CD47在恶性肿瘤中的表达及相关问题研究现状

秦　丽，汪延明



CD47在恶性肿瘤中的表达及相关问题研究现状

秦丽，汪延明*

CD47是一种广泛表达于细胞膜表面的免疫球蛋白样蛋白质，它与信号调节蛋白α（SIRPα）相结合，逃避巨噬细胞的吞噬。近年发现大部分肿瘤细胞CD47呈高表达状态，使肿瘤细胞得以逃避巨噬细胞的吞噬作用。故本文就CD47的功能、CD47在各系统恶性肿瘤中的研究现状进行综述。

CD47；信号调节蛋白α（SIRPα）；恶性肿瘤

QIN Li①， WANG Yan-ming.①Liaoning Medical University，Jinzhou，Liaoning 121001，China

［Abstract］CD47 is a kind of immunoglobulin-like proteins which is widely expressed on the surface of cell membrane，and combined with the signal regulated protein alpha（SIRP）to escape the phagocytosis of macrophages.In recent years，the most of tumor cells have been found to be highly expressed with CD47，so that the tumor cells can escape the phagocytosis of macrophages.In this paper，the current research status of the function of CD47 and CD47 in the malignant tumor of each system is reviewed.

［Key words］CD47；SIRPα；Malignant tumor

CD47是一种广泛表达于细胞膜表面的免疫球蛋白样蛋白质。它与表达于巨噬细胞表面的配体信号调节蛋白α（SIRPα）相结合，逃避巨噬细胞的吞噬。近年发现大部分肿瘤细胞CD47呈高表达状态，肿瘤细胞表面CD47与SIRPα结合，发出“别吃我”的抑制抗性信号，使肿瘤细胞得以逃避巨噬细胞的吞噬作用，进而抑制固有免疫系统［1］。在治疗上，抗CD47抗体通过阻止CD47与SIRPα结合或与CD47-SIRPα复合体结合从而促进肿瘤细胞被吞噬和清除。近年来，大量的研究表明，应用抗CD47单克隆抗体对抑制肿瘤的生长和预防各种类型的癌症转移作用明显。

1　CD47与血液系统肿瘤

1.1白血病Jaiswal等［2］报道，无论在髓系还是粒系白血病干细胞中CD47的表达水平较正常的造血干细胞明显增加，且与生存呈负相关。CD47在急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）中高表达，在mRNA水平CD47在T细胞ALL中的表达显著高于B细胞ALL，而在蛋白水平两者表达无明显差别［3］。在鼠患人AML和ALL的动物模型，应用抗人CD47单克隆抗体，能够清除小鼠体内的白血病细胞，且治疗后的小鼠能长期保持无白血病细胞生存状态［4，5］。最近研究发现在急性单核细胞的白血病中，抗CD47单克隆抗体和阿糖胞苷联合成为急性单核细胞的白血病的靶向治疗的新选择［6］。

1.2淋巴瘤研究发现在多种B细胞非霍奇金淋巴瘤（non-hodgkin lymphoma，NHL）中CD47表达均明显高于正常组织，且CD47高表达多预示NHL预后不良。在淋巴瘤小鼠模型中，应用抗CD47抗体可以阻止淋巴瘤细胞的扩散并延长生存期［1］。研究发现，抗CD47抗体可诱导多种恶性淋巴瘤细胞系的凋亡。其作用机制不是直接杀伤NHL细胞，而是通过巨噬细胞的吞噬作用。在体外，敲除CD47和应用抗CD47抗体促进巨噬细胞的吞噬活性；在体内，抗CD47抗体抑制淋巴瘤小鼠模型腹水形成和器官侵犯［7］。在淋巴瘤细胞的小鼠模型中，抗CD47抗体与抗CD20抗体联合应用能够延长小鼠的生存时间［5］。

1．3多发性骨髓瘤CD47表达上调同样见于多发性骨髓瘤细胞，其表达水平随疾病的进展而增高［8］。有研究发现，在小鼠骨髓瘤模型中，CD47敲除组小鼠与野生型对照组小鼠，其肿瘤骨转移的发生率要低［9］。抗CD47抗体通过影响CD47信号通路诱导骨髓瘤细胞凋亡，可延长荷瘤小鼠的生存期［10］。Kim等［11］研究发现，抗CD47抗体能够延缓患者骨髓瘤细胞的生长，减轻骨质吸收。总之，抗体通过阻断CD47，促进骨髓瘤细胞的吞噬，抑制骨髓瘤细胞的生长。

