乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测及其意义

李 莎

（河南省济源市中医院检验科，河南 济源 459000）

乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测及其意义

李 莎

（河南省济源市中医院检验科，河南 济源 459000）

目的探究乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测的结果及其意义。方法 选取我院2016年1月～2017年1月来我科检查的肝病变患者1500例，对其进行乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测，同时针对100例健康者血液样本实施相同检查，观察其病毒标记物情况并进行比较分析。结果 本次入选者均顺利实施检验，大三阳患者的阳性率明显较高，同时病毒拷贝数较高，健康者相关指标均明显较低，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测的特异性和灵敏性较高，能够对患者疾病做出准确的判断和分析，因此可以根据患者的乙肝病毒复制状态对其实施治疗，发挥临床检测的价值。

乙肝病毒DNA；荧光定量PCR检测；肝病变

肝炎是临床常见的传染性疾病，因此对于肝炎的相关检测也备受临床关注，本次我们积极针对乙肝病毒DNA的荧光定量PCR检测情况进行分析，目的在于总结临床经验，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2016年1月～2017年1月来我科检查的肝病变患者1500例，另外纳入100例健康者血液样本，均对其实施乙肝病毒DNA的荧光定量PCR检测；研究开始前我们均对相关科室和工作人员说明了研究概况，其均表示已经知晓本次研究概况且同意支持本次研究。

1.2 方法

针对受检者均进行乙肝病毒DNA的荧光定量PCR检测，检测所用设备为达安基因DA7600设备；首先收集100 uL血清，对其中的HBV-DNA进行提取，使用PCR的反应液加入到HBV模板中，然后将其混匀并置于毛细管中；此后设置阴性、空白管、阳性对照。各个反应管均放入Roche荧光定量检测仪实施PCR扩增，在50摄氏度的条件下激活其UNG，然后在93摄氏度下预变性2 min，同时在93摄氏度5sec，在60摄氏度35sec，一共40个循环[1]。同时应注意模板的工作温度范围应该控制在30～99摄氏度，电源电压控制在220±22 V。此后根据标准曲线，使用计算机对待测样本中的HBV-DNA含量进行测定，并针对扩增产物实施琼脂凝胶电泳，和阳性模板进行对照，如果其特异性条带的位置和阳性模板相同则为阳性，观察实验结果。

1.3 观察指标

观察检测情况，同时按照乙肝患者的病情将其分为小三阳（HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+），大三阳（HBsHg+、HBeAg+、HBcAb+），HBsAb单独阳性组，HBsAg单独阳性组。然后按照类别对其阳性率进行统计，并对比组间的病毒拷贝数（Log值）。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件对数据进行分析，计数资料用例数（n）、百分数（%）表示，采用x2检验；计量资料用“x± s表示，采用t检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

本次入选者均顺利实施检验，大三阳患者的阳性率明显较高，同时病毒拷贝数较高，健康者相关指标均明显较低，其详细情况见下表1。

表1 乙肝病毒检测的详细情况（±s）

表1 乙肝病毒检测的详细情况（±s）

病毒拷贝数（Log值）大三阳 900 900 100.0 7.67±0.47小三阳 300 140 46.7 7.31±0.24 HBsAg 200 115 57.5 5.74±1.21 HBsAb 100 33 33.0 4.57±0.29健康者 100 5 5.0 3.44±0.14组别 例数 HBV-DNA阳性数HBV-DNA阳性率

3 讨 论

肝炎的发生主要是有肝炎并对感染引起，病发发生对患者的健康会产生严重影响，同时未经及时治疗的情况下，极有可能使得肝炎演变为肝硬化或肝癌，因此我们应该早期对患者做出诊断并给予治疗[2]。

目前临床多数研究认为，肝炎疾病的传染性尚不能完全明显，但是病情进展必然和患者的病毒复制存在密切关系，此时有效的检测方法就成为临床关注的重点所在[3]。荧光定量PCR检测是近年来临床中逐渐应用的一种检测方法，荧光技术在检测中的联合使用，使得PCR过程中的荧光信号能够被准确的反应，从而通过其变化和检测获得较高的灵敏度和准确性[4]。本次我们通过对相关的受检者样本进行分析发现，大三阳患者的阳性率明显较高，同时病毒拷贝数较高，健康者相关指标均明显较低，差异有统计学意义（P＜0.05）。同时说明了乙肝病毒DNA对于患者病情程度的反应价值，临床可及时根据患者的检测结果对其实施干预和治疗。

综上所诉，乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测的特异性和灵敏性较高，能够对患者疾病做出准确的判断和分析，其临床实施的意义则在于，可以根据患者的乙肝病毒复制状态对其实施治疗，最终帮助患者改善其预后。

[1]翟秀英.荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床意义[J].临床合理用药杂志,2014,02(8):108-109.

[2]李秀义,高冬梅,潘继文,等.荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床价值[J].蚌埠医学院学报,2014,06(12):804-806.

[3]颜 敏.血清HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙乙肝病毒标志物模式的相关因素探讨[J].中外医疗,2014,26(10):193-194.

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ISSN.2095-8242.2017.053.10427.01

本文编辑：赵小龙