不孕患者生殖道病菌分布特征及耐药性分析

潘 宁，蒋贤高，刘赛朵，叶新春，吴正兴，周月影，施伎蝉

(温州市第六人民医院传染科，浙江 温州 325000)

近年来，女性不孕人数在明显增多。据资料显示，全球患病率约达20%[1]，我国患病率约为3.56%[2]。有研究发现，生殖道感染是造成我国女性不孕的主要原因之一[3]。但感染菌群种类繁多，具体是哪类菌群导致女性不孕，目前尚未有定论。在临床上，医生常常在未清楚病菌的基础下急于治疗，致使出现抗菌药使用不合理性，影响治疗效果，从而也促使病菌耐药率不断增高。为此，探明其感染病菌分布特征，找到生殖道感染导致女性不孕的菌群，对临床上治疗女性生殖道感染疾病具有重要指导价值。为此，本研究通过对不孕女性生殖道感染病菌分布特征及耐药性进行分析，旨在为不孕女性生殖道感染治疗提供经验及参考。现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2015年3月至2018年8月期间在温州市第六人民医院诊治的不孕女性生殖道感染患者作为研究对象。纳入标准：①入选患者符合美国生殖医学会(American Society for Reproductive Medicine，ASRM)指南对不孕症的诊断标准，正常性生活1年及以上，未采取避孕措施而不孕女性[4]。②生殖道感染的诊断标准参照《妇产科学》[5]。阴道分泌物明显增多或异味、外阴瘙痒，诊断为滴虫性阴道炎、非特异性阴道炎、细菌性阴道病、衣原体感染、慢性宫颈炎及阴道清洁度Ⅲ～Ⅳ度，符合以上任意一种症状或疾病者。③在取样1个月前均未使用过抗菌药物或免疫制剂。④患者知情、自愿签署知情同意书。排除标准：①原发不孕者。②临床资料不全者。③合并有免疫系统、血液系统疾病者，合并严重妇科肿瘤者。符合纳入和排除标准的患者共158例，年龄为25～36岁，平均年龄(31.34±5.32)岁；病程7天～6个月，平均病程(3.62±1.01)个月；不孕时间2～6年，平均不孕时间(3.11±0.67)年。不孕种类：原发性不孕92例、继发性不孕66例。本研究已经我院伦理委员会批准同意，且所有研究对象均知情、自愿签署知情同意书。

1.2方法

1.2.1标本采集

参照《全国临床检验操作规程》(第4版)[6]：使用无菌棉签清除阴道口分泌物后，用无菌棉拭子置入阴道管内约1cm处，顺时针旋转1圈取出，放置备检专用一次性无菌试管(型号421180)内，立即送实验室培养。取宫颈管内分泌物送检支原体。

1.2.2病菌鉴定

严格按我国临床检验规程对临床标本进行培养、分离鉴定，使用检测室的自动微生物鉴定仪(北京中西远大科技有限公司FB13-BOEN-3833型)及配套的鉴定板进行鉴定，鉴定人员为微生物实验室专科人员。使用细菌检测卡明确细菌种类、根据支原体培养基颜色变化判断支原体是否阳性。

1.2.3药敏试验

参照世界卫生组织推荐的纸片扩散法，根据美国临床实验室标准协会(NCCLS)颁布的标准进行判断。质控菌株为铜绿假单胞菌ATC27853、大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923，均来自我国卫生部临床检验中心。所有药敏试剂盒均购自温州康泰生物公司，严格按照说明书进行操作。

1.3观察指标

详细观察和记录引起不孕女性生殖道感染的病菌分布、病菌的分离鉴定数据、药敏试验数据。

1.4统计学方法

用检出率及构成比对结果进行描述。

2结果

2.1不孕女性生殖道感染的病原学检测情况

对158例不孕女性生殖道感染病原学检测发现菌株406株，生殖道感染病菌主要包括支原体、细菌、真菌，其中支原体检测出249株(61.33%)、细菌检测出129株(31.77%)、真菌检测出28株(6.90%)，见表1。

