尿碘测定的注意事项及质量控制

(雅安市疾病预防控制中心，四川 雅安 625000)

1 采样要求

1.1 采样器具的准备 器具：可用玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶，必须能够用塞或盖紧密密封，用前无碘化处理：10%盐酸浸泡(必要时还可用硫代硫酸钠溶液泡)，然后用自来水和去离子水冲洗，晾干备用。

1.2 采样量 推荐50～100mL

1.3 样品的采集与保存

1.3.1 依据GB/T5750.5～2006

1.3.2 采样后应尽快送实验室检测，不能尽快检测可4℃冰箱保存，若超过一周需低温冷冻保存。

2 实验前准备

2.1 实验环境 防止碘污染，实验室环境严格避免碘污染，实验室内不允许常量碘测定或用存放其他碘试剂，实验室与采血室间也要保持足够距离，避免碘消毒剂影响。为防止碘污染，实验前用1%硫代硫酸钠溶液擦拭桌面。

2.2 仪器试剂

2.2.1 玻璃器皿的清洗 初次使用或长时间不用的玻璃器皿经1+1硝酸 浸泡24h后，先用去离子水冲洗2～3遍，再将这些玻璃器皿用1%硫代酸钠溶液浸泡12h以上，然后用去离子冲洗干净，在温室下晾干备用。所有的玻璃皿不能用铬酸洗液浸泡，同时还要慎用消毒剂和清洗剂。

2.2.1.1 器皿注意切不可与测定碘盐的玻璃器皿混用；另外水质卫生检验的氨氮纳氏比色法、砷的银盐比色法使用的试剂含高浓度的碘离子，这些检验工作所用的器皿不可与尿碘检验的混用，对此还须注意避免这些试剂对光度计比色皿的污染

2.2.1.2 配制试剂所用的氢氧化钠、氯化钠较可能碘杂质较高，所以宜选用合适的并留用(专用)；亦有发现某一过硫酸铵固体、三氧化二砷试剂中含较高碘杂质。

2.2.1.3 过硫酸铵的性质不是太稳定，见光容易分解，应该存放在4℃冰箱内；硫酸铈试剂较易受潮，会影响配制浓度，将试剂放于干燥内或经100℃干燥后配制使用；三氧化二砷有剧毒，剩余的试剂不要随便废弃，溶液污染环境；碘标准使用液最好在临用前配制，以防止低浓度的碘被存放容器吸附引起偏差，存放尽量不要与其他试剂一起存放。

2.2.1.4 试剂的纯度要符合测定方法的要求，同批样品的测定所用试剂必须是同一批号，且最好严格按要求一次性配好，而每一次试剂的配制做好由专人负责，尽可能避免配制条件的差异带来的误差。

2.2.2 实验用水：建议使用电阻高于100万欧姆的去离子水，而蒸馏水需要进行无碘化处理。

2.2.3 器皿校准 刻度吸管、移液管、加样枪使用前要校准，才能保证结果准确。

3 分析过程的控制

3.1 水浴温度 30℃，波动范围正负1℃。

3.2 排管 因为砷铈反应时褪色反应，碘浓度越高，褪色越快，因此将标准系列溶液按碘浓度由高到低排列，各试剂均按此顺序加入。

3.3 取样 取250ul尿样最好用刻度吸管吸取，用加样枪取样尿液有可能打不干净，塑料吸头有时会吸附少许尿液，导致测定结果不准确。

3.4 消化 尽可能使用消解仪中部消化样品，最好对全部消解仪孔进行温度检测，温度相差大于1℃时应标出不用。

3.4.1 样品消化时的消化管孔径大小、管壁薄厚尽可能一致；以减轻少因受热不均匀而产生的误差；消解仪消化温度适中，过高消化样液损失过多，过低消化不完全；条件不允许时刻采用电热恒温鼓风干燥箱进行消化，因为箱体内装有鼓风系统，样品消化后消化液的最终体积也非常接近。

