联合检测肾病综合征患儿尿β2-MG、α1-MG及NAG的临床意义

邓鹏飞 陈少华 谢生勇 卢 涛 孙明珠

1.福建省三明市第二医院儿科，福建三明 366000；2.福建省三明市第二医院检验科，福建三明 366000

目前临床上对肾小管早期损伤的检测主要有：尿β2-微球蛋白（β2-MG）、α1-微球蛋白（α1-MG）和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）。本文对肾病综合征（激素敏感型，SSNS）患儿尿β2-MG、α1-MG和NAG进行联合检测，以探寻其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择自2014年1月～2017年6月于我院儿科首次诊断并接受正规住院治疗的NS（肾病综合征）患儿，共30例，男23例，女7例，平均发病年龄（10.6±3.4）岁，平均身高（132.0±4.6）cm，平均体重（30.25±5.02）kg，平均病程（3.2±0.3）个月。30例患儿和2009年中华医学会儿科学的分会肾脏病学组所提出的《儿童常见肾脏疾病诊治循证指南(一)》中肾病综合征相关诊断标准符合[1]，（1）患儿存在大量的蛋白尿症状：患儿24h的尿蛋白定量≥50mg/kg，或是随机或是晨尿中的尿蛋白/肌酐（Cr）≥2.0mg/mg；（2）患儿存在低蛋白血症情况：患儿的血浆白蛋白含量≤25g/L；（3）患儿存在高脂血症现象：患儿血浆中的胆固醇含量≥5.7mmol/L；（4）患儿存在一定程度的水肿症状。以上指标（1）及指标（2）是临床确诊的必要条件。并将由于继发性的肾小球相关病变等引发的肾病综合征排除。所有病例确诊后均给予足量糖皮质激素（泼尼松）口服治疗，检测尿蛋白连续2次转阴后至少予原剂量糖皮质激素治疗2周，所有病例均于治疗4周内尿蛋白转阴（激素敏感型），同时给予利尿、抗凝等基础治疗。

对照组为于2014年1月～2017年6月来我院门诊进行健康体检的儿童，共31例，男24例，女7例，平均发病年龄（10.8±3.2）岁，平均身高（132.2±4.7）cm，平均体重（30.23±5.03）kg，平均病程（3.0±0.2）个月，两组患儿的一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 尿β2-MG、α1-MG及NAG的检测 对对照组受检者就诊当天及SSNS组肾病综合征患儿在治疗之前收集20mL清洁中段晨尿，并置入干燥的试管中，进行混匀和离心处理之后，将5mL上清液用于β2-MG、α1-MG及NAG的检测。尿β2-MG采用放射免疫分析法开展测定，试剂由北京北方生物技术研究有限公司提供，结果用μg/mL表示。尿α1-MG采取免疫比浊法开展测定，检测试剂购于美国贝克曼公司，尿α1-MG的单位是mg/dL。尿NAG采用分光光度计比色法开展测定，检测试剂购于北京九强生物技术股份有限公司，尿α1-MG的单位是U/L。并依据试剂说明书相关步骤开展检测，并开展质控。

1.2.2 肾功能相关指标测定 收集所有61例受试者治疗前清晨空腹血3mL，混匀离心后，采用美国贝克曼AU5800全自动生化仪进行尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、胱抑素C（CysC）检测，BUN 采用尿素酶-谷氨酸脱氢酶法进行检测，结果用mmol/L表示。Cr采用肌氨酸氧化酶法进行检测，结果用μmol/L表示。CysC采用免疫比浊法进行检测，结果用mg/L描述。试剂购自美国贝克曼公司。依据试剂说明书相关步骤开展检测，均同时进行质控。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 两组患者尿β2-MG、α1-MG、NAG的比较

表1显示SSNS组患者尿β2-MG、α1-MG和NAG与对照组受检者相对比更高，差异有统计学意义（P ＜0.05）。

2.2 SSNS组与对照组BUN、Cr、CysC的比较

表2显示SSNS组患者BUN、Cr及CysC与对照组受检者相对比更高，差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。

