复方通光散对实热型胃溃疡大鼠溃疡指数面积抑制百分率的影响

2017-04-12 02:38邢德伦崔海明
实用中医药杂志 2017年2期
关键词:百分率胃溃疡复方

邢德伦,张 林,崔海明

(1.重庆市垫江县中医院肝病科,重庆 垫江 408300;2.河北省中医院,河北 石家庄 050011;3.重庆市石柱县中医院,重庆 石柱 409100)

复方通光散对实热型胃溃疡大鼠溃疡指数面积抑制百分率的影响

邢德伦1,张 林2,崔海明3

(1.重庆市垫江县中医院肝病科,重庆 垫江 408300;2.河北省中医院,河北 石家庄 050011;3.重庆市石柱县中医院,重庆 石柱 409100)

目的:研究复方通光散对实热型胃溃疡大鼠溃疡指数面积抑制百分率的影响。方法:取wistar大鼠60只,随机分为6组,即空白组,模型组,丽珠得乐组,复方通光散低、中、高剂量组各10只。除空白组外,其余各组均建立大鼠实热型胃溃疡模型。在造模成功的次日,给予各组大鼠灌服相应药物,早晚各1次,给药时间共计16天,于实验的第26天将大鼠脱颈处死,进行胃黏膜取材,利用游标卡尺测量溃疡指数及溃疡面积。结果:溃疡指数、溃疡面积丽珠得乐、复方通光散中、高剂量组较模型组小(P<0.05)。溃疡指数、溃疡面积低剂量组与丽珠得乐组比较差异有统计学意义(P<0.05)。溃疡抑制百分率丽珠得乐、复方通光散中、高剂量组较低剂量组高(P<0.05)。结论:复方通光散高、中剂量对实验性大鼠胃溃疡实热型有治疗效果,且高、中剂量效果优于低剂量,具有一定的量效关系。

复方通光散;胃溃疡;实热型;溃疡指数;溃疡面积;溃疡抑制百分率

胃溃疡是以饥饿不适、饱胀嗳气、泛酸、或餐后定时慢性中上腹疼痛,严重时可伴有黑便或呕血为典型症状的慢性胃肠道疾病。近年来临床报道用中药、治疗胃溃疡取得确切的疗效。本课题通过动物实验验证复方通光散治疗实热型胃溃疡的疗效,报道如下。

1 实验材料

1.1 实验动物

wistar大鼠,雌雄各50%,体质量(200±20)g,清洁级2级,由贵阳医学院实验动物中心提供。大鼠置于室温为20℃~24℃,湿度为50%左右[1]的普通级环境中饲养。实验期间各组大鼠自由饲食,饮用自来水。

1.2 主要药品及试剂

复方通光散。以通光散为主药,辅以朱砂莲和蒲公英,按6∶5∶2比例组成。三味药材均由贵阳中医学院方药教研室汪毅教授自黔东南雷山采集提供,经鉴定为正品后入药。按照人和大鼠每kg体质量剂量折算系数折算[2],将其水煎液浓缩为1g/mL,置于4℃冰箱内保存。

丽珠得乐枸橼酸铋钾胶囊。丽珠集团丽珠制药厂生产,国药准字H10920098,临用前用生理盐水稀释。

干辣椒粉。重庆市沙坪坝区雯棋食品厂生产,执行标准QCWQ3-2007号,临用时打开即可。

无水乙醇。分析纯,重庆川东化工集团有限公司化学试剂厂生产,批准文号:国药准字H20070110号,临用前可按照所需浓度进行配比。

冰醋酸。重庆川江化学试剂厂生产,国药准字H20070429号,临用前将其配成20%的冰醋酸。

1.3 主要仪器及设备

主要实验器材及手术器械。托盘天平、量筒、烧杯、12号灌胃针、一次性注射器、手术镊、眼科镊、手术剪、眼科剪、手术刀、止血钳、持针器、缝合针、缝合线。以上均由贵阳中医学院中医基础实验室提供。

主要实验设备。JJ200型精密电子天平(常熟双杰测试仪器厂生产),Motic SMZ-168-TL体式显微镜 (苏州新磊三维仪器有限公司),Olympus AH-2型双目光学显微镜(日本Olympus公司生产),手术显微镜(常州三能光学设备有限公司),游标卡尺(广州红星仪器有限公司)。

