宫颈高危型人乳头状瘤病毒感染患者生殖道微生态检测状况分析

庄素媚 倪影月

作者单位：325400 平阳县人民医院妇科

宫颈癌是一种女性生殖系统恶性肿瘤，其发生率仅次于乳腺癌，对患者生命质量及生活质量造成影响[1]。高危型人乳头状瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)感染为引起宫颈癌主要危险因素之一，其发病过程属于长期过程，相关研究认为HPV为导致宫颈癌的重要前期事件，是一种潜在风险，其进展较为缓慢，且病变多存在动态变化[2]。研究显示，人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)为一种上皮性病毒，能特异性的感染人体黏膜、皮肤组织，而人体作为唯一宿主，与此同时，女性生殖道易感染HPV，故及时地对女性生殖道HPV感染进行早期筛查并清除是抑制宫颈上皮内瘤变产生、形成的主要环节，对临床有效防治宫颈癌具有重要意义。近些年，我国女性宫颈癌发生呈上升趋势，且有研究指出2020年时每年全球范围内宫颈癌新发病例将高达66万例[3]。而大量研究表明，感染低危型HPV可造成部分中度宫颈上皮内瘤样变和轻度宫颈上皮内瘤样变，而感染高危型HPV将造成CIN2、CIN3及浸润性宫颈癌，且其亚型分布存在一定的区域性[4]。基于此，本研究对在我院行生殖道感染筛查的妇女500例展开研究，旨在进一步分析宫颈高危型人乳头状瘤病毒感染患者生殖道微生态状况。具体信息如下。

1 资料来源与方法

1.1 资料来源

将2015年3月至2017年9月在我院行生殖道感染筛查的妇女500例纳入研究，均自愿参与本研究并签署知情同意书。500例研究对象年龄16～67岁，平均年龄(34.56 ± 8.87)岁；教育程度：初中及以下264例，高中及以上236例；孕产次：≤ 1次185例，≥ 2次315例。本研究已获得我院伦理委员会审核通过。

纳入标准:①有性生活史，经宫颈液基细胞学等检查显示为炎症；②年龄≤70岁；③未出现阴道异常出血情况[5]；④接受检查前24 h无性生活；⑤无阴道灌洗放药史。

排除标准:①宫颈发育异常或先天性子宫缺失者[6]；②全身免疫性疾病者；③有宫颈手术、肿瘤等病史者；④药物过敏史患者或易过敏体质；处于妊娠期、哺乳期女性；⑤淋病奈瑟菌、滴虫、真菌及衣原体感染者。

1.2 方法

1.2.1妇科检查

对阴道分泌物颜色、性状及宫颈表面情况进行观察，采集阴道壁上1/3分泌物及宫颈管分泌物，使用超高倍显微镜检测细菌性阴道病、阴道毛滴虫、乳酸干净等微生物。在超高倍镜检下计数1 000倍镜下每视野乳酸杆菌的数量，0～<1个为+；1～4个为++；5～30个为+++；>30个为++++。阴道乳酸杆菌数量>++为正常。

1.2.2HPV检测

在非月经期，在宫颈口内插入宫颈刷1.5～3 cm，顺时针旋转4周，在留有2 ml细胞保存液的取样管中漂洗取下的标本，将宫颈刷沿刷柄折痕处折断，将取样管密封，保存于-20℃专业标本冷藏箱中。采用上海宏石医疗科技有限公司SLAN-96s实时荧光定量PCR检测仪器经PCR荧光检测法检测HPV，并使用湖南圣湘生物有限公司提供的试剂盒，且严格根据试剂盒说明进行操作。

1.3 评价指标

①HPV检测及基因分型结果：肉眼直视下可见紫蓝色圆点为阳性，反之为阴性。根据免疫膜条分布图对HR-HPV的扩增DNA标本进行判断；统计不同HR-HPV亚型分布情况[7]。②多重感染分布特征：记录二重感染、三重感染及四重感染分布特征[8]。③年龄分布情况：记录不同年龄段单一病毒感染及多重感染情况。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 HR-HPV检测及基因分型结果

500例中共检出HR-HPV阳性90例，占18.00%，其中HPV52、HPV16、HPV58亚型所占比例最高。见表1。

表1 HR-HPV各亚型分布特征

2.2 多重感染分布特征

90例HR-HPV感染中多重感染64例，占71.11%；其中二重感染44例，占68.75%；三重感染16例，占25.00%；四重感染4例，占6.25%。见表2。

表2 HR-HPV多重感染分布特征

2.3 年龄分布情况

20～30岁及31～40岁为单一感染和多重感染的高峰年龄段，高于其他年龄段，其中以20～30岁HR-HPV感染及多重感染的比例最高。见表3。

表3 不同年龄HR-HPV感染及多重感染情况[n(%)]

3 讨论

HPV感染主要通过性行为传播，且多部分女性均为感染HPV，特别是性行为活跃的妇女，其终生HPV累积概率高达80%[9]。青春期少女或大学阶段女性的HPV-DNA检测呈阳性约占20%～25%，而性行为开始后高危型HPV感染发生率将增高，且3年内将感染HPV，若不能及时采取有效措施将增加10年宫颈癌患者病死率[10]。因此，早期明确特定区域和种族中流行的HPV亚型，研制出针对性价值的疫苗对改善患者预后显得尤为重要。

作为一种无包膜的双链闭环DNA病毒，HPV主要感染人的皮肤或黏膜上皮细胞，造成感染部位良、恶性病变。目前已鉴别出HPV亚型高达200多种，主要可分为HR-HPV和LR-HPV两种生物学特征[11-12]。本研究500例中检出HR-HPV阳性90例，占18.00%，其中HPV52、HPV16、HPV58型所占比例最高，可见HR-HPV阳性检出率较高。感染后6～8月机体可清除以游离形式存在的HPV-DNA，而当HPV-DNA出现单拷贝或宿主细胞基因整合后，机体将无法清除，发展为持续感染[13]；不同亚型的HPV病毒具有不同的细菌转化能力，而当发展为持续性HR-HPV时极易发生多重感染[14-15]。本研究显示，90例HR-HPV感染患者中多重感染占71.11%，并以二重感染为主，其中HPV52、HPV16、HPV58为常见的亚型感染。20～30岁及31～40岁为单一感染和多重感染的高峰年龄段，分析其原因为该年龄段人群性活跃人群较多，且性生活较为频繁，进而增加HPV感染风险。而由于HR-HPV感染可明确发展为宫颈癌，有助于通过注射疫苗、筛查，以及早诊断、早治疗等综合措施减少宫颈癌发生[16]。

综上所述，20～40岁为HR-HPV感染的高峰年龄段，多表现为多重HR-HPV感染，并以HPV52、HPV16、HPV58为常见感染亚型，故为有效预防宫颈病变应研发针对性疫苗预防。