2　CD47与生殖系统肿瘤

2.1卵巢癌CD47在肿瘤组织及交界性肿瘤中表达明显高于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织，高表达CD47是卵巢癌预后不良的独立危险因素［12］。在很早以前就发现卵巢癌细胞CD47表达增高，虽然后来发现CD47在卵巢癌中不具备特异性，不再作为卵巢癌的标记物［13］。但随着研究的深入，Hongrapipat等［14］在卵巢癌OVCAR-3细胞系中加入化疗药物，其作用机制是使药物与抗CD47抗体Fab’结合，结果显示提高了化疗药物对肿瘤细胞的生物识别效率，为靶向治疗奠定了基础。

2.2乳腺癌Manna等［15］研究表明，CD47在乳腺癌MCF-7、AU-565、HBL-100和MDA-MB-231细胞系中高表达，应用抗CD47单克隆抗体能够诱导四个乳腺癌细胞系的凋亡。Nagahara等［16］研究显示乳腺癌患者骨髓及外周血细胞CD47表达均上调。后有研究对乳腺癌患者骨髓和外周血中CD47和SIRPα在mRNA水平的表达进行检测，骨髓中CD47高表达是一种独立的不利预后因素，骨髓中CD47水平高的患者预后明显比CD47水平低的患者差，而外周血中CD47水平与预后无相关性。

3　CD47与消化系统肿瘤

3.1胃癌Yoshida等［17］发现，CD47在胃癌中表达同样是不良因素。通过对术后标本进行免疫组织化学表达的研究。筛选荧光标记的CD47和CD44（已知胃癌干细胞标记）表达阳性的胃癌细胞系MKN45和MKN74，进行体外增殖、集落形成能力和体内成瘤性的研究。应用抗CD47单克隆抗体，腹腔注入MKN45细胞株的免疫缺陷的小鼠得以生存。115例免疫组织化学的临床标本显示CD47在57例中高表达，其高表达是一个独立的不良预后因素。大约90%的MKN45和MKN74细胞表达CD47和CD44。CD47hi胃癌细胞表现出显著的比CD47lo更高的增殖和集落形成能力，CD44hi和CD47hi表现出更高的体外增殖和体内致瘤性。抑制CD47显著增强体外吞噬癌细胞和延长腹腔转移小鼠的生存期。

3.2结肠癌Zhang等［18］发现，在结肠癌组织中CD47的表达比正常组织明显增高，此外，在mRNA水平CD47的表达显著增高，相当于正常组的1.9倍。同时结肠癌组织中高水平的肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）浸润，导致癌症患者预后较差。将M1型和M2型巨噬细胞与人结肠癌SW480细胞株共培养的情况下，M2型巨噬细胞比M1型巨噬细胞迁移速度快。类似地，巨噬细胞能够诱导SW480细胞迁移和CD47的表达。抗CD47抗体显著降低M2型巨噬细胞对SW480细胞的迁移作用。这一效应主要通过阻断CD47与巨噬细胞表面信号调节蛋白SIRPα的结合。以上研究结果揭示了CD47高表达与巨噬细胞浸润共同构成的肿瘤微环境促进结肠癌细胞的迁移和随后的转移。针对CD47的阻断抗体可能成为结肠癌患者的新的治疗方法。

3.3肝癌David等［19］报道，在肝癌化疗抗性中，发现CD47表达上调。CD47优先表达于肝肿瘤干细胞中。敲除CD47能够抑制肿瘤干细胞的增殖、转移等特性。CD47+的肝细胞癌HCC细胞能够隐藏组织蛋白酶S，组织蛋白酶S通过CTSS/PAR2通路控制肝肿瘤干细胞。抑制CD47能够抑制体内肝细胞癌的增长，通过封锁CTSS/PAR2信号产生了化疗增敏效应。

