间苯三酚在体外受精-胚胎移植中的应用▲

池 艳 覃 捷 黄红艺 莫伟英 何 冰 黄泰帅 谭卫红

(广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心，南宁市 530021，电子邮箱：chiyan986@163.com)

体外受精(invitrofertilization，IVF)-胚胎移植(embryo transfer，ET)是一项重要的辅助生殖技术。在IVF-ET过程中子宫平滑肌的痉挛性收缩是妨碍胚胎着床的原因之一，如何抑制子宫平滑肌痉挛性收缩从而改善IVF-ET患者的妊娠结局是目前研究的热点之一[1-3]。曾有学者报告间苯三酚可以缓解子宫平滑肌收缩，抑制子宫蠕动波，在一定程度上改善妊娠结局[4]。本研究观察间苯三酚对首次行IVF-ET患者的妊娠结局是否具有改善作用，为制定临床方案提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2015年1月至2017年12月在我院生殖医学与遗传中心首次行IVF-ET助孕的130例患者为研究对象。纳入标准：(1)年龄<40岁；(2)IVF-ET促排方案为短效长方案，且该周期有≥3个成熟卵泡生长；(3)不孕因素为单纯输卵管因素；(4)移植两个D3胚胎；(5)移植日子宫内膜厚度≥8 mm。排除标准：(1)卵巢功能减退，卵巢低反应的患者；(2)移植困难患者；(3)合并子宫肌瘤、先天性子宫畸形、宫腔粘连史、子宫内膜异位症、子宫内膜息肉、移植前有宫腔积液等明确影响胚胎着床的因素者。应用随机数字表将患者分为对照组和观察组各65例。两组夫妻双方的年龄、不孕年限、不孕类型、女方的体质指数及双侧卵巢基础卵泡数目比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)，有可比性，见表1。本研究经广西壮族自治区人民医院伦理委员会批准，患者均知情同意。

表1 两组患者一般情况比较

1.2 治疗方法 两组均进行常规黄体支持至移植后2周，测血人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)浓度确认是否生化妊娠，若生化妊娠则继续黄体支持至移植后4周，B超检查有无孕囊及原始血管搏动以确认临床妊娠，如临床妊娠则继续黄体期支持到移植后8周，常规黄体支持治疗包括：黄体酮注射液(浙江仙琚制药股份有限公司，批号：150104/150403)肌肉注射，40 mg/d，1次/d，口服地屈孕酮片(荷兰Abbott Biologicals公司，批号：348924/353216)，20 mg/次，2次/d。观察组患者在胚胎移植前1 d开始至移植后3 d，每天上午7～8点、下午2～3点给予间苯三酚注射液(南京恒生制药有限公司，批号：150103/160907)肌肉注射，40 mg/次。对照组不给予间苯三酚注射液治疗。

1.3 观察指标 (1)比较两组患者IVF基础情况。(2)比较两组患者生化妊娠率(生化妊娠周期数/移植周期数)、临床妊娠率(临床妊娠周期数/移植周期数)、胚胎着床率(胚胎着床数/移植胚胎总数)、异位妊娠率(异位妊娠周期数/临床妊娠周期数)、多胎率(多胎周期数/临床妊娠周期数)、流产率(流产周期数/临床妊娠周期数)、活产率(活产周期数/移植周期数)，其中将移植后2周血HCG阳性定义为生化妊娠，移植后4周B超提示宫内或宫外有孕囊定义为临床妊娠，若孕囊未在宫内，定义为异位妊娠；多胎包括单卵双胎及双卵双胎(本研究未出现三胎妊娠)；单胎及单卵双胎者的胚胎着床数计为1，双绒毛膜双胎者的胚胎着床数计为2。(3)对比两组新生儿畸形率，新生儿畸形率=畸形胎儿数/出生胎儿总数×100%。(4)记录用药不良反应。

1.4 统计学分析 运用 SPSS19.0软件进行统计学分析。计量资料以(x±s)表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数或百分比表示，比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组患者IVF基础情况比较 两组的促性腺激素(gonadotropin,Gn)使用时间及用量、使用HCG日子宫内膜厚度、获卵数等比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)，见表2。

表2 两组患者IVF基础情况比较(x±s)

注：Gn的规格为75IU/支

2.2 两组妊娠情况 观察组患者的生化妊娠率、临床妊娠率、胚胎着床率及活产率均高于对照组(均P<0.05)；两组的异位妊娠率、多胎率及流产率比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)。见表3。

表3 两组妊娠情况比较(%)

