厦门地区心血管疾病患者外周血单个核细胞CYP2C19基因型与表型的分布研究*

葛高顺，倪二茹，方宜臻，孟 琦，郭奕昌，谢华斌

(厦门大学附属心血管病医院检验科，福建厦门 361004)

近年来，世界卫生组织报道，心血管疾病已是全球的头号死因。研究发现细胞色素氧化酶P450家族中最重要的成员CYP2C19可影响许多心血管疾病常用药物的代谢，如质子泵抑制剂、抗血小板药物等［1］。目前，已发现超过34种CYP2C19等位基因突变，根据基因型可将其分为以下4种表型:超快代谢型(UM)、快代谢型(EM)、中间代谢型(IM)和慢代谢型(PM)［2］。CYP2C19 基因突变可导致P450酶活性表现出遗传多态性，使药物活性具有明显个体差异［3］，即基因型和表型差异与心血管疾病的疗效，缺血缺氧性心血管事件或死亡率密切相关。所以通过CYP2C19基因型或表型合理用药，可提高疗效、降低药物不良反应的发生率［4］。目前，国内外文献报道显示CYP2C19基因型或表型存在一定种族和地域差异，本文旨在了解厦门地区心血管疾病患者CYP2C19基因型与表型的分布特征，以期为厦门地区心血管疾病患者更合理的个体化用药提供依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2016年4月～2018年4月厦门大学附属心血管病医院诊断为心血管疾病的患者2017例，其中男性1630例、女性387例。再根据患者年龄分为两组:＜65岁组1031例，平均年龄55岁;≥65岁组986例，平均年龄73岁。

1.2 试剂与仪器 TL998A荧光检测仪(西安天隆科技有限公司);测序反应通用试剂盒(北京华夏时代基因科技发展有限公司)。

1.3 方法 采集受检者空腹静脉血2 ml于EDTA-K2抗凝真空管，按照试剂盒说明书进行外周血单个核细胞分离，分别加入具有探针的荧光检测试剂 CYP2C19*2 9154G＞A(rs4244285)，CYP2C19*3 7948G＞A(rs4986893)，CYP2C19*17 806C＞T(rs12248560)进行杂交测序，判读结果。

1.4 统计学分析 采用SPSS 22.0进行统计学分析，基因分布采用Hardy-Weinberg平衡定律检验，计数资料以%表示，各基因型与表型在不同性别、年龄、疾病类型、地区组间比较用Pearsonχ2检验分析差异性，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CYP2C19基因型分布情况 见表1。CYP2C19*2，CYP2C19*3及 CYP2C19*17等位基因突变率分别为 57.21%，10.61%和 0.99%，Hardy-Weinberg平衡定律检验CYP2C19*2存在偏差(χ2=10.19，P＜0.05)，CYP2C19*3(χ2=0.17，P=0.68)与 CYP2C19*17(χ2=0.05，P=0.82)在遗传中稳定不变，即数据来自同一孟德尔群体，具有群体代表性。

表1 CYP2C19基因型的分布

2.2 CYP2C19表型分布情况 见表2。

表2 CYP2C19表型的分布

超快代谢型(UM)、快代谢型(EM)、中间代谢型(IM)和慢代谢型(PM)检出率分别为0.55%，35.35%，50.47%和13.63%。

2.3 性别对CYP2C19基因型与表型的影响 见表3。1630例男性和387例女性心血管疾病患者CYP2C19的基因型和表型分布差异无统计学意义(χ2=0.002～1.422，均P＞0.05)。

表3 CYP2C19基因型与表型在不同性别中的分布

2.4 年龄对CYP2C19基因型与表型的影响 见表4。1031例＜65岁和986例≥65岁的心血管疾病患者CYP2C19的基因型和表型分布差异均无统计学意义(χ2=0.002～3.749，P＞0.05)。

表4 CYP2C19基因型和表型在不同年龄中的分布

2.5 不同疾病类型CYP2C19基因型与表型的分布 见表5。963例心肌梗死患者和1054例非心肌梗死的心血管疾病患者CYP2C19的基因型和表型分布差异均无统计学意义(χ2=0.009～1.546，均P＞0.05)。心肌梗死组与非心肌梗死心血管疾病组的诊断与鉴别诊断，均由本院心内科与心外科医生严格根据临床表现、特征性心电图改变及实验室检查指标进行确诊分组，且并发其他系统疾病无明显差异。

2.6 不同地区间CYP2C19基因型与表型的比较见表6。结合本文和近年来文献已报道结果，对厦门地区与南京等10个不同地区及国家数据进行比较。中国地区差异较小，厦门地区与南京、北京、武汉地区比较差异均无统计学意义，与大连地区比较仅CYP2C19*2 GG基因，EM差异有统计学意义;亚洲地区差异也较小，与韩国、泰国比较差异均无统计学意义;与非亚洲地区比较差异较大，如与西班牙比较仅CYP2C19*3 AA，CYP2C19*17 TT基因差异无统计学意义，与俄罗斯、伊朗、土耳其等国家比较仅CYP2C19*3 AA基因，EM差异无统计学意义，其他差异均有统计学意义。

表5 CYP2C19基因型和表型在不同疾病类型中的分布

表6 厦门地区与文献报道其他地区的比较(%)

3 讨论CYP2C19与经皮冠状动脉介入治疗(percutaneoustransluminalcoronary intervention，PCI)术后最常用的抗血小板药物氯吡格雷的代谢密切相关。CYP2C19*2，CYP2C19*3等位基因突变可减弱氯吡格雷的抗血小板疗效，而CYP2C19*17等位基因突变可增强其疗效，根据基因型可分为4种代谢表型，各表型患者的药物治疗方案有所不同。近年研究发现，氯吡格雷抵抗(clopidogrel resistance，CPGR)是增加支架内血栓、再梗死等不良心血管事件的一个危险标志［15］。本文结果显示厦门地区人群缺乏CYP2C19*17 TT基因型患者，CYP2C19*17等位基因突变率小于1%，超快代谢型患者极少;而CYP2C19*2等位基因突变率则超过50%，中间代谢型患者也超过50%，慢代谢型患者比例高达13.63%，这类患者服用常规剂量的氯吡格雷可能疗效不佳［16］。此外，该人群CYP2C19*2不符合Hardy-Weinberg平衡定律，CYP2C19*3与CYP2C19*17符合 Hardy-Weinberg平衡定律，与部分报道不完全一致，可能与不同地区人群的基因型分布存在一定差异有关［11，17］。比 较 不 同 性 别、年 龄、疾 病 类 型 组CYP2C19基因型与表型的频数频率分布差异均无统计学意义，而不同地区间CYP2C19基因型与表型存在不同的差异，与大部分报道相符。厦门地区与南京、北京、武汉等地区及韩国、泰国比较差异无统计学意义;与大连地区比较仅CYP2C19*2 GG基因、快代谢型差异有统计学意义，其他基因型与表型差异无统计学意义;与西班牙、俄罗斯、伊朗、土耳其等国家比较差异较大。综上，亚洲地区与非亚洲地区相比，CYP2C19*2，CYP2C19*3等位基因突变率较高，CYP2C19*17等位基因突变率较低，慢代谢型与中间代谢型患者比例较高，超快代谢型患者比例较低。由此可推测，不同地区及国家患者使用CYP2C19可影响的 药物治疗时剂量应有所差异，而厦门地区心血管疾病患者慢代谢型分布的比例较高，检测CYP2C19基因有助于心血管疾病患者的个体化药物治疗，特别是PCI术后的抗血小板治疗。参考文献:

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