2 实验方法

2.1 实热型胃溃疡大鼠模型的建立

依照文献[3-4]将各组wistar大鼠用2%的戊巴比妥纳2mL/kg腹腔麻醉后,以仰卧位固定于手术台上,剪掉腹壁被毛,按无菌操作,在剑突下做2.0~2.5cm的腹部正中切口,用弯镊在肝脏下方将十二指肠轻轻勾出,并将腺胃部轻轻提起,在胃的腹侧面,胃体部与幽门窦交界处,用1mL注射器从浆膜面进针0.4~0.5mm,将20%醋酸0.05mL注入黏膜下,形成丘疹,而空白对照组则按同样的方法,将生理盐水0.05mL注入黏膜下,将胃轻轻送回,关腹,可用80万U青霉素钠涂于伤口以防感染。将手术造模后的wistar大鼠置于干燥的鼠笼中,并给予MTC微波手术治疗仪照射,予以抗炎、保暖。溃疡造模后,次日施加热因刺激,空白对照组给予2mL/100g灌饲生理盐水,其他各组均给予等量的辣椒汁混合液(干辣椒粉:50%乙醇=1∶10)每日1次,共计6天。

2.2 动物分组及处理方法

选用wistar大鼠60只,雌雄各50%,常规饲养1周后,随机抽取10只作为空白组;其余50只大鼠进行造模,造模结束时大鼠死亡9只,随机抽取5只(4只模型组大鼠和1只空白组大鼠),3天后取胃窦部组织做病理切片,结果显示已形成胃溃疡。随后将剩余37只大鼠随机分为5组,即模型组7只、丽珠得乐组8只、复方通光散低剂量组7只、复方通光散中剂量组8只、复方通光散高剂量组7只。在造模成功的次日给予各组大鼠灌服相应药物,早晚各1次。空白组和模型组每次灌服生理盐水各2mL,丽珠得乐组给药剂量0.07g/kg,复方通光散低剂量组给药剂量1.93g/kg,复方通光散中剂量组给药剂量3.85g/kg,复方通光散高剂量组给药剂量7.70g/kg。各给药组均用生理盐水稀释至2mL。给药时间共计16天,于实验的第26天将大鼠脱颈处死。

2.3 观测指标及检测方法

大鼠溃疡指数、溃疡面积、溃疡抑制百分率的测定。将大鼠脱颈处死后,剖腹取胃,结扎幽门、贲门后,胃内注入10%的甲醛溶液8mL,取出游离胃,放入10%的甲醛溶液中固定10min,沿胃大弯剪开胃,用生理盐水冲洗胃内容物,然后将其平铺于玻璃板上,在解剖显微镜下用游标卡尺测量出通过溃疡中心的最大纵径和最大横径[5]。依文献[5]确定溃疡指数、溃疡面积和溃疡抑制百分率。

溃疡指数:通过溃疡中心的最大纵径和通过溃疡中心的最大横径之和。

溃疡面积:S=π×(d1/2)×(d2/2)公式中S为溃疡面积,π为圆周率(取3.14),d1为通过溃疡中心的最大纵径,d2为通过溃疡中心的最大纵横径。

应用SPSS12.0分析软件将所有数据进行统计分析,各项指标结果均采用(±s)表示,组间比较采用one way-ANOVA进行单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。

3 实验结果

复方通光散对各组大鼠溃疡指数、溃疡抑制百分率的影响见表1。

表1 各组大鼠溃疡指数及溃疡抑制百分率比较 (±s)

注:与模型组比较,**P<0.01;与丽珠得乐组比较,△△P<0.01。

(mm) 溃疡抑制百分率(%)空白组 92mL生理盐水 - -模型组 7 2mL生理盐水 17.41±3.67 -丽珠得乐组 8 0.07 8.45±1.63**51.5通光散低剂量组7 1.93 16.54±2.75△△5.0通光散中剂量组8 3.85 11.05±1.51**36.5通光散高剂量组7 7.70 9.14±3.14**47.5组别 n给药剂量(g/kg) 溃疡指数

各组大鼠溃疡面积比较见表2。

表2 各组大鼠溃疡面积比较 (±s)

