前列地尔注射液对急性脑梗死患者血清一氧化氮 丙二醛 超氧化物歧化酶与过氧化氢酶变化的影响

颜玮茹 廖春梅

广西桂林市人民医院综合内科 桂林 541002

脑梗死缺血和再灌注后使神经细胞的炎症级联反应加重，但因神经元自身的因素和血流停滞或再灌注的时间位点不同，故在其进程中会有少数几个机制在某一阶段发挥主导作用。近年研究发现缺血性脑血管疾病的白质病变与脂质过氧化损伤密切相关［1］。本文从分子水平研究急性脑梗死患者使用凯时注射液后血清一氧化氮、丙二醛、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的变化，有助于发现脑梗死后脑神经组织的保护方法。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2005－01—2014－06我院120例急性脑梗死患者为研究对象，随机分为实验组60例，男30例，女30例，平均年龄（60.32±8.87）岁；对照组60例，男29例，女31例，平均年龄（60.01±9.00）岁；选取同期健康体检者60 例为健康组，男32例，女28例，平均年龄（59.91±9.52）岁；用于检测血清一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）水平。各组年龄和性别差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 入选标准 所有病例均按照第4届脑血管病会议修订的诊断标准，并达到以下标准：（1）首次发生脑梗死的患者；（2）脑梗死发生时间≤24h；（3）经头部CT 或MRI证实；（4）签署知情同意书。

1.3 排除标准 （1）脑梗死溶栓的患者；（2）短暂性脑缺血发作患者；（3）合并严重心、肝、肾及血液系统疾病的患者；（4）严重难治性高血压，收缩压＞200 mmHg（1 mmHg＝0.133kPa），舒张压＞110mmHg；（5）CT 示脑出血或血小板＜60×109／L；（6）在发病时或近期经临床或实验室证明患者伴有炎症性或感染性疾病，并正应用抗炎药物治疗。

1.4 治疗方案 实验组用前列地尔注射液（商品名：凯时，由北京泰德制药有限公司出产，2mL：10μg／支，批准文号：国药准字H10980024 号）20μg／d加 入 生 理 盐 水250 mL 静 滴，1次／d，连续应用10d。对照组用丹参注射液（10mL／支，由正大青春宝药业有限公司出产，批准文号：国药准字Z3302001号）20mL／d加入生理盐水250mL静滴，1次／d，连续应用10 d。2组患者均予以常规治疗，如阿司匹林100mg／d抗血小板聚集，营养神经、脑保护，控制血压及康复治疗等。

1.5 观察指标

1.5.1 实验室检查：2组于用药前（发病后12～24h）及治疗后的第3、7天分别检测血清NO、MDA、SOD、CAT 水平。所有研究对象均在晨醒5min内抽肘静脉血5mL，在4℃条件下，3 000r／min 离心15 min，收集上层血清3 mL，放置于－40 ℃冰箱低温保存，标本收集完成后由专人一次性检测。血清NO 采用硝酸还原酶比色法；血清SOD 测定采用黄嘌呤氧化酶法；MDA 测定采用硫代巴比妥酸法；CAT 测定采用可见光分度法测定，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.5.2 脑梗死灶体积：2组于发病当日及发病后第10天分别行头颅CT 检查测算脑梗死灶体积（脑梗死体积测定：根据多田计算公式：π／6×短轴×长轴×层面厚度）。

1.6 统计学处理 采用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析，计量资料以均数±标准差表示，多个样本均数比较用单因素方差分析，组间两两比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组治疗前NO、MDA、SOD、CAT 指标比较 见表1。2组患者治疗前NO、MDA 水平均明显高于健康组，差异有统计学意义（P＜0.01）；2 组患者治疗前SOD、CAT 水平均明显低于健康组，差异有统计学意义（P＜0.01）；但2组患者NO、MDA、SOD、CAT 水平差异无统计学意义（P＞0.05）。

表1 3组治疗前NO、MDA、SOD、CAT 指标比较

表1 3组治疗前NO、MDA、SOD、CAT 指标比较

注：与健康组比较，▲P＜0.01；与对照组比较，★P＞0.05

组别 n （μm N ol O／L） （nm M ol D／A mL） （k SUO／D L） （k CUA／TL）健康组60 70.6±18.1 5.0±1.0 107.0±16.4 62.33±7.28对照组 60 191.3±12.7▲ 14.5±1.7▲ 47.8±14.6▲ 30.93±5.54▲实验组 60 189.6±13.5▲★ 14.1±1.2▲★ 47.2±12.5▲★ 30.02±4.98▲★

2.2 2组治疗前后NO、MDA、SOD、CAT 指标比较 见表2。对照组NO、MDA 治疗后3d、7d与治疗前均无明显变化，差异无统计学意义（P＞0.05）；实验组治疗后3d、7d均低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；实验组治疗后7 d均低于治疗后3d，差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组SOD、CAT 治疗后3d与治疗前无明显变化，差异无统计学意义（P＞0.05）；而治疗后7d均高于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；实验组SOD、CAT 治疗后3d和7d与治疗前和对照组比较均明显升高，差异有统计学的意义（P＜0.05）；实验组治疗后7d和治疗后3d对比呈升高趋势，差异有统计学的意义（P＜0.05）。

