球孢白僵菌对橘小实蝇实验种群的影响

潘志萍, 翟 欣

(广东省昆虫研究所, 广东省野生动物保护与利用公共实验室, 广东省农业害虫综合治理重点实验室，广州 510260)



球孢白僵菌对橘小实蝇实验种群的影响

潘志萍, 翟 欣

(广东省昆虫研究所, 广东省野生动物保护与利用公共实验室, 广东省农业害虫综合治理重点实验室，广州 510260)

研究了球孢白僵菌(Beauveriabassiana)B6菌株对橘小实蝇成虫(BactroceradorsalisHendel)的影响。结果表明,在杨桃、番石榴与香蕉3种水果上喷施球孢白僵菌孢子悬浮液,橘小实蝇雌成虫平均产卵量分别为(188.3±11.4)粒、(156.7±13.1)粒、(165.3±9.1)粒,与对照差异不显著;孵化的老熟幼虫数量分别(156.3±11.5)头、(130.3±8.3)头、(147.7±10.6)头,与对照差异也不显著;成虫存活率分别为51.1%、52.2%、62.3%,与对照差异极显著。干扰作用控制指数IIPC为0.554 2、0.573 0、0.667 7,对橘小实蝇成虫控制效果明显。

橘小实蝇; 球孢白僵菌; 产卵; 控制作用

橘小实蝇(BactroceradorsalisHendel),又名东方果实蝇,属双翅目(Diptera),实蝇科(Tetriphitidae),果实蝇属(BactroceraMacquar),是一种食性广,世代重叠严重,繁殖力强,传播快,危害大,难防治的危险性检疫害虫,给我国的农业生产尤其是果业生产带来了巨大问题,并造成水果外销困难,极大地影响了我国出口创汇[1-2]。

利用虫生真菌防治害虫是目前生物防治研究的一大热点。球孢白僵菌[Beauveriabassiana(Bals.-Criv.) Vuill.]被认为是最具开发潜力的一种昆虫病原真菌,在多种害虫的防治中取得了显著的经济、社会和生态效益[3-5]。为了进一步研究球孢白僵菌对橘小实蝇的控制效果,本研究通过在不同水果上喷施球孢白僵菌,研究其对橘小实蝇成虫繁殖的影响,以探讨球孢白僵菌对橘小实蝇种群的控制能力,为橘小实蝇防控寻找适宜的途径。

1 材料与方法

1.1 供试虫源与菌种

从广东省广州天河区杨桃公园采集被橘小实蝇为害的杨桃、番石榴等果实,收集橘小实蝇幼虫,置于温度(25±3)℃,相对湿度 75%～90%,光周期L∥D=12 h∥12 h的室内养虫室用人工饲料饲养2代后供试。

球孢白僵菌B6菌株,由中国农科院农业环境与可持续发展研究所真菌农药创制实验室提供,经本研究中心用橘小实蝇成虫与蛹筛选确认对橘小实蝇具有较高的致病力。

冰箱保存的试管斜面菌种,移至新鲜的SDAY斜面培养基上,在25 ℃、L∥D=8 h∥16 h培养箱中培养10～15 d后备用。

新鲜孢子粉的准备：新鲜培养的试管斜面孢子粉接种到广口瓶斜面SDAY培养基上扩繁,在25 ℃、L∥D=8 h∥16 h培养箱中培养后备用。

试验材料：将室外采回的河沙过筛、洗净后晾干,于150 ℃烘箱中消毒2 h,冷却后调节含水量为5%备用。供试水果,从超市中购买,选择新鲜、个体大小与成熟度一致的水果。

1.2 菌株培养和孢子悬浮液配制

菌种接种于SDAY平板培养基上,(25±1)℃恒温光照(L∥D=16 h∥8 h)培养,用0.1%吐温-80无菌水将平板上培养10～15 d的B6菌株分生孢子冲洗,收集孢子。经磁力搅拌器搅拌15 min,待孢子被打散均匀后,通过4层无菌医用纱布过滤,获得孢子悬浮液,经孢子计数器确定孢子浓度后,按梯度稀释法配制成浓度1.2×107孢子/mL的孢子悬浮液,用于测定。

