畜禽流行性乙型脑炎的诊断与防治

佟金彪

（黑龙江省绥滨县畜牧兽医局，黑龙江绥滨 156200）

畜禽流行性乙型脑炎的诊断与防治

佟金彪

（黑龙江省绥滨县畜牧兽医局，黑龙江绥滨 156200）

流行性乙型脑炎又称日本乙型脑炎，是由乙型脑炎病毒引起的一种急性人畜共患病。乙型脑炎病毒属于披膜病毒科的黄病毒属。本病在家畜中，马发病出现脑炎症状，母猪则表现流产、死胎及公猪常发一侧或两侧睾丸炎，而其他家畜和家禽虽感染率高，但大多为隐性感染。

流行性乙型脑炎；症状；病理

1 流行病学

马、猪、牛、羊、鸡、鸭和野鸟都可感染本病毒，马最易发病，人次之，其他家畜多为隐性感染。本病主要通过蚊子叮咬而传播。蚊子不仅是传染媒介，也是病毒的贮存宿主。本病有明显的季节性，主要在夏季至初秋7～9月份流行。

2 临诊症状

3岁以下的幼驹多发，成年马多为隐性感染。潜伏期约4～15d。病马病初体温升高，精神不振，食欲减退。严重者出现神经症状，表现精神沉郁，反应迟钝或消失，常出现异常姿势，如两腿交叉或做圆圈运动，或四肢失去平衡，走路歪斜，严重时站立不稳，卧地不起，四肢呈游泳状。少数病马表现兴奋，精神异常，狂暴不安，乱冲乱撞，后期因全身过度疲惫，麻痹衰竭而死。病程快者2～3d，慢者7～20d死亡。本病在猪主要症状是流产或早产，胎儿多是死胎，大小不等或木乃伊胎。流产后母猪症状很快减轻，在预产期不见腹部和乳房膨大，亦不见泌乳。患病公猪除一般症状外，常发生睾丸炎。

3 病理变化

病马尸体剖检眼观变化不明显，脑脊髓液增多，软脑膜和实质充血、出血和水肿，内脏仅见水肿。脑病理组织学检查，可见典型的非化脓性脑炎变化。病猪脑和脊髓膜充血，脑室和脊髓腔液增多。睾丸不同程度肿大，实质充血、出血和坏死灶。子宫内膜显著充血。流产或早产胎儿常见有脑水肿，胎儿常呈木乃伊化，从拇指大小到正常大小不等。

4 实验室检验

4.1 病毒分离

（1）病料的处理：无菌采取死后或濒死期扑杀病畜的脑组织，放入灭菌研钵内，用生理盐水洗去血液，然后研碎。用10%正常家兔灭活血清盐水，制成l：10脑组织悬液，加入青、链霉素各100～500国际单位/ml，3000转/min离心15min，吸取上清液，立即接种。如暂时不能进行病毒分离，可将脑组织块放于50%中性甘油生理盐水中。

（2）接种动物：取3周龄幼鼠，每次接种6只，每鼠脑内接种0.03ml，接种后观察两周，如在72h内死亡者弃去。接种72h后出现旋转或抽搐，说明已发病，即应将其杀死，采取脑组织制成悬液，再传代一次进行鉴定。如不发病，观察19d后扑杀，盲传3代仍不发病者，则可证实不是本病。

（3）鉴定病毒：将传代死亡的鼠脑组织制成抗原，与已知乙型脑炎免疫血清作补体结合试验。如为阳性，则可初步鉴定为乙型脑炎。

4.2 血清学检测

血清学检测包括病毒抗原的检测和特异抗体的检测。病毒抗原的检测有荧光抗体检测等。特异抗体的检测有血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验、补体结合试验、中和试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）等，但以HA和HI试验较为常用。

下面介绍血凝（HA）和血凝抑制（HI试验：

（1）血凝素效价测定：将制备的血凝素用0.4%鸡蛋清、pH7.5磷酸盐缓冲液液配成10倍的稀释液。取清洁干燥的大孔塑料滴定板，于第一至第十孔内分别加入预冷的0.4%鸡蛋清pH7.5磷酸盐缓冲液0.2ml。吸取10倍稀释的血凝素0.2ml，加入第一孔内，做倍比稀释，最后一孔混合后吸出0.2ml弃去，此时第一至第九各孔中的血凝素的稀释度为20～5120倍。第十孔不加血凝素，作为红细胞对照。于第一至第十孔内各补加pH4.3磷酸盐缓冲液0.2ml，每孔加入用pH5.3磷酸盐缓冲液配制成的0.5%鹅红细胞悬液0.4ml，混合均匀，室温感作60分钟。观察结果判定：按血凝强度分别以+、++、+++、++++和-表示。以50%红细胞出现凝集（++）的血凝稀释度为其血凝效价。

（2）血凝抑制试验：取微孔塑料板一块，从第一排的第二孔开始，每孔加入0.4%鸡蛋清pH5.3磷酸盐缓冲液0.2ml，第九孔加入0.3ml。然后吸取经高岭土处理的10倍被检血清0.2ml加入第一、二孔内。第二孔混合后取出0.2ml放入第三孔内，如此反复操作直至第八孔，由第八孔吸出0.2ml弃去。此时血液稀释度从10～1250倍。第九孔加入被检血清0.1ml作为血清对照。于第一至八孔内各加0.2ml8单位血凝素，混合均匀后置室温60mn，随后各加0.5%鹅红细胞悬液0.4ml。混合置室温感作60min后观察结果，以完全抑制血凝出现的血清最高稀释度为该血清的血凝抑制效价。同时作红细胞对照、血清对照和血凝效价对照。

（3）注意事项：血清中非特异性抑制物可用丙酮、氯仿或高岭土去除。其中高岭土处理法简单易行，效果也好。试验用0.4%鸡蛋清pH7.5磷酸盐缓冲液对血凝素具有较好的保护稳定作用。

5 防治

本病的主要传播媒介是蚊，防蚊灭蚊是预防本病的一项重要措施。另对4个月至1岁的幼驹可用乙型脑炎弱毒疫苗进行预防接种，注射时间应在5月份蚊子活动以前。对猪于流行前一个月或对4月龄以上至2岁的后备公母猪都要注射乙型脑炎弱毒疫苗进行预防接种，免疫后一个月可产生坚强的抵抗力。

[1]吕茂杰，郁宏伟，韩佳丽，等.猪乙型脑炎的诊断与防治[A].“科技进步推进畜牧业现代化”科技论文集[C]. 2011：186-188.

[2]杨旭华，史新涛，李镇虎.畜禽乙型脑炎的流行状况及防控对策[J].Agricultural Technology & Equipment，2011，（11）：38-39.