苦参凝胶治疗宫颈HPV感染患者的随机对照临床研究

赵鸿达+冯晓玲+赵颜+李娜

[摘要]该文旨在评价苦参凝胶治疗宫颈人乳头瘤病毒（HPV）病毒感染患者的有效性。选取黑龙江中医药大学附属第一医院妇科门诊的120例宫颈HPV病毒感染患者，随机分为3组，即试验组（宫颈外涂苦参凝胶）、对照组（宫颈外涂重组人干扰素α-2b凝胶）、联合用药组（苦参凝胶联合重组人干扰素α-2b凝胶）。3组疗程均为3个月。观察治疗前后患者HPV病毒载量、不同分型病毒载量变化的情况。研究结果可为苦参凝胶的临床应用提供指导作用。

[关键词]HPV； 苦参凝胶； 重组人干扰素α-2b凝胶； HPV载量； HPV分型

[Abstract]This study aimed to evaluate the efficacy ofSophora flavescens gel in treatment of cervical HPV infection. 120 patients with cervical HPV infections were selected from department of gynecology， the first affiliated hospital， Heilongjiang university of Chinese medicine. They were randomly divided into three groups： test group（S. flavescens gel， 40 cases）， control group（human recombinant interferonα-2b gel， 40 cases） and combined application group（combination of the above two， 40 cases）. The treatment course was three months in all three groups. Before and after treatment， the changes of HPV viral load and the changes of viral load for different HPV types were observed.The results could provide guidance for clinical application ofS. flavescens gel.

[Key words]HPV infection；Sophora flavescens gel； human recombinant interferonα-2b gel； viral load； HPV type

doi：10.4268/cjcmm20162129

人乳头瘤病毒（HPV）感染是常见的妇科传染病之一。据报道，宫颈恶性肿瘤的发病可能与HPV感染有关^[1]，而HPV可能主要通过入侵宫颈上皮细胞，从而诱发宫颈上皮内瘤变及恶性肿瘤^[2]。依据其引起病变的轻重，可将HPV病毒分为低危型和高危型^[3-4]。对于治疗HPV感染，西医多采用激光^[5]、冷冻^[6]、疫苗^[7]以及干扰素治疗法^[8]。其中，以干扰素治疗最为常见。而中医治疗可相对减少不良反应，避免损伤正常器官，减轻患者心理负担，故而具有一定优势。

苦参凝胶以苦参提取物作为主要成分，用于妇科阴道感染。本研究通过观察苦参凝胶对宫颈HPV感染患者治疗前后宫颈分泌物中HPV病毒各分型的载量变化，评估其治疗效果，为临床应用提供指导依据。

1 材料与方法

1.1 诊断标准^[9]

以宫颈HPV感染为主要特征，包括以下5项：①HPV（高危型）检测持续阳性时间≥半年，检查次数≥2次；②宫颈液基细胞学检测结果正常或炎性反应；③宫颈液基细胞学检査结果为ASC-US或LSL者行组织病理学检査，结果为炎症者；④宫颈柱状上皮外移；⑤异常阴道出血者。

1.2 纳入及排除标准

纳入标准：①年龄18～60岁已婚或有性生活史的妇女；②HPV检测阳性；③就诊日2周前未进行宫颈疾病治疗者；④宫颈病理学检查确诊为小于CIN Ⅱ级者；⑤近3个月未参加其他临床研究；⑥自愿受试并签署知情同意书。

排除标准：①HPV检测阳性且CIN Ⅱ，CIN Ⅲ，浸润癌及生殖道畸形者；②拟妊娠、妊娠期及哺乳期妇女；③滴虫、霉菌、淋球菌、支原体、衣原体细菌感染等任何一种感染者；④同时患有全身慢性消耗性疾病、心脑血管、造血功能异常和肝肾等严重疾病或患精神类疾病不能配合治疗的患者；⑤过敏体质及对受试药物处方中药物过敏者；⑥据研究者判断，容易造成失访的患者。

