免疫荧光法联合免疫胶体金法在尿生殖道沙眼衣原体感染诊断中的应用及其临床价值

陈明星

【摘要】 目的：探討免疫荧光法联合免疫胶体金法在尿生殖道沙眼衣原体感染诊断中的应用及其临床价值。方法：选取2017年1月-2018年8月来本院接受沙眼衣原体感染检测的疑似尿生殖道沙眼衣原体感染患者1 100例，分别采用免疫荧光法和免疫胶体金法进行检测，分析不同检测方法的诊断价值。结果：最终确诊有70例患者为阳性;免疫荧光法、免疫胶体金法、联合检测阳性检出率分别为6.2%、5.5%、6.4%，三组比较差异无统计学意义（P>0.05）;联合检测的灵敏度、特异度、诊断符合度均高于单一检测，且免疫荧光法上述指标均高于免疫胶体金法，差异均有统计学意义（P<0.05）;联合检测的Youden指数均高于单一检测，且免疫荧光法高于免疫胶体金法（P<0.05）;阳性患者发病情况会受到避孕方式、宫颈情况、性伴侣个数的影响（P<0.05）。结论：在对沙眼衣原体感染的诊断过程中，免疫荧光法的诊断价值高于免疫胶体金法，且免疫荧光法与免疫胶体金法联合检测的诊断价值高于单一检测，临床上应当进一步推广应用。

【关键词】 免疫荧光法; 免疫胶体金法; 沙眼衣原体感染; 检出率

【Abstract】 Objective：To explore the application and clinical value of immunofluorescence method combined with immunogold gold method in the diagnosis of urinary genital tract infection of chlamydia trachomatis.Method：A total of 1 100 cases of suspected urogenital Chlamydia trachomatis infection in urogenital tract who were tested for chlamydia trachomatis infection in our hospital from January 2017 to August 2018 were selected，and tested by immunofluorescence method and immunogold gold method respectively.The diagnostic value of different detection methods was analyzed.Result：70 patients were positive.The positive rates of immunofluorescence method，immunogold gold method and combined detection were 6.2%，5.5% and 6.4% respectively，there was no significant difference among the three groups（P>0.05）.The sensitivity，specificity and diagnostic coincidence of combined detection were higher than those of single detection，and the above indexes of immunofluorescence method were higher than those of immunogold gold method，the differences were statistically significant（P<0.05）.Youden index of combined detection was higher than that of single detection，and the immunofluorescence method was higher than that of immunogold gold method（P<0.05）.The incidence of positive patients was affected by contraceptive methods，cervical condition and number of sexual partners（P<0.05）.Conclusion：In the diagnosis of chlamydia trachomatis infection，the diagnostic value of immunofluorescence method is higher than that of immunogold gold method，and the diagnostic value of combined detection is higher than that of single detection，which should be further popularized and applied in clinic.

【Key words】 Immunofluorescence; Immunogold gold method; Infection of chlamydia trachomatis; Detection rateFirst-authors address：Duanzhou District Maternal and Child Health Hospital，Zhaoqing 526040，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.15.034

由沙眼衣原体引起的尿生殖道沙眼衣原体感染属于性传播疾病，主要临床表现为泌尿生殖道部位炎症，是比较常见的女性疾病之一[1]。随疾病发展，严重时可能会导致输卵管性不孕、输卵管妊娠或妊娠期出现早产、流产等，目前对于该病症并没有明确的治疗方案，但是临床实践证明，越早诊断，越有利于患者的恢复[2]。该病症在感染后，有70%以上的患者并无自觉症状，所以对于该病症的诊断非常困难，很容易因诊断不及时而造成不良后果[3]。目前临床对于该病症诊断的金标准为细胞培养法，但是该操作的要求比较高，检测费用昂贵，且该检测出结果比较慢，因此在实际应用中受到约束[4]。本研究选取来本院进行沙眼衣原体感染检查的患者1 100例观察对象，分别采用免疫荧光法和免疫胶体金法进行检测，判断两种检测方法在临床应用中的参考价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年1月-2018年8月来本院接受沙眼衣原体感染检测的疑似尿生殖道沙眼衣原体感染患者1 100例，年龄23～55岁，平均（35.3±3.2）岁，分别采用免疫荧光法和免疫胶体金法进行检测。纳入标准：均有性生活史;无明显自觉症状;在入组前2周内未接受阴道灌洗和抗菌治疗。排除标准：合并有子宫肿瘤;临床资料不完整;存在沟通障碍。本次研究是在获得医院伦理委员会批准的前提下开展，患者对于本次研究内容知情，并且在同意书上签字。

1.2 方法 借助扩阴器张开阴道口，暴露患者宫颈，将宫颈周围的分泌物擦去，利用女性无菌拭子蘸取生理盐水，以顺时针方向刮取柱状上皮细胞进行采样，在取样后30 min内将样本在低温环境内送去检验，直接进行涂片和使用无菌胶管进行标本前处理（胶管由免疫胶体金试剂盒所提供），检测需在2 h内完成，操作需严格按照试剂盒说明说进行。

1.2.1 免疫胶体金法检测 使用免疫胶体金法检测试剂盒进行检测，当质控线和检测线同时出现红色的横条时，则证明检测结果为阳性;若在检测区未出现红线，仅在质控线处出现红线，将其判定为阴性;若仅在检测区出现红线或无红线者判定为无效。试剂盒由美国进口沙眼衣原体检测试剂盒 [5]。

