猪蓝耳病弱毒苗对猪的免疫效果分析

李娟

（荣县乐德镇畜牧兽医站，四川自贡643100）

猪蓝耳病（PRRS）属于一种高度接触性的传染性，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株所引起的。目前，尚无特效药能彻底治愈此病，主要以预防为主。该病主要感染妊娠母猪与30日龄内的仔猪，可导致母猪流产、死胎、木乃伊胎、早产等问题，可导致仔猪呼吸困难，甚至死亡。据统计显示，仔猪发病率高达100%，死亡率不低于40%，母猪流产率大于35%[1]。生长猪与育肥猪虽然病情较为缓和，但死亡率仍较高。可见，PRRS对养猪业会造成巨大的损失。近年来国家相关部门正致力于推广高致病性猪蓝耳病疫苗预防PRRS，虽然学术界与养猪业对使用疫苗预防存在不少争议，但是PRRS疫苗对控制病情仍是主要措施之一。基于此，本次以某猪场90头仔猪为研究对象，分为三组，观察猪蓝耳病弱毒疫苗的免疫效果，以期为防控PRRS提供一些参考资料。

1 试验材料

1.1 试验耗材

本次试验所使用的检测试剂为美国爱德士生物有限公司制造的猪蓝耳病病毒ELISA抗体检测试剂盒、一次性采血器等。PRRS灭活疫苗 （CH-1R）由哈尔滨维科生物有限公司生产，PRRS弱毒疫苗（R98株）由南农高科技股份有限公司制造。

1.2 试验对象

从大屋村许君泽养猪场挑选90头健康仔猪作为研究对象，日龄均为50d左右，仔猪体质量、体形与批次等基本一致，无差异，且均未接种过关于猪蓝耳病的疫苗。

2 试验方法

2.1 试验分组

将90头仔猪按随机分组法分为A组、B组、对照组，各30头。把三个猪群分别安排在相邻的圈舍中，从左到右，依次为A组、对照组、B组。对比三组仔猪在体质量、体形、日龄等情况，基本相同（P＞0.05），差异无显著性，有可比性。

2.2 免疫方法

对照组仔猪从颈部肌肉注射适量生理盐水，作对照，剂量为每头3ml。A组接种高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗，从颈部肌肉注射，剂量为每头1.5头份。B组接种高致病性猪蓝耳病灭活疫苗，接种方法与剂量参照A组。

2.3 血清样品

把试验猪全部编号，从1号～90号，便于观察记录。在免疫前与免疫后28d、60d、90d分别于仔猪前腔抽取静脉血，将血清分离出来，放置在-20℃的冰箱内。随后，可分批对这些血清进行PRRS抗体检测。

2.4 PRRS检测方法

将待检测的血清样品先进行40倍稀释处理，然后取100μL稀释好的血清样品，将其加入酶标版反应孔，再将两孔阴阳性对照血清加入其中，用量为100μL。将其放置在室温下0.5h，再用洗涤剂清洗3～5次。待孔内液体基本没有后，在滤纸上拍干。之后在每个孔内加入TMP溶液100μL，15min后加入等量的终止液，并分析处理得到的数据。

表2 对比三组PRRS抗体检测结果 [n（%）]

2.5 统计学分析

本次通过SPSS19.0统计学软件包完成数据分析，计量资料用t进行检验，并用（±s）表示；计数资料用卡方检验，用百分比表示。若P＜0.05表示差异有统计学意义。

3 结果分析

3.1 对比三组免疫后血清抗体水平S/P值

试验结果显示，A组免疫后28d、60d时，S/P值均大于2.0，待免疫90d时，S/P值虽然有所下滑，但仍大于1.1，表示抗体水平较好。B组免疫后28d与60d时的S/P值均维持在低水平，不到0.4。对比两组28d与60dS/P值水平，P＜0.05，组间差异显著，有统计学意义。B组免疫90d后，S/P值迅速上升，约为 （1.8±0.7），与A组水平无明显差异（P＞0.05），无统计学意义。对照组给予生理盐水，未接受任何高致病性猪蓝耳病疫苗免疫，在28d后S/P值低于 0.4，而在免疫 60d时，S/P值约为（1.6±0.5），且保持继续增高趋势，在免疫90d时，该组S/P值仍保持较高水平（见表1）。

