

2.5 患者治疗后Th17、Treg细胞比例变化 乙肝患者经过治疗后，2组患者Th17水平升高，Treg水平降低，观察组Th17水平显著高于对照组，Treg水平显著低于对照组，Th17/Treg比值高于对照组(P＜0.01)。

表5 患者治疗后Th17、Treg细胞比例变化()Tab 5 Change in the ratio of Th17，Treg cells of patients after treatment()

表5 患者治疗后Th17、Treg细胞比例变化()Tab 5 Change in the ratio of Th17，Treg cells of patients after treatment()

＊＊P ＜0.01，与治疗前比较，compared with before treatment;ΔΔP ＜0.01，与对照组比较，compared with control group

组别 例数 时间 Th17细胞(%) Treg(%) Th17/Treg 比值对照组 40 治疗前 2.06±1.08 9.15±1.21 0.23±0.08治疗后2.11±0.83 8.86±1.07 0.24±0.09观察组 40 治疗前 2.05±1.05 9.18±1.08 0.22±0.10治疗后 2.84±0.86＊＊ΔΔ 7.46±1.01＊＊ΔΔ 0.36±0.07＊＊ΔΔ

3 讨论

乙肝肝硬化患者主要发病机制为乙肝病毒复制造成肝组织长期炎症，有效控制乙肝病毒复制可改善肝功能，保护肝组织，因此，在乙肝肝硬化患者治疗中抑制乙肝病毒复制具有关键作用[7-8]。慢性乙肝患者肝组织与血清HBV-DNA水平相关，由于不是直线相关，慢性乙肝患者血清HBV-DNA载量水平不能推测肝组织HBV-DNA水平，肝硬化患者均应进行抗病毒治疗[9-10]，目前对于亲水性胆酸药物治疗不同病毒载量肝硬化患者疗效有待于深入研究。本文探讨亲水性胆酸对HBeAg阳性高病毒载量乙肝肝硬化患者抗病毒疗效及安全性，对患者外周血Th17、Treg水平影响。

熊去氧胆酸是一种亲水性胆汁酸，可改变胆汁酸池中亲水胆汁酸和疏水胆汁酸的比率，促进内源性胆汁酸如鹅去氧胆酸(CDCA)、石胆酸(LCA)的排泌，改善胆汁淤积。目前主要用于原发性硬化性胆管炎、原发性胆汁性肝硬化等胆汁淤积性肝病的治疗，疗效较为肯定。有研究显示[11-12]，熊去氧胆酸具有保护肝细胞膜和改善免疫的作用，其作用机制可能与熊去氧胆酸调控肝细胞的细胞周期、凋亡和蛋白质生物合成有关。本研究结果表明，80例患者治疗前后肝功指标比较，治疗后2组ALT、AST、ALB、TBil水平均显著性降低，差异具有统计学意义;治疗后观察组ALT、AST、ALB、TBil水平均显著性低于对照组，差异具有统计学意义，表明对于HBeAg阳性高病毒载量乙肝肝硬化患者抗病毒治疗后肝功改善有显著疗效。经治疗后，2组患者HBV-DNA转阴率、HBV-DNA下降幅度比较，观察组HBV-DNA转阴率(85.0%)显著高于对照组(7.5%)，HBV-DNA下降幅度显著高于对照组，差异具有统计学意义，观察组ALT复常率(52.5%)、HBeAg转阴率(57.5%)显著高于对照组(15.0%、17.5%)，表明对于HBeAg阳性高病毒载量乙肝肝硬化患者抗病毒治疗后病毒性转阴方面有显著疗效。

HBeAg阳性高病毒载量乙肝肝硬化患者抗病毒治疗，治疗后并发症情况比较，观察组死亡、原发性肝细胞癌、自发性腹膜炎，消化道出血等发生率均低于对照组，均无统计学意义，本研究观察期较短，可能未充分暴露药物不良反应等问题，有待于进一步扩大样本，增加观察时间。对于失代偿期肝硬化患者容易发生各种并发症，预后情况较差，抗病毒治疗可延缓患者病情进展，不能够逆转肝病理变化[13-15]治疗后2组患者Th17水平升高，Treg水平降低，观察组Th17水平显著高于对照组，Treg水平显著低于对照组，Th17/Treg比值高于对照组;提示，乙肝核心抗原升高Th17细胞数，Treg细胞数降低，诱发类似抗病毒的免疫分化，熊去氧胆酸通过增加Th17细胞数，降低Treg细胞数，发挥抗病毒效应。Th17、Treg在免疫防御中具有重要作用，Th17/Treg比率升高可反映炎症反应加重，有研究表明，熊去氧胆酸可激活mTOR通路，上调HIF-1a表达，抑制Foxp3表达，影响Th17/Treg 水平[16]。

综上所述，熊去氧胆酸可显著改善HBeAg阳性高病毒载量乙肝肝硬化患者肝功能，提高HBeAg转阴率，抑制HBV病毒复制，延缓病情发展，且不良反应较少;熊去氧胆酸可增加患者Th17细胞数，降低Treg细胞数，可能是其抗病毒作用机制之一。

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