HPLC法测定康尔心胶囊中丹参酮ⅡA的含量

李 鑫

辽宁省朝阳市药品检验检测所，辽宁 朝阳 122000



HPLC法测定康尔心胶囊中丹参酮ⅡA的含量

李 鑫

辽宁省朝阳市药品检验检测所，辽宁 朝阳 122000

目的：建立以高效液相色谱法测定康尔心胶囊中丹参酮ⅡA的含量方法。方法：色谱柱为Kromasil C18(4.6mm×250mm；5μm)；流动相为甲醇-水(75∶25)；流速为1.0mL/min；检测波长为270nm。结果：丹参酮ⅡA在0.1598～3.196μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9995)，加样回收率为98.192%(RSD=0.46%)。结论：该方法准确可靠、专属性好，可用于康尔心胶囊的质量控制。

康尔心胶囊；高效液相色谱法；丹参

康尔心胶囊由三七、人参、麦冬、丹参、枸杞子、何首乌、山楂等7味中药组成，具有益气活血、滋阴补肾之功效，能够增加冠脉血流量，降血脂，用于治疗冠心病、心胶痛、胸闷气短等症，是临床常用的中成药。处方中的丹参具有活血化瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的疗效，用于胸痹心痛、心烦不眠等症，而丹参酮ⅡA是其主要活性成分。本品收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第二册，但标准中只对性状、理化鉴别及检查项确定了检验标准，并未对其主成分丹参进行质量控制。为了控制康尔心胶囊的药品质量，笔者采用高效液相色谱法对其处方中的丹参酮ⅡA进行了定量分析[1-7]。报告如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器 岛津LC-2010A型高效液相色谱仪(包括LC-2010型紫外检测器， LC solution色谱工作站)；微孔滤膜(0.45μm)；BSA224S-CW型万分之一电子天平(赛多利斯科学有限公司)；BP211D型十万分之一电子天平(赛多利斯科学有限公司)；HQ3120型超声仪(翡纳米科技发展有限公司)。1.2 材料 康尔心胶囊(批号：141001、141004、151004，辽宁可济药业有限公司)，丹参酮ⅡA对照品(批号：110766-200619，中国药品生物制品检定所)，甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其它试剂为分析纯。

2 含量测定

2.1 色谱条件及系统适应性研究 色谱柱Kromasil C18(4.6mm×250mm；5μm)；流动相为甲醇-水(75∶25)；流速为1.0mL/min；柱温为室温；检测波长为270nm；进样量为10μL；理论板数：按丹参酮ⅡA计算不低于2000。分离度大于1.5，峰形良好，阴性无干扰(见图1)。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取0.01598g丹参酮ⅡA对照品，置50mL的棕色容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，混匀，得对照品的储备液。再精密吸取5mL对照品储备液置10mL的棕色容量瓶中，用甲醇定容，混匀。

2.3 供试品溶液的制备 取研细的内容物约1.0g，精密称定，置带塞锥形瓶中，精加50mL甲醇，称定重重，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。

2.4 空白试验 按照处方制法制备无丹参的阴性对照样品，按照“2.3供试品溶液的制备”的方法制备。

2.5 线性关系考察 分别吸取1、5、10、15、20μL对照品溶液注入LC-2010A型高效液相色谱仪，记录高效液相色谱图。横坐标(X)为对照品进样量为，纵坐标(Y)为峰面积积分值，绘制标准曲线，回归方程为Y=46.2+51815.8X，r=0.9995，结果表明丹参酮ⅡA在0.1598～3.196μg范围内有良好的线性关系。

2.6 稳定性试验 取“2.3项下的供试品溶液”，分别于0、2、4、8、12、48h时测定，记录峰面积，RSD为0.78%。表明供试品溶液在48h内是比较稳定的。

2.7 重复性试验 分别取5份样品(批号为141001)，制备方法同供试品溶液，测定，RSD为0.81%，说明该方法的重复性良好。

2.8 精密度试验 精密吸取10μL对照品溶液，重复进样6次，记录对照品峰面积，RSD为0.63%，说明仪器有良好的精密度。2.9 加样回收率试验 精密称取已知丹参酮ⅡA含量的样品(含量为6.1919mg/g)0.5g，分别精密加入丹参酮ⅡA对照品，按供试品溶液方法制备，依法测定含量并计算回收率，结果见表1。

表1 回收率试验测定结果

2.10 样品含量测定 分别取3批样品，按上述方法制备供试品溶液，测定含量，结果见表2。

表2 样品中丹参酮ⅡA的测定结果 (n=5)

3 讨论

3.1 研究对康尔心胶囊中丹参的主要有效成分丹参酮ⅡA建立了含量测定方法，结果可靠，对改进康尔心胶囊制剂的质量标准有一定意义。

3.2 为了保证样品中丹参酮ⅡA被充分提取出来，分别采用回流0.5h、回流1h，回流2h和超声30min的不同提取时间，50%甲醇，70%甲醇，甲醇不同提取溶剂进行了考察，测定结果表明回甲醇作为提取溶剂，回流提取1h有效成分能被充分提取出来[8-9]。

3.3 将流动相甲醇-水比例调整为(70∶30)、(75∶25)、(65∶35)分别进行试验，结果甲醇-水(75∶25)分离效果最好。

[1] 卫生部药典委员会.中国人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂(第一册)[S].1989.

[2] 李玉珍,陈日来,陈晓凯,等.高效液相色谱法测定复方丹参片和滴丸中丹酚酸B和丹参酮IIA的含量[J].中国医药学杂志,2005,25(6):523-525.

[3] 汤杰,宋冰娜,郑盼,等.HPLC测定冠心丹参胶囊中主成分的含量[J].中国现代中药,2015,20(10):66.

[4] 王东升,苗小楼,张世栋,等.HPLC法测定丹翘灌注液中丹参酮ⅡA的含量[J].中兽医医药杂志,2015,(6):316.

[5] 夏崇才,周芙琼,顾宁,等.HPLC法测定冠心Ⅴ号合剂中丹参酮ⅡA含量[J].亚太传统医药,2015,1(11):30.

[6] 郭强.筋骨痛消丸质量标准研究[J].中医监床研究,2015,2(7):7.

[7] 潘红宇,刘跃胜,项海芝.参七胶囊的质量控制方法[J].药物分析杂志,2015,3(32):213.

[8] 张小红,梁洁,肖雪,等.HPLC法测定林芝地区丹参中丹参酮IIA含量研究[J].亚太传统医药,2015,12(11):17.[9] 刘义梅,李孟芝.复方肝舒丸的质量标准研究[J].中南民族大学学报(自然科学版),2015,(2):38-43.

(编辑：程鹏飞)

2016-07-11

李鑫(1985-)，男，汉族，硕士，主管中药师，研究方向为中成药及中药材的鉴定及检验。E-mail:lixin850801@126.com

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1007-8517(2016)19-0117-02