3.2 对比三组PRRS抗体检测结果

根据表2可知，A组在免疫60d、90d时，PRRS抗体检测阳性率均为100%。B组在免疫28d后只有三分之一为阳性，大多数PRRS抗体为阴性；待免疫90d时，大多数转为阳性，阳性检测了高达96.7%。对照组在免疫28d时，全部仔猪PRRS抗体检测均是阴性，在免疫90d时大约93.3%的仔猪检测结果为阳性。可见B组与对照组抗体检测结果相当（P＞0.05），有统计学意义。

3.3 对比免疫副反应

接种疫苗后A组仔猪无1例出现明显的副反应，B组仔猪中有一部分出现副反应，表现为食欲减退、体温增加、精神沉郁。不过，上述反应很快就消失，仔猪全部恢复正常。

4 讨论

本次试验显示，PRRS弱毒疫苗的免疫效果更佳，明显好于灭活苗。弱毒疫苗抗体生成速度明显快于灭活苗，在首免28d左右抗体合格率达到93.3%，灭活苗则在33.3%左右。此外，灭活苗免疫一次是无法达到理想的免疫效果，需加强免疫，而弱毒疫苗通常只需免疫一次便可达到农业部的规定要求。这是因为在抗PRRSV感染免疫过程中细胞免疫占据主导地位，而灭活苗采用的是以诱导体液免疫为主的方式。弱毒苗不仅能诱导细胞免疫，而且同时还能诱导体液免疫，从而形成高效价的PRRS特异性中和抗体。这能明显抑制猪体内蓝耳病病毒的复制活动[2]。

目前，市场上销售的PRRS抗体检测试剂盒能够检测不同PRRS毒株，且敏感性较好，但是只能反映猪是否感染PRRSV，却无法鉴别是自然感染还是人工免疫疫苗[3]。因此，在临床实践中需根据病猪临床表现，如母猪早产、流产以及繁殖障碍等情况来制定PRRS的猪场控制方案。猪场应根据周边地区猪蓝耳病流行特点及主要毒株类型来挑选疫苗，避免由于疫苗选择不当而导致免疫效果差，引起疫病流行。弱毒活苗安全性高，副反应小，免疫应答好，临床使用效果好，通常在接种3～4周便会形成抗体，产生免疫效果，免疫作用可持续120d[4]。因此，在猪蓝耳病流行区域首先应考虑选用弱毒活疫苗。此外，一个猪场只能挑选一种毒株疫苗使用，禁止同时使用多种毒株疫苗。因为后者会导致病毒毒株重组，从而使病毒毒性增强。若附近有猪蓝耳病疫情出现，猪场可选用弱毒活疫苗免疫进行预防。种猪场、猪蓝耳病疫情较轻的猪场可选用灭活苗。

猪蓝耳病是生猪的一种常见疫病，一旦防控不及时会给养猪业造成严重的经济损失。对此，各猪场除了要做好免疫工作外，还应将关口前移，做好日常预防工作。首先，要加强对猪场的消毒工作，合理选择消毒剂，净化整个猪场。同时，做好运输环节的消毒管理，严防疫病从外传入。其次，要严格执行全进全出的饲养原则，改善饲养环境，以尽量减少猪的应激反应[5]。对从外部引进猪只要先进行隔离，用血清学与病原学检测健康后方可入群。最后，要注意预防副猪嗜血杆菌、链球菌引起的继发感染，可选用头孢类药剂防治，但禁用氟苯尼考等氯霉素药剂，慎用磺胺药物。