3 讨论

一般把BUN、Cr作为肾功能的常规检测项目，但BUN、Cr受性别、饮食、肌肉量等因素的影响，同时肾脏有强大的储备和代偿能力，只有在严重肾小球损害(肾小球滤过率降低50%以下)时，BUN、Cr浓度才明显升高[2]。CysC是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，而且，CysC于患者的近曲小管几乎全部被重吸收并降解，不返回血液，其血中浓度由肾小球滤过率（GFR）决定，不受任何外来因素影响，是反映GFR变化的理想内源性标志物，对比BUN、Cr更有优势[2]。郭慧娟[3]的研究表明CysC作为评价慢性肾脏病（CKD）患者GFR的指标，在1、2期CKD中比Cr更有优势。本研究显示SSNS组CysC与对照组比较无统计学差异，提示CysC对儿童SSNS的疗效观察无临床意义，与张旭光[4]的研究认为CysC是NS疗效观察敏感的指标，但对于微小病变型NS意义不大一致；儿童PNS76%的病理为微小病变型，因此推测监测胱抑素C的变化对儿童PNS的疗效及预后判断临床意义有限。

表2 SSNS组患者与对照组受检者的BUN、Cr、CysC水平比较（ ± s）

组别 n BUN（mmol/L）CysC（mg/L）SSNS组（A组） 30 4.6±2.3 38.2±14.6 0.8±0.5对照组(B组) 31 3.9±1.1 36.6±12.6 0.6±0.4 t 1.449 0.474 1.727 P 0.155 0.637 0.089 Cr（umol/L）

β2-MG是由体内各种有核细胞产生小分子蛋白，α1-MG同样是小分子蛋白，主要由肝脏产生，二者均能自由通过肾小球，在肾小管中几乎全部被上皮细胞摄取、分解，故尿中生理浓度极低，当肾小管发生病变时，二者尿中浓度均升高，因此尿β2-MG和α1-MG浓度是诊断和评价肾小管损伤或恢复的敏感指标，二者在原发性肾脏疾病中具有重要的临床诊断意义[5-7]。β2-MG在尿液pH值＜5.5时易被尿中酸性蛋白酶降解，同时较易受肾外因素的影响，相反α1-MG在酸性尿中较稳定，且尿中浓度远高于β2-MG，因此尿α1-MG在反映早期肾小管损伤上比尿β2-MG更特异、灵敏。陈燕等[8]的研究同样显示尿α1-MG检测对早期肾损伤的敏感性高于尿β2-MG。NAG是分布于各种细胞溶酶体中的大分子蛋白，肾小管上皮细胞中含量丰富，不能由肾小球滤过，因此肾小管受损时尿NA G显著升高；多个研究显示尿NAG是反应肾小管损伤敏感的生物学标志物[9-10]，同时也有报道认为尿NAG升高与PNS活动有关[11]。总之尿β2-MG、α1-MG和NAG均是反映肾小管损伤的重要指标，肾小管损伤是肾间质病变的重要依据，因此尿β2-MG、α1-MG和NAG是评估肾间质病变重要指标。

Kalansooriya等[12-13]的研究显示PNS患者尿β2-MG、α1-MG、NAG浓度与正常对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），同时刘瑜的研究还认为三者对于PNS的诊断具有较高的敏感度和特异度。但对于SSNS是否存在肾小管损伤的情况，相关资料报告具有差异性，陶玉[14]相关实验资料中呈现，SSNS组患者于接受激素治疗之前和之后的尿β2-MG水平和正常对照组受检者相比较，差异无统计学意义（P＞0.05），而黄惠梅等[15]相关实验数据展示，SSNS组患者接受激素治疗之前的α1-MG、β2-MG对比正常对照组受检者，差异有统计学意义（P＜0.05）。而本文实验研究结果展示，SSNS组患者接受激素治疗之前的尿α1-MG、β2-MG、NAG和对照组受检者数据比较，差异有统计学意义（P＜0.05），提示SSNS患儿存在肾小管功能损伤，与黄惠梅等[15]的研究结果一致。提示早期检测肾病综合征患儿的尿β2-MG、α1-MG和NAG不仅对疾病诊断、估计病情有一定价值，同时对评估肾损伤程度有意义，且明显优于肾功能指标。

存在肾小管功能损伤的PNS患儿对于激素治疗的反应是良好的，且肾病综合征（激素敏感型，SSNS）患儿的预后也比较好，和以上报告结果具有差异性，可能是和病理类型具有差异性存在相关关系，所以对PNS患儿来说，肾小管的损伤程度是不能完全看做判断PNS患儿预后情况的指标，不过还需要进行更加深入的研究。

总之，联合检测患儿的尿β2-MG、α1-MG、NAG可以对肾小管的具体损伤程度进行反映，有助于肾病综合征的临床诊断及治疗，且尿β2-MG、α1-MG、NAG联合检测结果对比肾功能指标更优，但对PNS预后的判断有待进一步的研究。同时本研究为小样本研究，对SSNS患儿预后未进行长期随访，对研究结果都可能产生影响，未来还需更大样本、更长随访时间的研究来进一步探索联合检测三者对PNS的意义。