2013—2016年中国部分地区猪伪狂犬病野毒株感染血清学调查

2017-04-06 07:41焦连国王冬梅闫国晖王香玲姬莹莹王贵华赵亚荣
猪业科学 2017年3期
关键词:狂犬病毒株规模化

赵 青,焦连国,王冬梅,闫国晖,王香玲,姬莹莹,王贵华,赵亚荣

(1.北京大北农科技集团股份有限公司动物医学研究中心,北京 100195;2.北京市畜禽生物制品工程技术研究中心,北京 100195)

2013—2016年中国部分地区猪伪狂犬病野毒株感染血清学调查

赵 青1,2,焦连国1,2,王冬梅1,2,闫国晖1,2,王香玲1,2,姬莹莹1,2,王贵华1,2,赵亚荣1,2

(1.北京大北农科技集团股份有限公司动物医学研究中心,北京 100195;2.北京市畜禽生物制品工程技术研究中心,北京 100195)

为了解2013-2016年中国部分地区猪伪狂犬病(PR)野毒感染及其分布情况,采用gE-ELISA方法对采自8个省市742个猪场16 675份血清样品进行了猪伪狂犬病野毒感染的血清学调查。结果表明:742个猪场中有549个PR野毒阳性场,猪场阳性率为73.99%;16 675份血清中有6 298份为阳性血清,血清阳性率为37.77%。在所检测的8个省市中以北京、天津、河北、河南的场阳性率和血清阳性率较高。说明我国部分地区普通存在PRV野毒感染,并呈散发性流行,提示我国规模化猪场的PR防治工作仍需加强。

猪伪狂犬病;gE 基因;gE-ELISA;血清学调查

猪伪狂犬病(pseudorabies)是由伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)引起的猪和其他动物共患的一种急性传染病,以发热、脑脊髓炎等为主要特征[1]。1813年本病在美国首次发生,其临床症状与狂犬病很相似,所以称为伪狂犬病。1902年由匈牙利学者Aladar Aujeszky首次报道本病,因此该病又被称为Aujeszky’s disease(AD)[2]。猪是该病的主要宿主和传染源,该病的临床表现主要以妊娠母猪和哺乳仔猪最为严重:PRV导致妊娠母猪流产、产死胎以及木乃伊胎;仔猪常表现高热、食欲废绝、呼吸困难以及神经症状等[3]。自2011年在我国又暴发后,给我国养猪业造成极大的经济损失。

gE基因是PRV重要的毒力基因之一[4],是至今发现的所有的野毒株都表达的一种糖蛋白,介导着病毒从细胞到细胞之间的扩散,对病毒侵染神经系统也具有重要作用。gE基因也是世界动物卫生组织所规定基因缺失疫苗的缺失基因[5]。因此gE基因缺失可作为标志基因,区别感染动物和接种动物,为剔除阳性的野毒感染动物,根除本病提供良好的方法,而且gE-ELISA具有高度的特异性和灵敏性,适合大范围的血清流行病学调查[6]。为了解中国部分地区猪伪狂犬病的野毒感染情况,现将2013-2016年规模化猪场的PRV野毒抗体监测报告如下。

1 材料与方法

1.1 待检血清

血清样品16 675份采自2013-2016年北京、天津、河北、河南、山东、山西、江苏、黑龙江8个省市742个规模化猪场。

1.2 检测试剂仪器

PRV gE-ELISA抗体检测试剂盒,购自西班牙HIPRA公司;检测仪器为酶标仪(Multiskan MK3),购自美国Thermo公司。

1.3 检测方法

采用阻断ELISA方法来检测猪伪狂犬野毒抗体。

1.4 结果判定

结果判定依据试剂盒说明书,设2孔阴性对照和2孔阳性对照,其中设P=阳性对照OD450,N=阴性对照OD450,阻断率=(阴性对照OD450-样品OD450)/阴性对照OD450,当N-P>0.6,(N-P)/N>60%,试验成立,通过阻断率来判断结果。阻断率>45%为阳性;阻断率<40%为阴性;40%≤阻断率≤45%为可疑。

2 结果

2.1 2013-2016年不同年份部分地区猪场PRV野毒株抗体检测

如表1和图1所示,中国部分地区在2013-2016年检测的742个猪场中,有549个为PRV阳性猪场,猪场的总阳性率为73.99%;2013-2016年共检测16 675份血清,其中6 298份为阳性血清,总的血清阳性率为37.77%。2013年检测172个规模化猪场,阳性猪场为126个,猪场阳性率为73.26%;2013年检测2 877份血清样品,其中1 434份为阳性血清,血清样本阳性率为49.84%;2014年检测158个规模化猪场,阳性猪场为114个,猪场阳性率为72.15%;2014年检测3 091份血清样品,1 261份为阳性血清,血清样本阳性率为40.80%。2015年检测205个规模化猪场,阳性猪场为154个,猪场阳性率为75.12%;2015年检测5 185份血清样品,1 694份为阳性血清,血清样本阳性率为32.67%。2016年检测207个规模化猪场,阳性猪场为155个,猪场阳性率为74.88%;2016年检测5 522份血清样品,1 909份为阳性血清,血清样本阳性率为34.57%。结果表明,2013-2016年期间,猪场的PRV野毒感染率均在70%以上,血清样品阳性率在30%~50%,说明我国规模化猪场普遍存在PRV野毒株感染,猪场的PR防控及净化工作尤其重要。