1.3 脱落标准

所有符合纳入标准但不符合排除标准并签署了知情同意书的受试者，均可以随时退出该研究，无论因为哪些原因退出，只要未完成规定的治疗周期，或者违背试验方案，以及治疗过程中发生严重不良事件等退出临床试验，均视为脱落病例。

1.4 一般资料

收集黑龙江中医药大学附属第一医院妇科门诊宫颈HPV感染的患者146例，第2次随访脱落26例患者，无不良反应事件报道，最终严格遵守完成临床试验者为120例。全部臨床试验者均釆用中医辨证论治，满足中医带下病的诊断。据统计，120例患者以湿热所致带下病为主。所有患者进行HPV 病毒检测均确诊为宫颈HPV病毒感染。本研究已获得黑龙江中医药大学附属第一医院伦理委员会批准，所有患者均已签署知情同意书，病例采集时间为2015年5月至2016年5月。

1.5 治疗方法

120名宫颈HPV病毒感染患者随机分为3组。试验组、对照组和联合用药组，每组各40例。试验组采用苦参凝胶（贵阳新天药业股份有限公司生产，国药准字Z20050058）；对照组采用重组人干扰素α-2b凝胶[兆科药业（合肥）有限公司生产，国药准字S20010054]；单独用药组由受试者将药物均匀的涂抹在宫颈上，每日1次，每次1 g，经期停药，连用3个月；联合用药组2种药物隔日交替使用， 每日1次，每次1 g，经期停药，连用3个月。嘱患者用药治疗期间禁性生活，停药后返院复查。

1.6 观察指标与方法

1.6.1 HPV 病毒检測方法 取受试者宫颈脱落细胞作为标本，根据人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒[亚能生物技术（深圳）有限公司生产，国食药监械（准）字2008第340099]提供的说明书，进行相应操作。用HPV-DNA杂交捕获试验评价受试者HPV病毒载量情况；用基因芯片法检测受试者HPV分型。

1.6.2 疗效评价标准 痊愈为HPV病毒载量转阴；显效为HPV病毒载量下降≥60%；有效为HPV病毒载量下降≥30%但<60%；无效为HPV病毒载量下降<30%或升高。

1.7 数据处理方法

所有资料采用SPSS 19.0软件进行统计分析。根据临床试验数据性质（计量、分类资料和等级资料），选择合适的统计分析方法。计量资料采用t检验，方差不齐用t′检验，数据不服从正态分布用非参数检验。计数资料采用卡方检验。

2 结果

2.1 一般资料的比较

进入临床观察的120例患者年龄均在18～60岁，3组患者两两比较年龄间无差异，具有可比性（未列相关数据）。3组患者治疗前进行HPV病毒载量检验，经统计软件处理各组之间病毒载量无差异，具有可比性。

2.2 治疗前后病毒载量的比较

3组患者治疗前进行HPV病毒载量检验，经统计软件处理各组之间病毒载量无差异，具有可比性。经SPSS检验，3组药物治疗后HPV病毒载量不符合正态分布，故进行非参数检验，试验组治疗后病毒载量226.5（13.25，606.5），对照组治疗后病毒载量658.5（324.25，887.75），联合用药组治疗后病毒载量17.5（13.25，557.75），见表1。

经SPSS检验，3组药物治疗后HPV病毒载量不符合正态分布，故进行配对样本非参数检验，3组HPV感染患者治疗后HPV病毒载量均明显下降，具有统计学意义，P<0.05。治疗后，与试验组相

比，对照组的病毒载量明显较高，P<0.05；而联合用药组与试验组比较，病毒载量则无明显差异。

2.3 临床疗效的比较

从总有效率的结果可以发现，试验组与对照组相比，无显著差异，而联合用药明显高于其他2组（P<0.05）。另外，从痊愈率的结果来看，试验组和联合用药组都高于对照组（P<0.05），但试验组与联合用药组之间无显著差异，见表2。

