晚期糖化终末产物在乳腺癌中表达及其临床意义

彭伟 陈津 崔兆磊 苏光建 肖振洲 陈燕

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，而转移是乳腺癌患者死亡的主要原因。了解乳腺癌转移的相关机制对于预防和治疗乳腺癌转移具有重要作用。新近研究发现糖尿病在肠癌、肝癌、前列腺癌等多种肿瘤的发生发展中起作用[1-2]，AGEs高表达于糖尿病患者体内，但有关AGEs与肿瘤转移相关的研究甚少。本研究采用酶联免疫吸附法检测乳腺癌患者治疗前血清AGEs的表达，分析其与乳腺癌临床病理特征的关系，探讨其在肿瘤发生、发展过程中的作用机制及其在肿瘤治疗方面的临床意义。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2016年7—11月在福建省肿瘤医院新入院且接受正规治疗的160例乳腺癌患者，同时选择已确诊的纤维腺瘤、腺病伴导管扩张等乳腺良性疾病患者（30例）和健康人群（30例）。入组条件：（1） 首次发现乳腺癌患者； （2） 细胞学或病理学诊断的浸润性乳腺癌患者； （3） KPS评分≥60分；（4）未合并其它肿瘤。排除标准：合并糖尿病病史、糖耐量受损及空腹受损的患者。按照以上标准，收集患者的姓名、性别、年龄、原发肿瘤大小状态、区域淋巴转移状态[1988年美国癌症研究委员会（AJCC）和国际抗癌联盟（UICC）联合制定的乳腺癌分期标准]、组织病理类型、治疗前血清标志物水平等临床资料。

1.2 研究方法

血清AGEs水平检测：所有患者入院空腹静脉采血3～4 ml，静置30 min，3 000 r/min离心5分钟，分离血清，-80℃冰箱保存待测；采用上海酶联生物科技有限公司试剂盒，酶联免疫吸附法检测AGEs。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 乳腺癌患者血清AGEs水平

160例新入院的乳腺癌患者包括浸润性导管癌（invasive ductal carcinoma，IDC）156例和浸润性小叶癌（invasive lobular carcinoma，ILC）4例，平均年龄为 （51.01±10.58）岁；30例乳腺良性疾病患者和30例健康对照人群平均年龄分别为（48.32±12.66）岁和（50.46±11.45）岁，与乳腺癌组均差异无统计学意义；三组每例患者均进行血清AGEs检测，乳腺癌组平均表达水平分别为（124.84±74.86）μg/ml，明显高于乳腺良性疾病组[（102.11±42.83）μg/ml，P=0.039）]及健康对照组[（97.85±37.87）μg/ml，P=0.020）]，差异具有统计学意义。

2.2 血清AGEs水平与各临床病理特征的关系

根据不同病理特征分组分析发现：不同的患者年龄、病理类型间AGEs表达水平没有明显差异；AGEs表达水平与原始肿瘤大小（T）、雌激素受体（estrogen receptors，ER）、孕激素受体（progesterone receptors，PR）及原癌基因人类表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor-2，Her-2）的表达水平没有明显关联。在平衡年龄因素后发现，区域淋巴结转移状况（N）2-3级患者（137.72±86.65）μg/ml AGEs表达水平明显高于N0-1级患者（117.51±66.76）μg/ml，差异具有统计学意义（P=0.025）；临床分期Ⅲ～Ⅳ期患者（136.56±85.27）μg/ml AGEs表达水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者（117.81±67.49）μg/ml，差异具有统计学意义（P=0.045）。见表1。

3 讨论

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，而转移是乳腺癌患者死亡的主要原因。新近研究发现糖尿病在肠癌、肝癌等多种肿瘤的发生发展中起作用[1-2]，AGEs高表达于糖尿病患者体内，但有关其与肿瘤转移相关的研究甚少。本研究检测乳腺癌患者治疗前血清AGEs表达水平，发现血清AGEs的表达与区域淋巴结转移状况、临床分期相关，提示AGEs在乳腺癌的侵袭和转移中起作用。

AGEs是还原糖如葡萄糖的羰基与蛋白质、核酸等生物大分子通过非酶糖基化作用形成可逆产物Schiff碱和Amadori产物，后者再经过一系列分子重排形成不可逆的聚合物，所产生的系列聚合物。已有研究发现AGEs在糖尿病及其并发症、肾脏疾病等慢性疾病及衰老的病理机制中有重要的作用[3]。近年，越来越多的研究发现糖尿病在肠癌、肝癌等多种肿瘤的发生发展中起作用[1-2]。DE等发现合并糖尿病的乳腺癌患者区域治疗失败时间（DFS）和总生存时间（OS）明显短于未合并糖尿病的患者[4]；Hou等发现糖尿病是乳腺癌预后差的独立危险因子[5]，表明糖尿病参与了乳腺癌的病情进展。

AGEs高表达于糖尿病患者体内，而糖尿病在乳腺癌侵袭转移中起作用，但有关AGEs在乳腺癌细胞侵袭转移中作用的研究鲜有报道。有研究[6]发现：AGEs促进乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖，并通过上调表达基质金属蛋白酶（MMP）-9，使乳腺癌细胞侵袭和迁移能力增强；同时，Stratigoula等[7]的研究发现AGEs高表达于肠癌组织中，并且与肿瘤的病理分级相关，本研究结果显示：在平衡年龄等因素后，160例新入院的乳腺癌患者平均表达水平分别为（124.84±74.86）μg/ml，明显高于乳腺良性疾病组（102.11±42.83）μg/ml及健康对照组（97.85±37.87）μg/ml；进一步分析发现血清AGEs水平与患者区域淋巴结转移状况和临床分期密切相关，区域淋巴结转移状况（N）2-3级患者（137.72±86.65）μg/ml AGEs表达水平明显高于N0-1级患者（117.51±66.76）μg/ml，差异具有统计学意义（P＜0.05）；临床分期Ⅲ-Ⅳ期患者（136.56±85.27μg/ml）表达水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者（117.81±67.49）μg/ml，差异具有统计学意义（P＜0.05），与Stratigoula等的研究结果一致。

表1 血清AGEs水平与乳腺癌临床病理特征的关系

本研究结果显示AGEs在乳腺癌患者体内表达增高，同时与乳腺癌淋巴结转移分级、临床分期密切相关。AGEs在乳腺癌转移中起作用的机制可能与其受体晚期糖化终末产物受体（RAGE，receptor of advanced glycation endproducts）有关。RAGE是细胞表面表达的免疫球蛋白超家族成员之一，表达于多种肿瘤细胞表面，通过与多种配体结合，参与肿瘤的分裂增殖、浸润、转移等多种生物学效应[8-9]。Fuentes等[10]发现S100P/RAGE通过ERK磷酸化和NF-κB活化促进肠癌细胞增殖和转移；Chen等发现[11]HMGB1/RAGE通过ERK/c-Myc 通路下调P21表达，使肝癌细胞表达基质金属蛋白酶MMM-2增多，参与肝癌进展。

总之，AGEs在乳腺癌患者体内表达增高，同时与乳腺癌淋巴结转移分级、临床分期密切相关，可能在乳腺癌发生和转移中起作用，有可能成为乳腺癌治疗的新靶点。同时，AGEs高表达于糖尿病患者体内，对于治疗合并糖尿病的乳腺癌患者具有一定的临床指导意义。在以后的研究中，我们将进一步深入研究AGEs参与乳腺癌侵袭转移的机制，以期为乳腺癌的临床诊断、预后评估及治疗等奠定实验及理论基础。

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