2.2 2013-2016年部分地区猪场PRV野毒株抗体检测结果

2013-2016年对国内8个省市进行了PRV野毒抗体检测,如表2和图2所示,北京、天津、河北、河南的PRV猪场阳性率均高于平均水平(73.99%),其他省份的PRV猪场阳性率为37.01%~69.01%。北京、天津、河北、河南的PRV血清样本阳性率高于平均水平(37.77%),其他省份的PRV血清样本阳性率为8.57%~41.30%。结果表明,在检测的8个省市中,均存在PRV野毒感染,但是感染的程度有所差异,其中北京、天津、河北、河南的猪场阳性率与血清样本阳性率均高于平均水平,说明这4个省市的猪场PRV野毒感染率较高,PRV呈散发性流行。

3 讨论

目前,猪伪狂犬病在我国大部分省份均有发生,国内大部分猪场感染PRV野毒,是母猪繁殖障碍、断奶前仔猪死亡率高的主要原因之一。尤其是近几年,伴随着我国养猪业规模化的发展,猪伪狂犬病在不少地区时有暴发与流行,严重阻碍了养猪业的可持续发展。本调查研究结果显示:对2013-2016年期间8个省市,742个猪场,16 675份血清样本进行PRV野毒抗体检测,猪场阳性率为73.99%,血清样本阳性率为37.77%,说明我国普遍存在PRV野毒感染。叶晶等[7]对2010-2014年5个省份送检的猪血清进行检测,血清样本阳性率为20.3%;邹敏[8]等对2012-2013年18个省市,393个猪场进行PRV野毒抗体检测,猪场阳性率为22.02%,血清样品阳性率为16.13%;周绪斌[9]等对2007年11个省市的规模化猪场进行了PRV野毒监测,猪场阳性率为63.4%,血清样本阳性率为14.8%。表明近几年我国PR的发生地区迅速扩大,控制及净化PR对各大规模化猪场来说变得尤为重要。

国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)提出猪场疫病净化目标,但是我国还没有大规模全面实施PR根除计划,各大养殖场由于猪只的无序流通、猪群免疫密度与强度低、生物安全不到位、PRV毒力的增强等原因,造成我国猪场PR的再次流行[10]。所以国家主导,政府主管部门监督,猪场具体实施的PR根除计划,已经迫在眉睫。

欧美一些发达国家通过利用gE基因缺失疫苗免疫,并定期实施检测与淘汰,已经将PR成功的净化[11]。我们建议猪场使用优质的gE基因缺失疫苗强化免疫并定期对种猪群采血监测并淘汰阳性猪,注重后备猪的健康选择,逐渐建立阴性猪群,再加以配合相应的生物安全措施,使我国猪伪狂犬病的流行态势得到根本好转[12]。

表1 2013-2016年猪场PRV野毒株抗体检测

图1 2013-2016年猪场PRV野毒株抗体检测

表2 2013-2016年部分地区猪场PRV野毒株抗体检测

图2 2013-2016年部分地区猪场PRV野毒株抗体检测

[1] 杨庆芳,宁官保. 猪伪狂犬病的研究进展 [J]. 畜牧兽医科技信息, 2010(7):15-18.

[2] 殷震,刘景华.动物病毒学[M].2 版.北京:科学出版社.1997.

[3] 彭金美,安同庆,赵鸿远,等.猪伪狂犬病病毒新流行株的分离鉴定及抗原差异性分析[J]. 中国预防兽医学报,2013,35(1): 1-4.

[4] TIRABASSI R S, ENQUIST L W.Role of envelope protein gE endocytosis in the Pseudorabies virus life cycle [J]. J.Virol,1988,72(6):4571-4579.

[5] 阳爱国,郭万柱,徐志文,等. 伪狂犬病病毒主要毒力基因缺失后的免疫原性研究[J].西南民族大学学报:自然科学版,2008,34(5) : 943 -947.

[6] BABIC N, KLUPP B, BRACK A, et al. Deletion of glycoprotein gE reduces the propagation of pseudorabies virus in the nervous system of mice after intranasal inoculation [J]. Virology, 1996,219(1): 279-284.

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2017-02-24)

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