2.3 两组新生儿畸形率及不良反应发生情况 所有新生儿均无出生缺陷，两组新生儿畸形率均为0。间苯三酚使用过程中及使用后患者均未见有不适主诉，无过敏反应。

3 讨 论

自1978年世界第一例试管婴儿诞生以来，人工辅助生殖技术飞速发展，很多影响生育的因素都能通过人工辅助生殖技术来解决。IVF-ET应用于临床已经几十年，但临床妊娠率仍不十分满意，ET植入率低仍然是困扰生殖医生的重大难题之一。胚胎植入是妊娠过程的重要环节，通常被分为3个阶段，即胚胎黏附到内膜上皮、突破上皮细胞基底膜以及侵入已蜕膜化的基质细胞中建立母胎循环，三者缺一不可[5]。为了更好地受孕，当胚胎将要黏附到子宫内膜腔上皮时，子宫必须处于松弛状态，这是胚胎着床和侵入蜕膜化的基质细胞的先决条件。子宫内膜与其下层紧密相连，当子宫内膜下肌层发生收缩，子宫内膜也会随之发生机械运动[6]。随着卵巢激素水平的变化，子宫内膜呈现出周期性的波浪状运动，该现象称为子宫内膜蠕动波。一般正常情况下，子宫内膜蠕动波的频率在排卵后会逐渐减少，至着床窗口期甚至会完全消失，这样更有利于受精卵或配子在母体宫腔内黏附、定位及着床[7]。相对安静的宫腔内环境有利于胚胎着床，因此，各种因素刺激导致子宫异常收缩、子宫内膜运动方式及频率异常，均有可能会造成子宫内膜异常蠕动及功能紊乱，影响胚胎正常着床，进而在一定程度上影响妊娠结局[8]。子宫内膜蠕动波是子宫内膜下肌层和子宫平滑肌的收缩运动在子宫内膜层的表现，是评估子宫内膜容受性的指标之一[9]。IVF-ET助孕过程中使用的药物及阴道灌洗、胚胎移植操作等可能会增加子宫收缩[10]。有学者发现，IVF周期子宫收缩频率更高，静止期出现更晚，超促排卵患者的子宫收缩频率显著高于自然周期妊娠者[11]。Fanchin等[12]分析了220个IVF周期，发现胚胎移植前子宫收缩频率明显增加。可见IVF超促排卵周期中子宫处于较为活跃的状态，但收缩频率过于活跃的子宫对妊娠结局有不利影响[13]。子宫内膜蠕动频率异常会影响子宫内膜容受性，可能是导致胚胎移植失败的原因之一[14]。通过适当地使用抑制子宫收缩的药物来抑制子宫内膜非正常蠕动有助于孕卵着床，改善妊娠结局[15-16]。

间苯三酚是一种平滑肌解痉药，属于亲肌性非阿托品类、非罂粟碱类纯平滑肌解痉药，其能够选择性地作用于痉挛状态的子宫平滑肌，有效地缓解子宫收缩，使子宫处于相对静止的状态，有利于胚胎着床，促进产程进展[17]。间苯三酚无抗胆碱效应，故对心血管功能无影响，不会引起低血压，目前尚未发现其有致畸、致癌及致突变的副作用，对胚胎、胎儿发育无不良影响[18]。美国食品药品监督管理局将其归为孕期B类药，可安全应用于胚胎移植前后及妊娠期的患者。临床上，间苯三酚常被应用于缓解孕早期子宫异常收缩、减轻孕吐反应、预防先兆流产以及抑制人工流产手术、取环手术、宫腔镜检查等宫腔操作引发的子宫痉挛性疼痛等[19]。Xu等[4]于2013年首次报告了间苯三酚应用在辅助生殖技术中可以抑制子宫内膜的蠕动波，提高移植成功率。本研究结果显示，使用间苯三酚的观察组的生化妊娠率、临床妊娠率、胚胎着床率及活产率均高于对照组(均P<0.05)，且两组IVF基础差异无统计学意义，提示间苯三酚可以改善IVF-ET助孕患者的妊娠结局，这可能是因为间苯三酚能抑制子宫异常收缩，有利于提高子宫内膜的容受性。此外，两组的异位妊娠率和流产率差异也无统计学意义(均P>0.05)，在用药过程中未观察到明显的不良反应以及畸形儿的出生，提示间苯三酚应用于IVF-ET安全性较好。

综上所述，间苯三酚作为一种安全、有效的宫缩抑制剂，可有效改善IVF-ET助孕患者的妊娠结局。本次研究为小样本的临床研究，今后尚需进行大样本多中心的临床研究，以进一步验证所得结论，以推广间苯三酚在辅助生殖技术助孕领域的应用。此外，目前间苯三酚药物已实现国产化，既有口服片剂进行口服，也有注射液进行肌肉注射及静脉点滴，相比于阿托西班等昂贵的子宫收缩抑制剂，间苯三酚更适于在临床中推广应用。