慢性乙型肝炎患者血清谷氨酸脱氢酶活性、ApoA I、ApoB100含量的动态变化及临床意义

郑 奇，杨 丽，曾 霖，桂梦岚，郭秀梅

(成飞医院检验科，四川 成都 610092)

慢性乙型肝炎(CHB)是临床常见肝病，随着病情进展，可演变为肝硬化，甚至发展成为肝癌，严重危害人类健康[1，2]。早期发现及监测CHB病情发展并积极干预尤为重要。但目前对于CHB仍缺乏高敏感性且特异性的血清指标来进行病情严重程度及治疗疗效的评价。谷氨酸脱氢酶(GLDH)是一种线粒体酶，与谷氨酸代谢及能量代谢密切相关，近年研究发现，其在慢性肝病患者血清中呈高表达，能够反映肝细胞损伤程度[3]。肝病患者常伴有脂质代谢异常。载脂蛋白对脂质转运及结合有重要作用，载脂蛋白A-I(ApoA I)、载脂蛋白B100(ApoB100)是其中两类主要载脂蛋白，其表达与慢性肝病患者脂质代谢紊乱有紧密联系[4]。本研究通过观察CHB患者治疗前后血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100含量的动态变化，以期为CHB病情监测及疗效评价提供指导。

1 资料与方法

1.1 一般资料2018年1～8月我院收治的CHB患者50例，均符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015版)》[5]中CHB诊断标准，无其他系统严重疾病。男29例，女21例，年龄26～70岁[(45.23±9.24)岁]；选取同期我院健康体检者50例为对照组，男26例，女24例，年龄25～68岁[(43.58±8.68)岁]。两组均排除肝肾疾病、自身免疫性疾病、其他影响脂质代谢的疾病等。两组性别、年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究获得伦理委员会批准，所有研究对象均对研究知情并签署同意书。

1.2 方法所有患者均予以常规保肝治疗，多烯磷脂酰胆碱胶囊(国药准字H20059010，赛诺菲北京制药有限公司)，每次口服456 mg，每天3次。必要时予以抗病毒治疗，恩替卡韦(国药准字H20120039，江苏正大天晴药业股份有限公司)，每次口服0.5 mg，每天1次。对于丙氨酸转氨酶(ALT)明显升高(超过正常上限1倍)者，予以肝细胞保护剂异甘草酸镁，根据病情可予以营养支持(白蛋白、血浆等)。持续治疗28天。

1.3 血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100含量检测所有患者均于治疗前后采集外周静脉血，对照组于体检时采集外周静脉血。采用全自动生化分析仪(BECKMAN AU5800型)，应用α-酮戊二酸底物法检测血清GLDH活性，试剂盒购于北京九强生物技术股份有限公司；应用免疫比浊法测定血清ApoA I、ApoB100含量，试剂盒购于英国Abacm公司。所有检测操作步骤严格按说明书进行。

1.4 肝功能Child分级评定参照文献[6]中相关方法进行Child分级评分，内容包括肝性脑病存在情况及程度、腹水情况、血清胆红素、白蛋白水平和凝血酶原时间(PT)五个指标。评分越高表示肝脏损伤越严重。

1.5 统计学方法采用SPSS 20.0统计学软件分析数据。计量指标以均数±标准差表示，组间比较采用t检验；相关性分析采用Pearson相关系数法。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量及Child分级评分比较与对照组相比，CHB组血清GLDH活性及Child分级评分明显较高(P<0.05)，ApoA I、ApoB100含量明显较低(P<0.05)。见表1。

表1 两组血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量及Child分级评分比较

2.2 CHB治疗前后血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量及Child分级评分变化治疗后，CHB血清GLDH活性及Child分级评分较治疗前明显降低，血清ApoA I、ApoB100含量较治疗前明显升高(P<0.05)。见表2。

表2 CHB治疗前后血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量及Child分级评分变化

2.3 CHB患者血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量与Child分级评分的相关性治疗前CHB组血清GLDH活性与Child分级评分呈正相关(r=0.589，P<0.05)，ApoA I、ApoB100含量与Child分级评分呈负相关(r=-0.605、-0.584，P<0.05)；治疗后CHB组血清GLDH活性亦与Child分级评分呈正相关(r=0.602，P<0.05)，ApoA I、ApoB100含量与Child分级评分呈负相关(r=-0.613、-0.568，P<0.05)。