表2 2组治疗前后NO、MDA、SOD、CAT指标比较

表2 2组治疗前后NO、MDA、SOD、CAT指标比较

注：与对照组比较，▲P＜0.05；与治疗前比较，★P＜0.05；与治疗后3d比较，●P＜0.05

组别 时间 （μmNolO／L）（nmMolD／A mL ）（kSUO／DL） （kCUA／TL）治疗前191.3±12.7 14.5±1.7 47.8±14.6 30.93±5.54治疗后3d 189.2±11.3 13.3±2.1 51.42±10.24 33.67±5.26对照组 治疗后7d 186.6±10.8 14.1±2.9 76.13±9.96★45.36±4.35★治疗前 189.6±13.5 14.1±1.2 47.2±12.5 30.02±4.98实验组 治疗后3d 156.7±10.7▲★ 10.3±1.9▲ 87.2±8.3▲★51.36±5.83▲★治疗后7d 106.8±9.6▲★●6.7±1.5▲★●111.2±7.1▲★●60.37±6.61▲★●

2.3 2组治疗前后脑梗死体积变化比较 见表3。2组用药前后脑梗死体积比较无显著性差异（P＞0.05），但实验组脑梗死体积缩小程度较对照组明显（P＜0.05）。

表3 2组治疗前后脑梗死体积变化比较

表3 2组治疗前后脑梗死体积变化比较

注：与对照组比较，▲P＜0.05

组别 n 治（c疗m3前）治（c疗m3后）治疗（c前m3后）差对照组60 2.58±2.26 2.39±2.15 0.19±0.22实验组 60 3.19±3.56 2.83±2.16 0.42±0.15▲

2.4 不良反应 实验组1例出现注射部位疼痛、发红，经对症处理后好转，无1例发生严重不良反应。

3 讨论

急性脑梗死造成脑组织缺血和再灌注损伤后，产生大量自由基，引起脂质、核酸和蛋白质过氧化反应，细胞膜最终被破坏。脑缺血损伤的主要致病因素是氧自由基尤其是超氧阴离子，故控制氧自由基对延缓脑梗死病情发展及改善预后有重要意义。凯时可能是由有机阴离子运输多肽介导通过血脑屏障（BBB）［2］，具有靶向性，使颅内痉挛血管靶向扩张，并增加侧支循环，改善梗死区半暗带血流量，恢复部分受损神经细胞功能；抑制血小板的聚集，刺激血管内皮细胞产生t－PA，并可减少自由基的生成，阻止自由基引发的脂质过氧化反应。本研究中2组脑梗死患者与正常健康人相比NO和MDA 浓度明显升高，这表明缺血缺氧已启动自由基损伤过程，与Aygul［3］、张国栋等［4］报道一致。在脑梗死中NO 的作用具有双重性。在急性局灶性脑缺血时，早期时由内皮型一氧化氮合酶（eNOS）合成的NO 有神经细胞保护作用，而在中后期，由诱生型一氧化氮合酶（iNOS）合成的NO 有神经毒性作用，主要介入迟发性神经元损伤。本研究从患者就诊时间推测，此时相的NO 生成可能由iNOS催化合成，凯时治疗后患者血浆中NO 含量显著降低，说明凯时可能通过抑制中后期iNOS的活性调节NO 含量，减轻其神经细胞毒性作用，是其治疗急性脑梗死的药理机制之一。MDA 是氧自由基与生物膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应的代谢产物，是反映自由基浓度和脂质过氧化程度的重要指标［5］，常与反映机体清除自由基能力的超氧化物岐化酶（SOD）配伍检测［6－7］。故研究脑组织缺血再灌注损伤时，检测血清中MDA水平有重要临床意义。NO 通过与超氧阴离子O2发生反应，过氧化亚硝酸（ONOOH）生成，从而诱发脂质过氧化。本研究NO 的变化趋势与MDA 相同，证实了NO、脂质过氧化与MDA 间存在因果关系。研究中的患者均未能行早期溶栓治疗，血浆NO、MDA 在实验组明显下降，且脂质过氧化产物减少，脑梗死体积变化也较对照组明显改善；分析与凯时清除NO、MDA 及其他自由基，减轻缺血半暗带区域的自由基损伤，提高抗氧化能力，从而减小梗死体积有关；与治疗3d时相比，治疗7d时NO 和MDA 进一步降低，表明凯时抑制一氧化氮合酶激活作用和MDA 的产生与治疗时间成正比，后续研究将进一步观察凯时在更长疗程的作用。

研究发现，通过减少自由基的产生或增强清除自由基的能力可以起到保护脑神经组织的作用［8］。SOD 是一种金属蛋白酶，可以歧化O2为H2O2，后者再由过氧化氢酶作用变为H2O［9］，在生物体内能清除氧自由基，保护生物体免受自由基的攻击。SOD 活力的高低间接反映了机体清除氧自由基的能力。CAT 是细胞内活性氧清除系统的重要组成成分，能将H2O 分解成无毒的水及分子氧，并保护SOD 不被自由基灭活，对维持细胞活性氧代谢起着重要作用［10］。当BBB完整性遭到破坏时，CAT 能够进入中枢神经系统，从而使中枢神经系统免受活性氧簇（ROS）诱导损伤，降低脑神经组织氧化损伤。本研究中2组脑梗死患者与正常健康人相比SOD 和CAT 浓度明显降低；实验组与对照组相比，随治疗的时间延长SOD、CAT 明显升高，同时明显降低MDA 和NO 水平。提示脑梗死患者增强了脂质过氧化反应，加重氧自由基损伤神经细胞；凯时促进SOD 和CAT 的释放，减少H2O2含量，同时降低NO、MDA 的产生，从而脂质过氧化反应被抑制，由氧自由基诱导的神经细胞损伤被减轻。

综上所述，脑梗死与血清NO、MDA、SOD、CAT 水平密切相关，故NO、MDA、SOD、CAT 可能涉及脑梗死的发生、发展，进一步研究尚需开展。凯时对急性脑梗死患者的保护作用是通过降低患者血清中NO 和MDA 含量，并增强CAT 和SOD活性，而在整个治疗过程中未发现明显不良反应。

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