水产制品中敌敌畏、敌百虫超高效液相色谱-串联质谱法前处理过程的优化

□ 付丽莎 大连市食品检验所

水产制品中敌敌畏、敌百虫超高效液相色谱-串联质谱法前处理过程的优化

□ 付丽莎 大连市食品检验所

优化超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS-MS）同时测定水产制品中敌敌畏和敌百虫的测定方法，分别在提高工作效率、节省实验经费、减少试剂毒性等方面较标准方法都有很大程度的改善。

水产制品；敌敌畏；敌百虫；超高效液相色谱-串联质谱

敌敌畏为广谱性杀虫、杀螨剂，具有触杀、胃毒和熏蒸作用。人误服了会出现头晕、头痛、恶心呕吐、肌肉跳动[1-2]。敌百虫具有胃毒作用，能抑制害虫神经系统中胆碱酯酶的活动而致死[3]。有些市面上的小作坊用不明来历的粗盐制作鱼干，晒鱼干期间为了防止苍蝇叮咬、滋生小虫，还在鱼干上喷洒敌敌畏、敌百虫等农药，误食鱼干后会对人体造成一定的伤害。

1 实验材料

1.1 仪器与试剂

敌敌畏：购自农业部环境保护科研监测所；敌百虫：购自农业部环境保护科研监测所。

高速冷冻离心机（HITACHI公司）；旋转蒸发仪（RE52AA，上海亚荣生化仪器厂）；高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪（LC1290-6490，美国Agilent公司）。

1.2 色谱条件

色谱柱Agilent poroshell 120 EC-C18 2.7 μm，4.6 mm×50 mm；流动相：A—0.1%（体积分数）甲酸水溶液；B—0.1%（体积分数）甲酸甲醇溶液；件—0～7 min，梯度；流速—0.3 mL/ min；B；柱温—40 ℃。

1.3 质谱条件

离子源采用电喷雾离子源（ESI+）；分析物在正离子扫描下以多反应监测模式（MRM）分析；质谱参数为：辅助气压（N2）：14 L/min；雾化气压力：25 psi；气化温度：300 ℃；电喷雾电压3 000 V（+/-）。

2 实验方法与步骤

准确称取试样5 g于25 mL离心管中，加入5 g无水硫酸钠混匀，再加入15 mL乙腈均质2 min，然后离心2 500 r/min离心3 min，将离心后的上清液转移至100 mL茄形蒸馏瓶中，再向离心管中加入15 mL乙腈重复均质一次，离心合并上清液。于40 ℃旋转蒸干，加1 mL乙腈溶解残渣，过有机膜，上机。

3 结果与讨论

3.1 方法优化前后比较

提高工作效率。本方法与标准方法比较在工作效率提升等方面有所改进。采用优化后的前处理方法，加快实验进度，大幅提高工作效率。

3.2 标准方法与改进方法谱图

分别添加敌百虫、敌敌畏待测农药标准溶液到样品里，标准方法采用二氯甲烷作为提取剂的前处理方法，上机溶液质谱谱图，在敌敌畏出峰之前有一个较大杂质峰如图1、图2所示。

图1 敌百虫谱图

图2 敌敌畏谱图

分别添加与标准方法相同浓度的敌百虫、敌敌畏待测农药标准溶液，改进的方法选用乙腈作为提取剂的前处理方法，上机溶液的质谱谱图，如图3、图4所示。

经试验得乙腈和二氯甲烷提取效率较高，但二氯甲烷提取的共提物较多，杂质干扰大，由图2可以看出。因此，实验选择乙腈作为提取溶剂。

图3 敌百虫谱图

图4 敌敌畏谱图

4 结论

采用优化的方法测定水产品中的敌敌畏、敌百虫含量，降低了检测成本、提高工作效率[4]。该方法的重现性和稳定性好，与标准方法相比，测定结果无明显差异，适合于水产品中的敌敌畏、敌百虫含量的检测，具有一定的应用和推广价值。

[1]王海燕，夏勇．超高效液相色谱-串联质谱同时测定水中的敌敌畏和敌百虫[J]．中国环境监测，2014，30(6)：154-158．

[2]王 ，梁颖，沈燕，等．液相色谱-串联质谱法监测黄瓜中5种有机磷农药残留[J]．南京农业大学学报，2012，35(1)：45-50．

[3]Arao T， Fuke C， Takaesu H， et al．A case of fatal trichlorfon and methidathion poisoning[J]．Legal Medicine，2002，4(3)：182-186．

[4]黄冬梅，蔡友琼，于慧娟，等．液相色谱-串联质谱法测定南美白对虾中敌百虫、敌敌畏残留量[J]．中国渔业质量与标准，2012，2(3)：51-54．