国产冻干水痘减毒活疫苗2剂法安全性及免疫原性研究

张倩+费洁+钟培松+袁红+李智+赵根明

水痘是以发热和全身散发瘙痒性疱疹为主要特征的急性、高传染性疾病，由水痘带状疱疹病毒（varicellazoster virus， VZV）引起的原发性感染，患水痘后病毒潜伏于脊神经后跟神经节等处，潜伏病毒复活导致带状疱疹＼[1＼]。并发症包括肺炎、继发性细菌感染、出血性合并症和脑炎，甚至引起死亡＼[2＼]。

接种疫苗是预防水痘和带状疱疹的有效手段。作为二类疫苗，上海市1999年开始为学龄前儿童接种1剂水痘减毒活疫苗（以下简称“水痘疫苗”）。虽然接种剂数逐年增高，但水痘疫情屡有暴发。暴发疫情中突破病例（接种水痘疫苗42 d后发生的水痘病例）比例越来越高。突破病例由于症状较轻，不易被发现，很容易成为群体中隐蔽的传染源，造成大规模暴发疫情。

本研究旨在通过观察适龄儿童接种2剂国产冻干水痘疫苗后血清抗体滴度的变化，评价水痘疫苗2剂法接种的免疫原性，同时观察国产冻干水痘疫苗2剂次接种后不良反应的发生以评价其安全性。

1对象与方法

本研究冻干水痘减毒活疫苗2剂法的免疫程序已通过上海市疾病预防控制中心伦理委员会审查。本研究2剂次接种程序采用世界卫生组织推荐的12～18月龄接种第1剂，至少间隔4周至3个月后接种第2剂＼[3＼]。

1.1研究对象

2013年4—9月，选择上海市嘉定区嘉定镇、 外冈镇、徐行镇、工业区4个街镇开展水痘疫苗2剂法免疫原性和安全性观察。利用上海市免疫规划信息系统筛选4个街镇1～3岁既往无水痘疫苗接种史，未患过水痘的健康儿童，通过电脑生成随机数字抽取116名儿童，经知情同意，间隔3个月免费接种2剂水痘疫苗。

1.2研究方法

1.2.1疫苗及接种方式上海生物制品研究所生產的水痘疫苗，冻干粉针剂型，规格为0.5 mL/瓶，每次剂量0.5 mL，批号为201205014，有效期至2013年11月28日，皮下注射接种。

1.2.2免疫效果观察116名儿童免费接种2剂水痘疫苗，剂次间隔时间为3个月，免疫前和每剂接种后35～42 d分别采集血液样本进行水痘抗体检测。采用世界卫生组织推荐的膜免疫荧光抗体（FAMA）试验检测水痘抗体，检测标准品由祁健公司生产。抗体≥1∶4为阳性。

免疫效果评价：免疫前抗体<1∶4，免疫后抗体≥1∶4为抗体阳转；免疫前抗体≥1∶4，免疫后抗体呈4倍增长为免疫成功。

1.2.3安全性观察安全性观察的内容为接种疫苗后不良反应的发生情况，采用统一问卷，由经过培训的专业人员完成调查，内容包括接种对象的基本情况，接种水痘疫苗后30 min内不良反应发生情况，专业人员现场记录其安全性观察结果，并在接种后24 h、48 h、72 h、7 d、14 d和30 d分别电话随访与记录。

观察内容包括发热反应、自觉症状和体征（头晕、寒战、虚弱、头痛、出汗、肌痛、皮疹、水肿、紫癜、兴奋/易怒、食欲丧失、呕吐、腹痛、腹泻），注射部位红肿反应，局部的其他反应（触痛、关节肿痛、化脓、坏死、水疱），以及在接种过程中或接种后发生的其他较为严重的反应。

有关反应判断标准参照《预防接种的反应和处理》：① 发热，37.1～37.5℃为弱反应，37.6～38.5℃为中反应，≥38.6℃为强反应；② 注射部位红肿（局部红晕/肿胀平均直径），0.5～2.5 cm为弱反应，2.6～5.0 cm为中反应，≥5.1 cm为强反应＼[4＼]。

1.3统计学分析

使用EpiData 3.1录入数据，利用SPSS 22.0统计分析。水痘抗体滴度经对数转换成近似正态分布后进行统计分析。球形检验后采用重复测量资料的方差分析比较免疫前、1剂免疫后、2剂免疫后抗体滴度。采用χ2检验比较阳性率及免疫成功率。检验水准α=0.05。

2结果

2.1一般情况

共观察116名儿童，其中男性59名，占50.86%，女性57名，占49.14%。本市儿童16名，占13.79%，外地户籍儿童100名，占86.21%。平均月龄为16.76个月（95%可信区间：13.38～20.14个月），最小月龄为12个月，最大月龄为30个月，其中12～18个月93名，占80.17%，19～30个月23名，占19.83%。

2.2安全性观察

安全性观察共发现6例有发热反应，未观察到局部反应，未见与疫苗相关的全身性皮疹及水疱疹等。1剂水痘疫苗接种后发热反应3例，其中接种后7 d出现中、强反应各1例，14 d出现强反应1例；2剂水痘疫苗接种后发热反应3例，分别是7 d、14 d和30 d出现强反应各1例。经随访，均为上呼吸道感染所致，并非疫苗接种反应。