1.3 试验方法

供试羽化的成虫每30头(♀∶♂=1∶1)引入一个40 cm×30 cm×30 cm养虫笼中,放在20～28 ℃室内培养,喂以适量的酵母与蔗糖混合物(1∶3)补充营养并补充蒸馏水饲养,在羽化后20、23、26 d分别选取大小、成熟度一致的杨桃、番石榴与成熟香蕉8个,为了增加橘小实蝇的产卵量,用昆虫针在水果上均匀刺20个小孔,在水果表面喷施浓度为1.2×107孢子/mL的白僵菌悬浮液。对照用清水喷施。待水果晾干后,喷菌液和清水的水果同时放入同一笼子,放入养虫笼内供成虫产卵,24 h后取出水果,检查产卵数量,观察记录成虫死亡数量,并从中取出死虫进行保湿培养,以虫体表面长出菌丝为有效致死,每处理重复3次,观察20 d。取出已被产卵的水果,放在50 cm×20 cm×30 cm器皿中,底下盛有高20 cm细沙,放置通风透气的室内常温培养,等幼虫发育至老熟时将其挑出放入湿润的细沙中化蛹。记录从卵到老熟幼虫的存活率、化蛹率、羽化率情况。

1.4 球孢白僵菌对橘小实蝇成虫影响的评价方法

采用简化后的干扰作用控制指数(interference index of population control,IIPC)作为评价指标。当IIPC<1时,表明球孢白僵菌对橘小实蝇成虫种群有一定的影响,影响作用的大小可以用IIPC值的大小进行估计,IIPC越小,表明对成虫影响作用越大;IIPC=1时,表明与对照作用一致;IIPC>1时,表明球孢白僵菌对橘小实蝇种群有促进的作用。其计算方法如式1或式2：

(1)

式1中I为种群趋势指数,I′为作用因式分解干扰i后的种群趋势指数。

(2)

1.5 数据处理

试验数据用EXCEL统计软件处理,采用t检验进行差异性分析。

2 结果与分析

2.1 在杨桃上喷施球孢白僵菌对橘小实蝇成虫的影响

在杨桃上喷施球孢白僵菌孢子悬浮液,与对照比较,成虫存活率明显降低,处理组为51.1%±3.8%,而对照成虫存活率为92.2%±1.9%,在0.05水平上差异极显著。橘小实蝇成虫每雌每天平均产卵量为(62.8±3.8)粒,与对照产卵量(65.6±3.1)粒在0.05水平上差异不显著。同样,卵孵化率、幼虫数量、化蛹率、羽化率与对照在0.05水平上差异不显著。从干扰控制指数IIPC来看,IIPC越小对成虫影响作用越大,因此喷施球孢白僵菌对成虫存活率影响最明显,IIPC为0.554 2(见表1)。

2.2 在番石榴上喷施球孢白僵菌对橘小实蝇成虫的影响

在番石榴上喷施球孢白僵菌孢子悬浮液,处理组成虫存活率为52.2%±6.9%,对照成虫存活率为91.1%±1.9%,在0.05水平上差异显著(见表2)。橘小实蝇成虫每雌每天平均产卵量为(52.3±4.4)粒,与对照(57.9±3.7)粒在0.05水平上差异不显著。同样,卵孵化率、幼虫数量、化蛹率、羽化率与对照在0.05水平上差异不显著。从干扰控制指数IIPC来看,喷施球孢白僵菌对成虫存活率作用最明显,IIPC为0.573 0,其次是对幼虫存活率的影响,IIPC为0.868 7,对产卵量、化蛹率、羽化率等控制作用不明显。

表1 在杨桃上喷施球孢白僵菌对橘小实蝇成虫的影响1)

1) 表中同列相同字母表示经t检验分析在0.05水平上差异不显著。下同。

The same letters in the same column indicate no significant difference at 0.05 level byt-test. The same below.

