黔产天冬饮片切制工艺研究

2016-12-26 10:00刘亮陈东林万路平丁丽娜冯
中国民族民间医药·上半月 2016年11期
关键词:工艺研究

刘亮陈东林万路平丁丽娜冯华

【摘要】目的:优选天冬饮片的最佳切制工艺,并为其他饮片的切制工艺提供参考。方法:采用单因素及正交试验法,以饮片中总皂苷的得率为主要考察指标,选择软化方法、切片厚度及干燥方法为考察因素,优化饮片的炮制工艺。结果:优选出的炮制工艺为: 天冬药材水蒸气蒸3min后,横切1mm薄片,60℃烘12h。结论:本法操作简便,优选出的炮制工艺稳定可行,重现性好。

【关键词】天冬;切制;工艺研究

【中图分类号】R282.4【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2016)21-0014-03

天冬为百合科多年生攀援草本植物天门冬Asparagus cochinchinensis(Lour.)Merr.的块根,具有养阴清热,润肺滋肾的功效,是一种临床常用中药。天冬是贵州省内的大宗药材,种植面积较大,仅在遵义市凤冈县就有近3000亩的种植基地。天冬主要含有糖类、氨基酸、皂苷类等成分[1],具有抗氧化、抗衰老、抗菌等生理作用[2]。万路平等[3]采用正交试验优化了天冬的渗漉工艺;杜芳权和刘亮等[4-5]对天冬多糖和总皂苷超声提取工艺进行了研究,但尚未见天冬饮片炮制工艺研究的报道。《中国药典》(2015年版)对天冬的描述也仅是“除去杂质,迅速洗净,切薄片,干燥”,没有具体的炮制工艺参数。本研究对天冬饮片的炮制工艺进行了优化,旨在为建立天冬质量控制标准和进一步开发利用提供参考。

1仪器与材料

1.1仪器UV2501紫外分光光度计(日本岛津);Aquelix 5型试验室高纯水系统(重庆市金富科技发展有限公司);DHG 90AOA型电热恒温鼓风干燥箱(宁波江南仪器厂);Senco R系列旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司);DKS-26型电热恒温水浴锅(宁波江南仪器厂);FA2004B型电子天平(上海越平科学仪器有限公司)。

1.2材料菝葜皂苷元对照品(批号:126-19-2,上海圻明生物科技有限公司);天冬药材于2016年6月收集于贵州遵义,经张学愈副教授鉴定为百合科植物天门冬Asparagus cochinchinensis(Lour.)Merr.的块根;所用水为纯化水,试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1单因素试验

2.1.1软化方法考察①烘软:取质地坚硬的天冬药材,置于烘箱中,分别考察60℃、80℃、100℃烘5min后,每隔5min用弯曲法和切制法进行检查,结果60℃、80℃均在20min时全部软化,100℃因温度过高未出现全部软化现象,故烘软确定为60℃烘20min。②润软:取质地坚硬的天冬药材,分别采用抢水洗及适量水浸泡5min后,均用湿纱布盖润,每隔30min观察一次软化情况,结果抢水洗后润及浸泡后润均在4h时全部软化,考虑泡法易损失有效成分,故润软选择为抢水洗后湿纱布盖润4h。③蒸软:取质地坚硬的天冬药材,用水蒸气蒸1min后,每隔1min观察一次,结果3min时可全部软化。

2.1.2干燥方法考察取质地坚硬的天冬药材,抢水洗后,用湿纱布盖润4h,切制成2mm的片,进行以下三种干燥方法试验:①烘干:将天冬片放入烘箱中,60℃加热干燥,每隔2h观察一次,结果12h后,全部硬化,干燥完成。②晒干:将天冬片置于阳光下照射,每隔2h观察一次,结果28h后,全部干燥。③阴干:将天冬片置于阴凉处,每隔12h观察一次,结果96h后,全部干燥。

2.1.3切片厚度考察《中国药典》(2015年版)对饮片厚度要求主要有三种,极薄片(0.5mm以下),薄片(1~2mm),厚片(2~4mm)。综合考虑切制的难易程度,确定1mm、2mm、4mm作为正交试验中天冬切片厚度的三个水平。

2.2正交试验

2.2.1因素水平设计试验以天冬中总皂苷的得率为主要考察指标,选择软化方法、切片厚度、干燥方法三因素为考察因素[6-11],采用L9(34)正交设计表进行试验。正交因素水平表见表1。

2.2.2样品溶液的制备称取各试验号中干燥后的天冬片2g,置于100mL具塞锥形瓶中,分别加入12倍量的水,在恒温水浴锅中70℃提取两次,每次1h,过滤,滤液转移至100mL容量瓶中加水稀释至刻度,摇匀。用移液管精密移取10mL于分液漏斗中,用正丁醇(水饱合)15mL萃取,共3次,合并3次正丁醇萃取液,再用水(正丁醇饱和)20mL反萃,用旋转蒸发仪回收正丁醇,最后成分用甲醇溶解,转移至25mL无色容量瓶中,并稀释至刻度,摇匀后作为样品溶液。

