某国产肌酐试剂在日立生化分析仪上检测的性能评价

钟乔华，谢细娜，巫 娟，陈 琦，邹俊忠，卢松耀

（广东省揭阳市人民医院检验科，广东 揭阳522000）

血清肌酐测定对肾功能评估、治疗选择、预后判断均具有积极意义［1］。尤其在健康体检过程，经常会遇到有一些人的肾功能检验结果中其他项目都正常，仅有肌酐轻度增高的情况，这时不但医生难以作出正确诊断，也给受检者增添了心理负担，从而导致临床医生对检验结果的准确性产生了怀疑。为了了解本院肌酐检测系统的性能状况，根据国内外有关性能评价的文件和报道，结合临床工作实际，对其进行性能验证，并与迈瑞配套肌酐检测试剂进行比对，以便为临床诊疗提供有效的参考依据，现报道如下。

材料和方法

1 评价系统

检测仪器为日立7600全自动生化分析仪，试剂：肌酐CREA试剂（酶法）：（上海科华公司，批号：20171222）；校准品：科华校准品（批号：20171222）；质控品：朗道1025UN，793UE。

2 对照系统

迈瑞BS-800M及其配套试剂，质控品：伯乐20401／20402。

3 方法

首先，测定2个水平质控品，根据相关质控规则进行判断，在控后方可进行性能评价和对比。

3.1 精密度验证

3.1.1 方法 参考《WS／T 492-2016临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》［2］，连续测定5 d，每天分析一个批次，每批分析两个浓度水平，每一个浓度水平同一样品重复测定3次。收集数据，计算批内精密度以及实验室内不精密度。

3.1.2 判定标准 批内精密度 ＜1／4 TEa、实验室内不精密度＜1／3 TEa，肌酐允许总误差（TEa）为12%［3］。

3.2 正确度验证

3.2.1 方法 依据参考文献［4］，用日立7600全自动生化分析仪对卫计委临检中心发放的5个不同浓度的EQA调查品进行Cr检测，采用同期EQA结果计算5份EQA调查品的相对偏倚，计算公式为相对偏倚 ＝［（｜本室测定均值-靶值｜）／靶值］×100%。

3.2.2 判断标准 必须为成功的EQA，且平均偏倚≤1／2TEa。

3.3 线性范围验证

3.3.1 方法 参考CLSI EP6-A2文件［5］，将高值（H）和低值（L）肌酐混合血清配制成6个浓度肌酐样品，均检测2次，记录实验数据，对2次测定值计算均值并与稀释后的理论值比较。采用线性回归分析，并列出回归方程Y＝b X＋a，同时计算相关系数R，判断其是否为线性，从而进一步判断厂家给出的线性范围是否可接受。

3.3.2 判断标准 若R≥0.975或R2≥0.95，b在0.97～1.03范围内，可判断厂家提供的线性范围可以接受。

3.4 临床可报告范围验证

3.4.1 方法 取一份高值标本，分别用稀释液做不同倍数（2、4、8、16、32、64倍）的稀释，稀释好的标本分别测定2次，收集实验数据，计算理论值以及相对偏倚。

3.4.2 判定标准 相对偏倚小于10%的稀释倍数为最大稀释倍数；临床可报告范围（clinical reportable range，CRR）＝线性范围×最大稀释倍数。

3.5 参考区间验证

本室参考范围选用《全国临床检验操作规程》／厂商推荐的项目参考范围。

3.5.1 方法 参考CLSI C28-A2文件［6］，从我院体检人群中收集40例肝、肾功能及脂类项目结果均正常的健康人血清标本，年龄16～56岁，其中男20例，女20例，使用本实验室检测系统进行检测，并计算比值R。

3.5.2 验证判断R＝测定结果在参考范围内的例数／总测定例数≥90%表示该项目参考区间验证合格。

3.6 比对试验

3.6.1 样本测定 按照EP9-A3文件［7］要求，分别在日立7600和迈瑞BS-800M上随机测定40份血清肌酐样本（覆盖高、中、低浓度，在测定范围内尽量平均分布），每份样本每种方法单次测定，并记录测定结果。测定之前对仪器进行校准，室内质控在控。

3.6.2 离群值检查 按照EP9-A3文件要求及文献［8］内容中描述的广义极端学生化偏差（ESD）方法对测定结果进行离群值检查。

3.6.3 方法比对与偏倚评估 绘制散点图、偏差图，根据数据特征选择合适的回归分析模型（OLR、WLS、Deming、Passing-Baklok）拟合回归方程，然后计算各个参数在给定值处的偏倚，以小于1／2TEa（±6.0%）为可接受标准。

4 统计学处理

采用Microsoft Excel 2007、SPSS 25.0软件分析数据。计量数据以均数±标准差表示，回归和偏移分析采用WLS模型计算，显著性检验采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 精密度验证结果