2.3免疫原性分析

2.3.1抗体几何平均滴度免疫前水痘抗体几何平均滴度（GMT）为3.51，1剂水痘疫苗接种后GMT为15.25，是免疫前的4.34倍；2剂水痘疫苗接种后GMT为53.81，为免疫前的15.33倍，是1剂接种后的3.53倍，免疫前、1剂免疫后、2剂免疫后的抗体滴度差异有统计学意义（F=196.19，P<0.001），见表1。

2.3.2抗体阳性率接种1剂水痘疫苗后，水痘抗体的阳性率为87.07%，接种2剂疫苗后，抗体阳性率为100.00%，与免疫前的51.72%相比，差异有统计学意义（χ2= 89.22，P<0.001）。见表2。

2.3.3免疫成功率1剂水痘疫苗免疫成功率为70.39%，2剂水痘疫苗免疫成功率为93.10%，差异有统计学意义（χ2= 24.04，P<0.001）。免疫前水痘抗体阴性者56人（48.28%），阳性者60人（51.72%）， 1剂水痘疫苗免疫成功率分别为96.64%和48.33%，2剂免疫成功率分别是100.00%和86.67%。McNemar χ2检验结果显示，1剂（χ2=29.98，P<0.001）和2剂（χ2= 6.08，P=0.006）免疫接种前不同水痘抗体滴度水平者之间的免疫成功率差异有统计学意义。见表3。

3讨论

水痘在我国有较高的感染率，本次研究现场嘉定区2010—2013年水痘平均发病率为95.16/10万＼[5＼]。目前对VZV感染者主要是对症处理，无特效治疗方法，接种疫苗是最有效和最可靠的预防和控制水痘的手段＼[6＼]。本研究国产冻干水痘减毒活疫苗安全性观察显示1剂和2剂水痘疫苗接种后各发生3例发热反应，未观察到局部反应，总体不良反应发生率较低，与林云等＼[7＼]和刘晔＼[8＼]等报道的上海生物制品所和长春生物制品所生产的水痘减毒活疫苗安全性研究结果类似。说明水痘疫苗1剂免疫和2剂免疫反应轻微。

评价疫苗的有效性是基于疫苗的免疫原性和免疫预防效果，最重要的指标是该疫苗的抗体阳转率、免疫成功率和GMT以及相关疾病的发病率＼[9＼]。本研究结果显示，1剂和2剂免疫后GMT、水痘抗体阳性率、免疫成功率之间的差异均有统计学意义。世界卫生组织推荐，水痘为重要公共卫生负担的国家应考虑将水痘疫苗纳入儿童常规免疫，12～18月龄接种第1剂，同时表明接种1剂可明显降低水痘的发病率和死亡率，但不能预防局部病毒循环和暴发＼[3＼]。LU等＼[10＼]和蔡军芳＼[11＼]等报道显示，即使1剂水痘疫苗覆盖率达到98.3%和100.0%，集体单位儿童仍会发生水痘暴发，说明1剂水痘疫苗高覆盖率仍不足以预防病毒的传播。嘉定区入学入托数据显示，中小学生单剂次水痘疫苗接種率在80%以上，托幼机构水痘疫苗接种率多在90%以上。但水痘聚集性病例在学校仍有发生，且近年来有向托幼机构蔓延的趋势。有疫苗接种史的水痘突破病例数量越来越多，提示单剂次的水痘疫苗并不能起到充分的保护效果。本次观察表明，2剂次的保护效果好于1剂次。与Loopez等＼[12＼]报道的接种1剂疫苗后约86%的人可获得免疫保护，接种2剂免疫保护率可达到99%的结果一致，建议使用2剂接种来提高水痘疫苗对儿童的免疫保护效果。

参考文献

[1]ARVIN A M. Varicellazoster virus＼[J＼].Clin Microbiol Rev，1996，9（3）：361381.

[2]冯子健.传染病控制手册＼[M＼].北京：中国协和医科大学出版社，2008：101.

[3]WORLD HEALTH ORGANIZATION.Varicella and herpes zoster vaccines：WHO position pater＼[J＼].Weekly Epidemiological Record，2014，89（25）：265288.

[4]谢广中，刁连东，王树巧，等.预防接种的反应和处理＼[M＼].上海：上海科学技术出版社，2009：7880.

[5]张倩，费洁， 钟培松.上海市嘉定区2010—2013年水痘流行病学分析＼[J＼].上海预防医学，2014，26（12）：657659.

[6]VAZQUEZ M， LARUSSA P S， GERSHON A A，et al. The effectiveness of the varicella vaccine in clinical practice＼[J＼]. N Engl J Med，2001，344（13）：955960.

[7]林云，王金荣，曹家穗，等.两种国产冻干水痘减毒活疫苗免疫原性及疫苗安全性比较＼[J＼].中华流行病学杂志，2004，25（3）：198.

[8]刘晔，高嵩，赵军，等.冻干水痘减毒活疫苗免疫持久性观察＼[J＼].中国生物制品学杂志，2006，19（4）：420422.

[9]张延龄，张晖.疫苗学＼[M＼].北京：科学出版社，2004：139169.

[10]LU L I， SUO L D， LI J， et al. A varicella outbreak in a school population with high onedose vaccination coverage＼[J＼].Vaccine， 2012，30（34）：50945098.

[11]蔡军芬，罗凤基，李书明，等.高水痘疫苗覆盖率幼儿园中水痘暴发调查＼[J＼].现代预防医学，2010，37（19）：36343636.

[12]LOOPEZ A S， GURIS D， ZIMMERMAN L， et al. One dose of varicella vaccine does not prevent school outbreaks： is it time for a second dose＼[J＼].Pediatrics，2006，117（6）：10701077.

（收稿日期：20160214）