2.2.3标准品溶液的制备准确称量菝葜皂苷元标准品7.8mg,用甲醇溶解,转移至25mL棕色容量瓶中,稀释至刻度,摇匀后作为标准品溶液。

2.2.4标准曲线的绘制分别用移液管精密移取标准品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL于具塞试管中,水浴80℃挥干溶剂,再精密移取5%的香草醛-冰醋酸溶液0.2mL和高氯酸0.8mL,加入具塞试管中,密塞,摇匀,置于60℃恒温水浴锅中反应15min后,快速放入冰水中降温5min,从而停止反应,再吸取5mL乙酸混合,摇匀后,等待10min,在UV2501紫外分光光度计上调整吸收波长为455nm,依次测量A值。根据标准溶液的取样量及最终测量时的体积,计算出六份标准测量液的浓度(C值,单位:μg/mL),再由A值与C值两组数据进行回归方程计算,得到回归方程是A=0.01169C+0.03056,r=0.9994。

2.2.5样品溶液的测定分别用移液管准确吸取0.4mL样品液,按2.2.4中的步骤进行吸光度测定,由回归方程计算出总皂苷的浓度Cx,得率计算公式如下:

总皂苷得率(%)=CX×V×Km (Cx为总皂苷的浓度,V为样品溶液初始体积,K为样品溶液的稀释倍数,m为天冬取样量)。直观分析结果见表2,显著性分析结果见表3。

2.2.6试验结果分析由表2可知,最好的切制工艺应是A1B1C1。分析表3可知,三个因素对炮制工艺的影响顺序为切片厚度﹥干燥方法﹥润软方法,即切片厚度影响最大,具有统计学意义(P<0.05),而干燥方法和润软方法没有差异性。考虑切制工艺操作的时间以及切片难易程度等其它指标,切制工艺修改为A3B1C1。

2.2.7工艺验证为验证该工艺的稳定性,按优选出的最佳工艺进行3批验证性试验,结果3批天冬饮片中总皂苷得率分别为2.22%、2.16%、2.17%,平均得率为2.18%,RSD值为1.53%,表明优选出的炮制工艺稳定、可行。

3讨论

试验之初进行了水提取工艺的优选,选择提取温度(70℃、80℃、90℃)、提取时间(1h、1.5h、2h)、液料比(8倍、10倍、12倍)、提取次数(1次、2次、3次)四因素为考察因素,经过正交试验确定最佳水提取工艺为70℃温度,12倍量水,提取2次,每次1h,从而确定了炮制工艺中提取的操作。

炮制工艺研究经方差分析可以得出,只有切片厚度有统计学意义(P<0.05),故切片厚度确定为1mm。软化方法中,考虑烘软法有时会出现软化度不够,切片困难,洗后润软法天冬外层松泡,切片易碎,且时间较长,故软化方法确定为蒸软法。干燥方法中,考虑操作时间及干燥后成色等情况,确定为烘干法。故试验的最佳切制工艺为天冬药材经水蒸气蒸3min后,横切1mm薄片,60℃烘12h。

参考文献

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[2] 李敏, 费曜, 王家葵.天冬药材药理实验研究[J]. 时珍国医国药, 2005, 16(7): 580-582.

[3] 万路平, 刘亮, 丁丽娜. 正交试验法优选天冬渗漉提取工艺[J]. 中国民族民间医药, 2016, 25(2): 19-20.

[4] 杜芳权, 颜继忠. 超声提取天冬多糖和总皂苷工艺研究[J]. 科技资讯, 2011, 9(21): 96-97.

[5] 刘亮, 丁丽娜, 陈东林. 天冬总皂苷的超声提取工艺优化[J]. 井冈山大学学报(自然科学版), 2015, 36(2): 81-86.

[6] 郁红礼, 汤丽娟, 吴皓, 等. 多指标正交优选大腹皮饮片切制工艺[J]. 中药材, 2014, 37(12): 2178-2181.

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[8] 芦锰, 王一硕, 张振凌. 牛膝饮片切制工艺研究[J]. 时珍国医国药, 2009, 20(11): 2817-2818.

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[10] 杨海玲, 许丹妮, 吴尤娇, 等. 正交试验法优选姜黄饮片切制工艺[J]. 中国药业, 2015, 24(11): 18-20.

[11] 文小女, 钟凌云. 正交试验优选樟帮姜黄连的炮制工艺[J]. 中国实验方剂学杂志, 2016, 22(15): 41-44.

(编辑:陶希睿)

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