批内精密度 ＜1／4Tea，实验室内不精密度 ＜1／3Tea，符合质量要求。见表1。

表1 精密度验证结果

2 正确度验证结果

5个EQA调查品的相对偏移为0.33%～3.51%，均 ＜1／2 TEa，符合质量目标要求。见表2。

表2 正确度验证结果

3 线性范围验证结果

b＝1.025（在0.97～1.03范围内），R2＝0.999≥0.95，可接受的线性范围为13.16～8206.5μmol／L。见图1。

图1 Cr线性分析

4 临床可报告范围验证结果

临床可报告范围验证结果，见表3。

表3 可报告范围验证结果

从表3可见，1：16稀释度的相对偏倚小于10%，表示我科所检测CR的最大稀释倍数为16倍，临床可报告范围为13.16～13 1304μmol／L。

5 参考区间验证结果

通过对男女各20例健康体检者的血清肌酐进行测定并统计分析，分别有19例（R≥90%）在各参考区间内，验证通过，表明本实验室引用的参考区间符合临床要求。

6 比对试验

6.1 离群值检验 对40份标本检测结果绘制散点图，目测结果可见有一个明显异常值点，采用ESD法进一步检验后确认该结果为离群值，剔除后，补充相近水平标本，重新分析，未发现有离群值点。

6.2 方法比对和偏倚评估

6.2.1 偏差图的潜在特征分析 参照EP9-A3文件对无离群值的40组结果绘制偏差图。偏差图结果显示，日立7600和迈瑞BS-800M肌酐检测结果间的差值，具有恒定的CV变化，采用WLS回归分析，偏差图见图2。

图2 迈瑞BS-800M和日立7600检测Cr水平偏倚

6.2.2 偏倚评估 根据特征分析，采用WLS回归分析，回归方程及其各参数结果见表4，将肌酐的医学决定水平40、141、530μmol／L分别代入回归方程，其偏移结果见表5。

表4 日立7600和迈瑞BS-800M检测Cr比对回归方程及各参数结果

表5 日立7600和迈瑞BS-800M检测Cr比对回归模型医学决定水平处的偏移结果

讨 论

在我国，部分实验室为节药成本采用非配套试剂，导致检测系统缺乏完整性，按要求这些实验室均应对检测系统的有关性能参数进行评估［9］。由于我院酶法肌酐检测试剂为非配套试剂，为了了解我院肌酐检测系统的性能状况，以便更好的为临床诊断和治疗提供有效的参考，我们依据国内外有关性能评价的文件和报道，结合临床工作实际，对其精密度等性能进行验证。

在进行标本检验时，通常1次检验即发出报告，对检测系统精密度要求较高。本组研究结果显示，批内精密度＜1／4Tea，实验室内不精密度 ＜1／3Tea，符合质量要求，说明检测系统的精密度良好，测定结果稳定。

在实际工作中，由于大部分实验室的检测系统都是非配套系统，以及有证参考物质价格昂贵且不好购买等，使得正确度验证操作起来有一定难度，为此，我们参考有关文献［10］，将卫生部室间质评检测结果与靶值进行相关性分析，从而进行正确度验证，结果显示，卫计委临检中心发放的EQA调查品5个水平与靶值的相对偏倚为0.33%～3.51%，均＜1／2 TEa，符合质量目标要求。

线性范围验证结果显示，该检测系统可接受的线性范围为13.16～8206.5μmol／L，且b＝1.025（在0.97～1.03范围内），R2＝0.999≥0.95，说明测定值与理论值符合性良好。经过验证，得出该检测系统的最大稀释倍数为16倍，临床可报告范围为13.16～131304μmol／L。参考区间验证结果显示，本研究男女各20例健康体检者的血清肌酐中各有19例（R≥90%）在参考区间内，提示参考区间符合临床要求。

在保证检测系统分析性能符合质量要求的前提下，质量管理的主要目标是实现同一项目在不同检测系统间具有可比性，而通过比对实验，是实现准确度溯源和患者标本检验结果可比性的重要途径之一［11］。本研究中迈瑞BS-800M肌酐检测系统具有量值溯源性，故可作为我院肌酐检测系统溯源性和比较的目标，我们采用最新的EP9-A3文件评估两个检测系统的可比性，结果显示：在散点图中可见有一个明显异常值点，采用ESD法进一步检验后确认该结果为离群值，将其剔除，并补充相近水平标本，重测未发现离群值点；偏差图结果显示，迈瑞BS-800M和日立7600肌酐检测结果间的差值，具有恒定CV的变化，采用WLS回归分析，结果显示斜率的95%CI为0.9738～0.9743，截距的95%CI为2.3149～3.6875，比例偏移为-2.62%～-2.57%，小于可接受标准；在不同的医学决定水平处，两个检测系统的偏倚也均小于可接受标准，表明两个检测系统的检测结果具有高度一致性。

综上所述，该国产酶法肌酐检测试剂在日立7600全自动生化分析仪上的分析性能良好，具有极好的精密度、正确度和较宽的线性范围，与迈瑞BS-800M肌酐检测结果具有良好的一致性，因此可满足临床应用需求。