固相萃取-高效液相色谱法测定食用油脂中的苯并[a]芘

□ 孟维伟 陈惠琴 赵金利 钟玉心 蔡伟谊 广州市食品检验所

固相萃取-高效液相色谱法测定食用油脂中的苯并[a]芘

□ 孟维伟 陈惠琴 赵金利 钟玉心 蔡伟谊 广州市食品检验所

采用Ploy-sery MIP-BAP固相萃取小柱富集苯并[a]芘，应用高效液相色谱梯度洗脱法，以C18为色谱柱，乙腈为流动相，采用荧光法测定六种植物油中苯并[a]芘的含量。结果表明，苯并[a]芘在1.0～30 ng/mL色谱峰面积呈现良好的线性关系。用此法测定植物油中苯并[a]芘的加标含量，回收率为90.1～95.2%。

高效液相色谱法；荧光检测；固相萃取；苯并[a]芘

苯并[a] 是多环芳香烃类化合物，在环境中普遍存在，有强致癌作用。植物油中含有一定量的苯并[a] 。目前，食用油脂中苯并[a] 的分析方法主要有纸（板）色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法和气相色谱-质谱联用法。随着分离分析技术的发展，出现商品化的固相萃取柱子，固相萃取与液相色谱检测技术应用于油脂中苯并 的检测。与传统方法相比，固相萃取可以提高重复性、节约溶剂消耗，操作比较繁琐。因此，寻求并研究快速、准确检测食用油中苯并[a] 的技术具有十分重要的意义[1]。

本文采用固相萃取-高效液相色谱法建立食用油中苯并 的测定方法，利用外标法定量，并且与国标方法比较。结果显示：该方法灵敏、快速，适合于食用油中苯并［a］ 检测。

1 实验材料和方法

1.1 实验材料

苯并［a］ 标准品（纯度98%，DR公司）；正己烷AR；二氯甲烷AR；乙腈AR；Ploy-sery MIP-BAP固相萃取小柱（安谱公司）；有机系滤膜0.22 μm（安谱公司）；去离子水。

1.2 实验仪器

安捷伦1260高效液相色谱配有荧光检测器，固相萃取装置，混合振荡器，氮吹仪。

1.3 分析方法

1.3.1 配制标准溶液

用乙腈配制0.1 mg/mL的苯并［a］ （一级单标储备液，储存于棕色玻璃瓶中，于-20 ℃下保存。

1.3.2 样品前处理

称取0.5 g食用油至15 mL离心管中，加入3 mL正己烷，在涡旋混合振荡溶解10 s。SPE活化：依次用5 mL二氯甲烷，5 mL正己烷活化Ploy-sery MIP-BAP固相萃取小柱。将样品上样到在小柱上，然后再用2 mL正己烷润洗离心管，再将润洗液上样到小柱上，用10 mL正己烷淋洗小柱。用5 mL二氯甲烷洗脱，收集到氮吹管中。将收集液在40 ℃下氮吹干，用1 mL乙腈定容，涡旋30 s，过膜至上机瓶中，待上机。

1.3.3 色谱条件

安捷伦C18色谱柱250 mm×4.6 mm，内径5.0 μm；流动相为乙腈∶水=90∶10；流速1.0 mL/min；柱温度35 ℃；进样量10 μL；激发波长384 nm，发射波长406 nm。

1.3.4 标准曲线绘制

配制标准曲线的浓度为1.0、5.0、10、20、30 ng/mL。按照高效液相色谱条件1.3.3分析，以标准溶液浓度为横坐标，标准溶液峰面积为纵坐标绘制标准曲线Y=1.575 54X+0.149 85，R值0.999 87。

2 结果与讨论

2.1 方法检测性能

本方法采用安谱公司生产专门用于苯并[a] 检测的Ploy-sery MIPBAP固相萃取柱，在去除杂质能力方面有显著效果。实验室现有前处理谱图（食用油）见图1，安谱SPE小柱净化后色谱图（食用油）见图2。

对比以上两幅图，可以明显看出样品经过SPE小柱的净化之后，色谱峰更加漂亮，同时去除食用油中杂质的干扰，确认目标物更加容易。

2.2 方法应用

为考察方法的实用性,按照上述实验方法及选择的条件，分析不同植物油中苯并[a] 含量，结果列于表1，通过将标准苯并[a] 溶液加入试样回收实验，结果见表1。

3 结论

采用安谱公司生产的Ploy-sery MIP-BAP固相萃取柱，在检测食用油脂中苯并[a] 含量方面，达到去除大量杂质目的，并与国标法GB5009.27—2016比较，前处理快速简便，回收率在90.1～95.2%。结果显示：该方法灵敏、快速，适合于食用油中苯 并［a］ 检测。

图1 实验室现有前处理谱图（食用油）

图2 安谱SPE小柱净化后色谱图（食用油）

表1 不同样品分析结果表

[1]仲岳桐.高效液相色谱法测定植物油中特丁基对苯二酚[J].中国食品卫生杂志,1997(zs):75.

基于石墨烯磁性材料-TOF质谱方法的面制品中高分子非法添加物检验技术研究（编号：2016A030313564）。项目类别：广东省自然科学基金-自由申请。