表2 在番石榴上喷施球孢白僵菌对橘小实蝇成虫的影响

2.3 在香蕉上喷施球孢白僵菌对橘小实蝇成虫的影响

从表3可知,在香蕉上喷施球孢白僵菌孢子悬浮液,成虫存活率处理组为62.3%±5.2%,而对照组成虫存活率为93.3%±3.4%,差异显著。在其他方面,橘小实蝇成虫每雌每天平均产卵量、卵孵化率、幼虫数量、化蛹率、羽化率与对照差异不显著。从干扰控制指数IIPC来看,喷施球孢白僵菌对成虫存活率作用最明显,IIPC为0.667 7,对产卵量、卵孵化率、化蛹率、羽化率等控制作用不明显。

表3 在香蕉上喷施球孢白僵菌对橘小实蝇成虫的影响

在上述杨桃、番石榴与香蕉3种水果上喷施球孢白僵菌孢子悬浮液,干扰控制指数分别为0.454 0、0.433 2、0.588 9。控制效果最明显是在番石榴果实上喷施,其次是在杨桃果实喷施,效果最差是在香蕉喷施。也就是说,果实不同形状、气味等性状在一定程度上影响了喷施球孢白僵菌防治橘小实蝇的效果。

3 结论与讨论

应用球孢白僵菌防治具有应用方便、保护天敌、不污染环境等优点,是许多害虫生物防治的重要选择[7]。橘小实蝇成虫产卵于果实的表面,幼虫在寄主果实内取食,直到果实腐烂,老熟幼虫从果内爬出,以弹跳方式移动寻找适宜地点化蛹。成虫期与幼虫入土化蛹期是施药和感病的最佳阶段。因此,本文针对敏感期,对在不同水果表面喷施球孢白僵菌对橘小实蝇成虫控制作用进行评价,以期为应用防治提供依据。

研究结果表明,在不同水果上喷施球孢白僵菌,对直接接触到药剂的成虫影响比较大,成虫死亡率与对照相比均差异显著,控制作用明显。但对其产生的后代影响较小,如对产卵量、卵孵化率、化蛹率及羽化率影响均不明显。也就是说,球孢白僵菌对橘小实蝇成虫控制效果明显,成虫可在交配、产卵过程中感染球孢白僵菌,发病,导致死亡率上升。因此,在橘小实蝇成虫羽化高峰期喷施球孢白僵菌,可有效控制橘小实蝇种群数量。这与Rosa等[8]的结果一致,即白僵菌对墨西哥实蝇(AnastrephaludensLoew)幼虫的致死率较低,而对成虫致死率很高,与章玉苹等[9]、潘志萍等[10-11]利用球孢白僵菌剂防治橘小实蝇所用方法及所取得的防效较为一致。

广东省春季温度较高、降水较多,是多种作物的生长季节和害虫的盛发季节,也正是最适合使用球孢白僵菌控制这些害虫的季节。由此,在防治过程中,在分生孢子不易失活的情况下,在果树叶面喷施白僵菌孢子悬浮液,可有效降低橘小实蝇成虫种群数量,减轻橘小实蝇的为害。果园的小气候相对较稳定,喷施的球孢白僵菌较容易定殖,不易散失,通过人为因素改善果园的环境条件,可以创造一个有利于球孢白僵菌流行的小环境,提高球孢白僵菌持续防治效果。

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(责任编辑：田 喆)

Effects ofBeauveriabassianaon experimental populations ofBactroceradorsalis

Pan Zhiping, Zhai Xin

(Guangdong Provincial Institute of Entomology, Guangdong Public Laboratory of Wild Animal Conservation and Utilization, Guangdong Key Laboratory of Integrated Pest Management in Agriculture, Guangzhou 510260, China)

The effects ofBeauveriabassianastrain on the adults ofBactroceradorsaliswere studied. The results showed that, by spraying carambola, guava and banana withB.bassianaspore suspension,B.dorsalisfemale adults laid 188.3±11.4, 156.7±13.1, and 165.3±9.1 eggs on average, respectively, not significantly different from the control. The numbers of hatched larvae were 156.3±11.5, 130.3±8.3, and 147.7±10.6, respectively, not significantly different from the control; adult survival rates were 51.1%, 52.2%, and 62.3%, respectively, significantly different from the control. The interference index of population control (IIPC) was 0.554 2, 0.573 0, and 0.667 7, respectively. It indicated thatB.bassianastrain could effectively controlB.dorsalisadults.

Bactroceradorsalis;Beauveriabassiana; oviposition; control

2014-04-10

2014-07-16

公益性行业(农业)科研专项(200903047)

S 476.12

A

10.3969/j.issn.0529-1542.2015.03.012

联系方式 E-mail: zhipingpan@126.com