鸡白痢、鼠伤寒和肠炎沙门氏菌不同鉴别培养基上的形态

2019-08-08 02:59李玉燕巩新民祝永华赵玮石海春张孝兰江兵郭龙宗
家禽科学 2019年7期

李玉燕 巩新民 祝永华 赵玮 石海春 张孝兰 江兵 郭龙宗

摘  要:本试验将鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌分别接种普通营养琼脂、麦康凯琼脂、SS琼脂、XLT4琼脂四种鉴别培养基,观察三种沙门氏菌在不同培养基的形态,以快速鉴别区分鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎三种沙门氏菌

关键词:鸡白痢;鼠伤寒;禽肠炎沙门氏菌;鉴别培养基

中图分类号:S858.315.1     文獻标识码:B     文章编号:1673-1085(2019)07-0042-03

鸡沙门氏菌病(Avian Salmonellosis)是由沙门氏菌属中的一种或几种沙门氏菌引起的一类急性或慢性传染病的总称。鸡沙门氏菌病已被世界动物卫生组织列为B类传染病[1]。本病在世界各地普遍存在,它不仅严重危害了养鸡业的发展,而且通过带有沙门氏菌的肉蛋类产品威胁人类的健康,是一种人畜共患的传染病[2,3]。沙门氏菌菌型众多,具有O、H、K和菌毛4种抗原,已知的血清型有2500多个[4],几乎所有的血清型都可致病,是非常重要的人畜共患病原菌。目前我国常见的致病性沙门氏菌血清型包括肠炎、鼠伤寒、鸡白痢和鸡伤寒等[5],不但严重影响我国养禽业的健康发展,而且与食品安全问题密切相关。其中肠炎、鼠伤寒等血清型是我国常见的引起人食物中毒的沙门氏菌血清型;鸡白痢、鸡伤寒等血清型是我国常见的感染动物的沙门氏菌血清型。传统的沙门氏菌血清学检测仍是通过细菌与特异性抗体的凝集反应鉴别其O抗原和H抗原,根据White-Kauffmann-LeMinor抗原表确定沙门氏菌的血清型[6]。本研究根据鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌在不同鉴别培养基上的形态差异,建立了快速鉴别各沙门氏菌的方法,为家禽养殖业提供了快速鉴别诊断不同沙门氏菌的技术手段。

1  材料与方法

1.1  材料

1.1.1  沙门氏菌鉴别培养基  普通营养琼脂、麦康凯琼脂、SS琼脂、XLT4琼脂四种鉴别培养基均购自青岛高科技工业园海博生物技术有限公司。

1.1.2  沙门氏菌菌株  禽肠炎沙门氏菌由本实验室保存,鸡白痢沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌为鲁东大学生命科学学院实验室赠送。

1.2  方法  将冻存的鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌分别复苏划线接种普通营养琼脂、麦康凯琼脂、SS琼脂、XLT4琼脂四种鉴别培养基,37℃培养24h~48h,观察不同培养基上的各沙门氏菌的菌落形态。

2  结果

2.1  鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌在普通营养琼脂的菌落形态  鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌在普通营养琼脂上均可生长。鸡白痢菌落形态较小,针尖大小,1mm或者更小,光滑、无色半透明,边缘整齐;鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌菌落形态较大,水滴样菌落,多大于2mm,光滑、无色不透明,边缘整齐,见图1。

2.2  鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌在麦康凯琼脂的菌落形态  鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌在麦康凯琼脂上均可生长。鸡白痢菌落形态细小,1mm或者更小,无色透明、光滑湿润,边缘整齐;鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌菌落形态中等大小,2~4mm,无色半透明、光滑湿润,边缘整齐,见图2。

2.3  鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌在SS琼脂的菌落形态  鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌在SS琼脂上均生长良好。鸡白痢沙门氏菌不产生硫化氢,菌落形态细小,1mm或者更小,无色透明、光滑湿润,边缘整齐;鼠伤寒沙门氏菌产生硫化氢,菌落中心为黑点;禽肠炎沙门氏菌产生硫化氢,整个菌落几乎全为黑色,菌落大小大于鼠伤寒沙门氏菌,见图3。

2.4  鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌在XLT4琼脂的菌落形态  鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌在XLT4琼脂上均生长良好。鸡白痢沙门氏菌不产生硫化氢,菌落形态细小,1mm或者更小,无色透明、光滑湿润,边缘整齐;鼠伤寒沙门氏菌为无色透明菌落,部分培养基颜色变黄;禽肠炎沙门氏菌产生硫化氢,整个菌落几乎全为黑色,见图4。

3  结论

鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎沙门氏菌分别接种普通营养琼脂、麦康凯琼脂、SS琼脂、XLT4琼脂四种鉴别培养基,根据三种沙门氏菌在不同培养基的形态差异,可以快速鉴别区分鸡白痢、鼠伤寒、禽肠炎三种沙门氏菌,该鉴别方法可用于规模化养殖场沙门氏菌的快速诊断鉴别。

参考文献:

[1]  刘娟,吉文汇,闫芳.鸡大肠杆菌和沙门氏菌混合感染的分寓鉴定及药敏试验研究[J].畜禽业,2007,(3):14-16.

[2]  THRLFALL E, FLISHER I, BERGHOLD C,et al.Antimicrobial drug resistance in isolates of Salmonella enterica from cases of Salmonellosis in humans in Europe in 2000: results of international muti-centre surveillance[J].Euro surveillance:bulletin europeen sur les maladies transmissibles,2003, 8(2):41-45.

[3]  孟琳.鸡沙口氏菌引起食物中毒[J]. 现代预防医学,2004,31(1):30.

[4]  Y.M.Saif. 禽病学(第十二版)[M].北京:中国农业出版社,2012:951-952.

[5]  郑世军,徐志超,李晓齐,等.一种检测鸡白痢沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒[P].中国专利CN103995126A,2014-08-20.

[6] Majchrzak M,Krzyzanowska A,Kubiak A B,et al. TRS-based PCR as a potential tool forinter-serovar discrimination of  Salmonella enteritidis,S.typhimurium,S.infantis,S.virchow,S.hadar,S.newport and S.anatum[J]. MolBiolRep,2014,41(11):7121-7132.