2.4 试验组与对照组针对HPV各亚型治疗作用的比较

针对16型和18型的HPV，试验组的有效率显著高于对照组（P<0.05）；而针对31型和其他亚型，2组之间有效率无显著性差异，见表3。

3 讨论

中医将宫颈HPV感染归纳于带下病。《诸病源候论·妇人杂病脉证诸侯·带下病》指出“带下病者，由劳伤气血，损伤冲脉任脉，致令其血与秽液相兼而带下也”。《傅青主女科》中亦提到“以带名者，因带脉不能约束而有此病”。具体分析，中医认为其病病因大致可归纳为以下几点：①脾气虚弱，或饮食不加节制，劳累伤身，耗伤脾气，脾主运化，脾伤则运化失司，水湿之邪向下侵袭，损伤任脉而成带下病；②素体羸弱，本元不固，或房事过频，伤及先天之本，带脉失于约束，冲任不固而成带下；③肝气不舒，日久化热，兼有湿邪困阻脾脏，湿热夹杂而下注任脉而致带下，或经期及产后，胞脉虚弱，此时湿热之邪侵犯会阴，困阻任脉，耗伤带脉，带脉失约而为带下。由此可见，带下病的主要病因为湿邪侵及，其治疗也因而以清热利湿为主。

《本草正义》曰：苦参，大苦大寒，退热泄降，荡涤湿火，其功效与芩、连、龙胆皆相近，而苦参之苦愈甚，其燥尤烈，故能杀湿热所生之虫，较之芩、连力量益烈。故而中医将其常用于治疗湿热所致的带下症。现代药理研究发现，苦参中的主要成分苦参碱和氧化苦参碱具有抗菌^[10]、抗肿瘤^[11]和调节免疫^[12]等多重功效。苦参凝胶以苦参总碱为药物主要成分，配合卡波姆凝胶剂，阴道给药，可抗菌消炎。而在本临床研究中，结果显示苦参凝胶在治疗宫颈HPV感染患者中与干扰素相比，能更加显著降低HPV病毒载量，提高HPV转阴率，从而提高患者痊愈率，说明苦参凝胶可能在降低病毒复制和提高机体免疫力等抗病毒方面的综合能力比干扰素效果更优。此外，一项针对苦参碱的药敏试验研究^[13]发现，苦参碱对乳酸杆菌抑制作用不强，不会对乳酸杆菌的繁殖造成影响，由此说明苦参碱不会破坏阴道正常菌群的比例。而苦参碱对致病菌，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等抑制及清除效果明显，同时，女性阴道其他微生物，如阿米巴原虫、滴虫等，苦参碱也有部分抑制效果^[14]。这种对微生物调控的特异性可能也解释了苦参凝胶治疗HPV感染试验中出现的高痊愈率现象，即抗病原菌，又避免二重感染。试验中结果显示苦参凝胶联合干扰素用药可显著提高HPV感染患者的痊愈率和有效率，大大降低治疗无效人数，这可能与两者合用协同增强机体免疫有关。在人体免疫系统中，自然杀伤细胞（NK细胞）起到重要作用。它可选择性消灭被感染的靶细胞，同时保护人体正常组织。而使用干扰素可以大大提高NK细胞的生物效能。另一方面，有研究表明，氧化苦参碱可能通过刺激体内IL-2分泌增加这一途径，从而提高NK细胞活性，起到增强免疫的作用^[12]。从本研究结果来看，联合用药可能协调增强NK细胞效能，大大提高机体免疫，从而增加治疗有效率。针对患者HPV分型的研究结果中发现，苦参凝胶对16型和18型HPV作用比干扰素治疗效果更佳，而31型以及其他型HPV的治疗中，相比于干扰素，苦参凝胶无明显优势。由此可见，在治疗高危型HPV16和HPV18而非其他HPV时，相对于西药干扰素，苦参凝胶可能成为更优的治疗方案。但其具体作用机制尚待进一步研究。

综上所述，苦参凝胶作为纯中草药提取物，可有效降低HPV病毒載量，从而增加患者痊愈率的可能性，并且对高危型HPV16和HPV18可能治疗效果更佳。因此在临床上具备一定潜在应用价值及意义，但目前仍缺少相关研究以明确其抗HPV病毒的作用机制，另外，本研究受限于样本量，故而临床的广泛应用还需要进一步深入的研究证据。

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[责任编辑 曹阳阳]