2.4 血清GLDH、ApoA I、ApoB100检测对于CHB的诊断效能血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100水平诊断CHB的曲线下面积分别为0.933、0.863、0.722，截断值分别为12.86U/L、0.81 g/L、0.64 g/L，灵敏度分别为82.1%、79.6%、63.7%，特异度分别为89.2%、81.4%、77.6%。见图1。

图1 血清GLDH、ApoA I、ApoB100水平诊断CHB的ROC曲线

3 讨论

慢性肝病因受各种损伤因子持续作用，导致肝脏组织结构遭到慢性破坏，假小叶形成，朝着肝纤维化进展，引起肝功能持续损害[7]。肝穿刺活检是判断慢性肝病病情严重程度的金标准，但其检查程序繁琐、费用昂贵，同时存在明显创伤，无法用于动态观察[8]。目前，临床评价慢性肝病病情严重程度多依靠Child分级评分，而该评分系统涉及内容包括肝性脑病存在情况和其严重程度、腹水情况、血清胆红素、白蛋白水平和PT五个指标，评价项目较多、繁琐，易产生偶然误差及系统误差[9]。因此，临床急需寻找敏感、特异且可方便用于动态评价慢性肝病肝损伤程度的血清学指标。

GLDH是一种含锌的线粒体酶，在肝脏、肾脏、心脏、脑等多种组织中有着广泛分布，其中以肝脏中活性最高。GLDH主要存在于肝细胞线粒体中，且在肝小叶不同区域内其表达水平是存在差异的，肝小叶中央静脉肝细胞中的GLDH活性是周边肝细胞的1.72倍[10]。正常情况下，血液中GLDH活性极低，当肝细胞出现损伤或坏死时，GLDH随着线粒体崩解而进入血流，引起血清GLDH活性增高[11]。因此检测血清GLDH活性有助于了解肝细胞损伤程度。GLDH活性不存在季节波动，个体差异较小，且几乎不受其他因素影响。研究显示，肝功能异常者血清GLDH活性明显升高，可反映肝细胞损伤程度及治疗效果[12]。相关研究表明，GLDH对肝实质损伤诊断的特异性相比于ALT、AST要高[13，14]。本研究显示，与对照组相比，CHB组血清GLDH活性明显升高，治疗后血清GLDH活性降低，且血清GLDH活性与Child分级评分呈正相关，提示血清GLDH活性能够反映患者肝损伤程度，并可动态反映治疗效应。

载脂蛋白是一种多功能蛋白，可参与脂质结合、转运、利用、分布等多种作用，对于脂质代谢有着重要作用。其具体功能包括：①调节酶活性；②配体作用，能够与相关受体结合；③脂蛋白的重要组成。ApoA I、ApoB100是其中两类主要载脂蛋白，前者是高密度脂蛋白(HDL)的主要蛋白成分，具有较强的卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)激活能力，在胆固醇代谢中扮演着重要角色；后者是低密度脂蛋白(LDL)的重要组成，其生理作用在于可识别LDL受体并与其结合，参与LDL的清除，有助于维持血清LDL、胆固醇水平的稳定。肝脏是ApoA I、ApoB100的主要合成部位，当肝功能出现损伤时，ApoA I、ApoB100合成障碍，血清ApoA I、ApoB100水平降低，并伴随着血脂紊乱。本研究显示，CHB组血清ApoA I、ApoB100水平明显低于对照组，治疗后出现升高，且血清ApoA I、ApoB100水平与Child分级评分呈负相关；因此血清ApoA I、ApoB100水平也可作为评估CHB患者肝损伤程度及治疗疗效的重要指标。本研究还采用ROC曲线分析了血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100水平对CHB的诊断能力，结果显示，其曲线下面积分别为0.933、0.863、0.722，表明三者均对CHB有重要辅助诊断价值。

综上所述，CHB患者GLDH活性升高，ApoA I、ApoB100含量降低，经治疗后它们的水平得到一定恢复；且血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100含量与Child分级评分呈正相关，检测这三项指标有助于CHB的诊断及疗效评估。