3.4胰腺癌Cioffi等［20］发现，CD47高表达于胰腺导管腺癌的肿瘤干细胞CSC，不表达于其他胰腺良性细胞中。抑制CD47能够有效地增强巨噬细胞对胰腺癌肿瘤干细胞的吞噬作用。更有趣的是，在巨噬细胞缺失的情况下长期抑制CD47能够诱导肿瘤细胞的凋亡。在异体移植模型中，仅仅抑制CD47没有导致相关肿瘤的增长放缓，但添加吉西他滨或紫杉醇能够导致持续肿瘤退化和预防停药后疾病复发。

4　CD47与泌尿系统肿瘤

4.1膀胱癌膀胱癌的肿瘤起始细胞（T-IC）中其亚群CD44阳性细胞群，在体内试验中可以形成移植瘤，具有较强的增殖能力。在CD44阳性细胞亚群中发现CD47同样呈高表达。在鼠患人膀胱癌移植模型，CD44和CD47主要高表达于肿瘤外周的细胞，而肿瘤内部的细胞主要呈低表达。研究证实在膀胱癌细胞中CD47的表达比例高达80%。在体外试验中，在膀胱癌细胞与巨噬细胞共培养的情况下，加入抗CD47单克隆抗体，使膀胱癌细胞得以被巨噬细胞吞噬和清除［21，22］。

4.2肾癌CD47同样在肾癌中高表达，其可以作为肿瘤诊断及判断预后的一个较客观的指标。国内学者研究发现CD47在肾癌组织中，mRNA和蛋白表达量明显高于正常肾组织。肾细胞癌RCC组织中CD47阳性表达与肿瘤分化程度、TNM分期和肿瘤直径有关。Willingham等［23］研究结果表明CD47在多种实体肿瘤中高表达均与生存期有关，CD47在mRNA水平的高表达提示肿瘤预后不良，肾细胞癌CD47高表达组患者生存时间较低表达组明显缩短。

5　CD47与神经系统肿瘤

Boukhari等［24］发现，激活CD47能够诱发人脑星形细胞瘤细胞的增殖。表观遗传UHRF1（ubiquitin-like containing PHD and RING Finger 1）在各种癌症中过表达并沉默抑癌基因p16的表达，从而促进细胞的增殖。使用抗体阻断人脑星形细胞瘤细胞株U87和CCF-STTG1细胞中的CD47导致UHRF1表达下调，并伴有抑癌基因p16表达上调，使癌细胞增殖能力下降。总之，目前的研究结果表明，CD47的激活能增加UHRF1的表达，CD47通过UHRF1调节表观遗传代码。这可能是一个细胞增殖和转移的新通路。

6　CD47与运动系统肿瘤

其中代表性的是骨肉瘤。Xu等［25］发现CD47在骨肉瘤细胞mRNA及蛋白质水平均呈高表达。另外绝大多数的CD44+骨肉瘤干细胞表达CD47虽然比例不同（从80%到99%不等），也成高表达状态。高CD47mRNA表达水平能缩短肿瘤患者的无进展和整体的生存期。用特定的Abs封闭CD47能够抑制骨肉瘤细胞的侵袭能力，进一步抑制自发性肺转移的KRIB骨肉瘤细胞。封闭CD47能增加巨噬细胞对骨肉瘤细胞的吞噬作用。

总之，CD47广泛高表达于人类恶性肿瘤，并与肿瘤患者的不良预后相关。在体外，利用抗体阻断CD47与SIRPα结合，可促进巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬作用，并诱导肿瘤细胞凋亡。在体内，利用抗体阻断CD47可抑制肿瘤生长，已经在多个小鼠模型中取得显著成效。尽管目前仍并不完全清楚潜在的分子机制，但是大量研究表明，CD47在不久的将来可以作为肿瘤治疗的新靶点，在攻克恶性肿瘤的治疗过程中提供全新的手段。

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［本文编辑：韩仲琪］

The current research on the expression of CD47 in malignant tumor and its relevant issues

R73

A

10.14172/j.issn1671-4008.2016.07.033

121001辽宁锦州，辽宁医学院（秦丽）；250031山东济南，济南军区总医院（汪延明）

汪延明，Email：ymwang64@163.com