3.4.2 因消化过程无终点指示以及消化时间、温度又批间差异，每批样品消化要与标准系列及空白试验同时进行，以减少误差，提高试验的标准性。如果两台恒温消解仪同时消化，每台消解仪应分别设置一套空白盒标准系列。

3.5 (1)加入硫酸铈铵溶液时，要求准确、快速，加样枪要求校准。由于硫酸铈溶液容易附壁，所以加入时不能使硫酸铈试剂接触反应管内壁，加后必须立即充分摇匀放回水浴中，在吸取该溶液的时候要防止产生气泡，以免影响加入量。(2)加入硫酸铈铵溶液后的砷铈反应还可在20～35℃之间的某一稳定的室温(或控温)条件中可进行；每管加入硫酸铈铵的时间间隔不需要固定为30s,亦可以是1min，只要时间间隔保持一致即可，如果人手少，每次做样不要超过80份，加入硫酸铈铵溶液时间间隔大于30s,不超过1min，因为后面的管子在加硫酸铈铵溶液时，前面的标准已经到比色时间。

3.6 终点判断 反应时间以监控碘标准浓度300ug/L管的吸光度达到0.15～0.20时，依顺序进行广度测定[3]。实际操作时过早比色碘标准浓度300ug/L管的吸光度大于0.20，标准曲线相关系数r有可能达不到0.999，过迟比色碘标准浓度300ug/L管的颜色有可能退完，标准曲线做不出来，整个试验得重做。

3.6.1 建议标准曲线碘标准浓度300ug/L做平行样，笔者发现25分钟时要密切注意300ug/L管颜色深浅，过深继续在水浴反应，当300ug/L管淡黄色拿出来比色，如果吸光度在0.15～0.20时，开始比色；如果300ug/L管的吸光度大于0.20，重新把它放到水浴中继续反应；如果300ug/L管的吸光度小于0.15，将这管舍去马上将另一管300ug/L作为第一管开始比色。

3.7 比色 比色时，每管检测的时间间隔应与加硫酸铈铵溶液的时间间隔一致。

3.8 当按照尿碘测定方法操作结果出现工作曲线碘空白管的吸光值很小时(例如30℃条件下砷铈反应30min时碘空白管的测定吸光度<0.7)。先检查光度计波长是否准确；是否使用了已风化或潮解的过硫酸铵固体试剂；是否配制得的Ce4+溶液浓度偏低；再检查检测体系是否存在碘污染，并予以消除。这里的检测体系包括：所用试剂、水、所用器皿、实验室环境。

3.9 重视利用国家冻干尿碘标准物进行检测质量控制，以便发现误差，采取措施消除误差。

4 总结

尿碘砷铈催化分光光度法测定干扰因素很多，实验前一定要保证环境无碘，所用的器具要进行无碘化处理，所用的试剂和水不得含碘，保持消化温度100℃，过高过低测得的碘含量都会偏低，每管比色的时间间隔应与加硫酸铈铵溶液的时间间隔一致，碘标准浓度300ug/L做平行样，终点判断在加入硫酸铈铵25分钟时密切观察300ug/L管颜色深浅，以它的吸光度达到0.15～0.20时开始比色，每次实验要带内部质控[4]，这样才能保证检测结果准确可靠。

[1]李红梅. 尿碘测定的质量控制— 过硫酸铵消化砷铈催化分光光度法[J].基层医学论坛，2009, 13(17) : 1672-1673.

[2] 孙亚维,陈科杰,等. 尿碘检测实验室的质量控制分析[J].中国卫生检验杂志，2011(4):1016-1016.

[3]中国疾病预防控制中心地方病控制中心 WS/T107-2006尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法[R].地方病学，2008.6.102-104.

[4] 顾仪, 郭威. 尿碘实验室检测质量保证的现状及对策[J].中国公共卫生2001.17(3)：268-268.