表2 各组大鼠溃疡面积比较 (±s)

注:与模型组比较,**P<0.01;与丽珠得乐组比较,△△P<0.01。

组别 n 给药剂量(g/kg) 溃疡面积(mm2)空白组 9 2mL生理盐水模型组 7 2mL生理盐水 60.67±25.76丽珠得乐组 8 0.07 14.37±5.82**通光散低剂量组 7 1.93 54.55±17.83△△通光散中剂量组 8 3.85 23.92±6.77**通光散高剂量组 7 7.70 17.91±12.79**

4 讨 论

通光散是黔东南雷山等地的苗族验方,由通光散、朱砂莲、蒲公英组成,针对实热型胃溃疡病机,适证加减,临床有较好的疗效。复方通光散中的通光散具有清热解毒,软坚散结止痛之功效,为主药;朱砂莲既能清热解毒,理气散瘀,又能助通光散镇痛;蒲公英具有清热解毒,消痈散结之功效,与通光散和朱砂莲配伍可加强凉血散瘀止痛之作用。诸药合用,共奏清热解毒、理气散结、镇痛止血之功效。

实验结果显示,复合因素诱发大鼠实热型胃溃疡后,PGE2的含量显著降低,与空白组比较有极显著差异(P<0.01),说明模型组大鼠溃疡处于形成过程中,其胃黏膜分泌细胞保护性激素功能受损。复方通光散灌胃治疗后,其含量明显升高,以丽珠得乐及复方通光散中、高剂量组最为明显,与模型组比较有极显著差异(P <0.01),表明复方通光散中、高剂量可显著促进实热型胃溃疡大鼠胃黏膜上皮细胞合成和分泌PGE2,从而增强胃黏膜的防御功能。因此,复方通光散对实验性大鼠实热型胃溃疡具有较好的治疗效果。

综上所述,复方通光散高、中剂量组对实验性大鼠实热型胃溃疡有确切的疗效,且高、中剂量组均优于低剂量组,具有一定的量效关系。且中、高剂量组可显著提高大鼠血浆及胃窦部组织中PGE2的含量,表明该药可促进胃黏膜组织的表面黏液细胞合成、分泌、释放PGE2,这可能是该药抗实验性实热型胃溃疡的主要机制之一。

[1] 邹移海.实验动物学[M].北京:科学出版社,2004:46-48.

[2] 苗明三.实验动物和动物实验技术[M].北京:中国中医药出版社,1997:144-145.

[3] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,2006:79-96,430-445.

[4] 黎敬波.胃溃疡胃实寒、实热症模型大鼠经穴辐射热、pH值、氧分压的检测研究[J].湖南中医学院学报,1998,18(3):56.

[5] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,1993:462-463.

Objective:To study the effect of compound Tongguang Powder in the treatment of gastric ulcer rats of excessive heat type. Method:60 Wistar rats were randomly divided into six groups:control group,model group,lizhudele group,low dose group,medium group and high dose group,10 rats in each group. Except the blank group,the other groups were all established rat models of gastric ulcer of excessive heat type. In the modeling,the rats were given orally with corresponding drugs,sooner or later each 1 times,delivery time of a total of 16 days. On the twenty-sixth day of the experiment,the rats were sacrificed and the gastric mucosa were harvested, the vernier caliper used to measure the ulcer index and ulcer area. Result:Compared with the ulcer index and ulcer area of the model group,that of lizhudele group and compound Tongguang Powder in middle dose group and high dose group were significantly reduced. There was a significant difference (P<0.05). There was significant difference in the ulcer index and ulcer area between the low dose group and lizhudele group(P<0.05).Compared with the percentage of ulcer inhibition of the low dose group,that of lizhudele group, middle dose group and high dose group significantly increased(P<0.05). Conclusion:The high dose group and middle dose group have definite therapeutic effect on experimental gastric ulcer in rats and the effect of the high dose group and middle dose group is superior to that of the low dose group,which has a certain dose effect relationship.

Compound Tong San Powder;Gastric ulcer;Excessive heat type;Ulcer index;Ulcer area;Percentage of ulcer inhibition

R256.337.31

B

1004-2814(2017)02-0114-02

2016-09-18

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