1.2.2 免疫荧光法检测 当上皮细胞或其细胞周围出现草绿色荧光小点，且通过显微镜观察全视野时间可以超过10 h，则可以将其判定为阳性，反之择判定为阴性[6]。

1.2.3 免疫荧光法联合免疫胶体金法诊断的标准 两种检测其中一种为阳性即为联合检测阳性;两种检测均为阴性时即为联合检测阴性。

1.2.4 补充说明 在进行样本采集时，患者不可处于月经期;样本中不可含有较多的血液;对于免疫胶体金法检测，两种试剂盒出现检测结果不一致时，应将样本进行核酸基因扩增检测，以方便确诊[7]。

1.3 观察指标 本实验中以扩大金标准为最终确诊依据，即阳性：细胞培养法检测为阳性，或细胞培养法检测为阴性而其他两种方法检查为阳性;阴性：除却上述情况则为阴性。对比免疫荧光法和免疫胶体金法检测沙眼衣原体感染的诊断价值，包括灵敏度、特异度、诊断符合度、Youden指数，灵敏度=真阳性/（真阳性+假阴性），特异度=真阴性/（真阴性+假阳性），诊断符合度=（真阳性+真阴性）/（真阳性+假阴性+假阳性+真阴性）×100%，Youden指数=（灵敏度+特异度）-1。

1.4 统计学处理 使用SPSS 18.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，组间比较采用t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同方法检出情况分析 分别采用免疫荧光法和免疫胶体金法进行检测，最终确诊有70例患者为阳性;免疫荧光法阳性检出率为6.2%（68/1 100），免疫胶体金法阳性检出率为5.5%（60/1 100），两种方法联合检测阳性检出率为6.4%（70/1 100），三组阳性检出率比较，差异无统计学意义（字2=0.873，P>0.05），见表1。

2.2 不同检测方法的诊断价值分析 联合检测的灵敏度、特异度、诊断符合度均高于单一检测，且免疫荧光法上述指标均高于免疫胶体金法，差异均有统计学意义（P<0.05）;联合检测的Youden指数均高于单一检测，且免疫荧光法高于免疫胶体金法。见表2。

2.3 受检人员资料分析 阳性患者发病情况会受到避孕方式、宫颈情况、性伴侣个数的影响（P<0.05），见表3。

3 讨论

在世界范围内，目前由沙眼衣原体所引起的性传播疾病的患病率一直保持在高水平，而且呈现逐年上升趋势，特别是在发达国家，沙眼衣原体感染可以占到性传播疾病的首位[8]。近几年，临床数据显示，在我国该病症的发病率也呈现上升趋势[9]。大多患者在感染沙眼衣原体后并没有明显的临床症状，所以大多患者在不察觉的情况下使沙眼衣原体在性伴间不断传播[10]。随疾病发展，很容易引发尿道炎、宫颈炎以及输卵管性不孕不育等，使患者生活质量造成严重影响[11]。对于该病症早期诊断以及对患者衣原体感染病情进行评估，筛选造成感染发生的危险因素以及预测指标，对该疾病的发生进行预防和及时治疗，保障母婴健康[12]。为了提高检出率，减少患者感染后并发症的发生，许多学者曾提出多种衣原体感染检测方法，对目前实验室创建诊断方法进行划分，主要有以下三类，（1）细胞生物学方法：细胞培养;（2）免疫学方法：免疫荧光检测、酶联免疫检测以及免疫胶体金法检测;（3）分子生物学检测：核酸探针检测、核酸扩增检测。各种检测方法在实际操作中难易程度不同、检測时灵敏度和特异度也不相同，很多检测方法受外界环境的影响比较大，所以至于哪种方法更适合于在临床进行大规模的推广应用还没有确切理论证实[13]。

本研究主要采用免疫方法其中两种进行检测，免疫荧光检测和免疫胶体金法检测，这种检测方法相对于其他方法操作比较简单，免疫荧光检测是属于一种病原体定量检测方法，研究证明，免疫荧光检测法的灵敏度在80%～95%，特异度在98%以上[14]。本研究结果显示，免疫荧光检测的灵敏度为85.7%，特异度为99.2%，与以往研究结果相一致。目前在女性尿生殖道沙眼衣原体诊断中免疫荧光检测应得到广泛应用。本研究通过患者宫颈口分泌物取样进行检测，该检测方法也可以通过尿液进行检测，相对操作比较灵活。但是该操作的大范围推广也会受到一定因素的限制，比如在进行免疫荧光检测时所需检测成本比较高，在进行检测操作时对于检测人员的专业水平要求比较高，样本在送检过程中，如操作不慎很容易引发感染，影响检测结果，而且通过该方法进行检测，无法对沙眼衣原体的生存与死亡情况进行判断，不能用于患者预后检查。

胶体金是属于病原体定性检测方法的一种，采用该方法进行检测时，只有40%～70%的敏感性，但是该检测方法的特异度比较高，在检测时特异度为80%以上。本研究结果显示，采用免疫胶体金检测特异度为98.8%，而该检测方法的敏感性仅68.6%，与以往研究所得出结论一致[15-16]。该操作方法比较简单，对于操作人员的素质要求不高，而且该检测方法结果出得比较快，但是要想准确检测结果，需要较多数量的沙眼衣原体抗原。本研究分析两种检测方法各自优缺点，并对比两种方法联合的检测将结果，结果显示，联合检测的灵敏度、特异度、诊断符合度均高于单一检测，且免疫荧光法上述指标均高于免疫胶体金法，差异均有统计学意义（P<0.05）;联合检测的Youden指数均高于单一检测，且免疫荧光法高于免疫胶体金法。证明通过联合两种检测方法可以有效提高诊断符合度，做到对疾病的早发现早治疗。

综上所述，在对沙眼衣原体感染的诊断过程中，免疫荧光法的诊断价值高于免疫胶体金法，且免疫荧光法与免疫胶体金法联合检测的诊断价值高于单一检测，临床上应当进一步推广应用。

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（收稿日期：2019-02-27） （本文编辑：董悦）