表1 不孕女性生殖道感染的病原学检测构成比

2.2不同药物对主要支原体菌株的耐药试验情况

经药敏试验发现，解脲支原体152株(37.44%)、人型支原体67株(16.50%)对氧氟沙星、红霉素及环丙沙星的耐药性较强，耐药率>80%，但二者对强力霉素、原始霉素、交沙霉素、替考拉宁及米诺环素的耐药性较低，耐药率<10%，见表2。

表2 不同药物对主要支原体菌株的耐药试验结果

2.3不同药物对主要细菌菌株的耐药试验情况

经药敏试验发现，表皮葡萄球菌33株(8.13%)、金黄色葡萄球菌29株(7.14%)及肠杆菌44株(10.84%)对红霉素、环丙沙星的耐药性较强，耐药率>70%，但三者对多西环素、原始霉素、强力霉素、交沙霉素、替考拉宁的耐药性较差，耐药率<10%，见表3。

表3 不同药物对主要细菌菌株的耐药试验结果

2.4不同药物对主要真菌菌株的耐药试验情况

经药敏试验发现，白色假丝酵母菌14株(3.45%)、克柔假丝酵母菌9株(2.22%)对酮康唑的耐药性较强，耐药率>80%，但二者对克霉唑的耐药率为0，见表4。

表4 不同药物对主要真菌菌株的耐药试验结果

3讨论

3.1不孕女性生殖道感染的危害

不孕女性生殖道感染是一种常见妇科病，其感染种类多，且流行面广，其引发感染主要是因为女性阴道内的微生态出现失衡，受到病菌侵袭所致。有研究发现，与生殖道感染有关的女性不孕所占比例约达30%～50%[7]，其临床主要表现为白带增多、白带异味、外阴瘙痒等，严重影响女性日常生活和身心健康。

3.2不孕女性生殖道感染病菌的分布特征

阴道分泌物检查是常见的实验室检查项目，也是监测女性生殖道感染的病菌分布特征及耐药性的重要手段。本研究通过采集158例不孕女性生殖道感染者的生殖道分泌物进行培养、鉴定发现，不孕女性生殖道感染的病菌构成呈多元化趋势。本资料中支原体菌群最多(249株，占61.33%)，其次是细菌(129株，31.77%)和真菌(28株，6.90%)，而在支原体菌群中，解脲支原体和人型支原体所占株数最多；细菌中的菌群占数最多的主要为肠杆菌、表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌；真菌在所有病菌菌群中占数最少。这表明本地区的不孕女性生殖道感染的病菌种类多样，以解脲支原体和人型支原体为多见[8]，这与国外的研究[9-10]结果一致。

3.3不孕女性生殖道感染病菌的耐药性现状及原因分析

目前，抗生素是治疗支原体感染与细菌感染的主要手段，但我国各地的支原体感染及细菌感染对喹诺酮类药物均具有较高的耐药性。上海地区，解脲支原体、人型支原体感染对喹诺酮类药物具有较强的耐药性，其中环丙沙星在单纯解脲支原体感染中的耐药率居首位，红霉素在单纯人型支原体感染中的耐药率居首位[11]；在北京也是如此[12]。解脲支原体、人型支原体混合感染的耐药性最强的主要为环丙沙星、红霉素、氧氟沙星。在连云港地区，女性生殖道感染(细菌)中的肠杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌均对环丙沙星的耐药率达80%以上，对红霉素的耐药率达到60%以上[13]。这些菌群在天津地区[14]对阿奇霉素、红霉素、四环素耐药率也很高。导致支原体感染与细菌感染耐药性较强的原因，可能与临床上经验性用药、未及时治疗，剂量、频次不规范用药及反复性交叉感染等因素有关。本研究发现，解脲支原体、人型支原体病菌对红霉素、环丙沙星、氧氟沙星的耐药率达80%以上，但对强力霉素、米诺环素、交沙霉素、原始霉素这些药物的耐药性较低；肠杆菌、金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌对环丙沙星和红霉素的耐药率>70%，但三者对多西环素、原始霉素、强力霉素、交沙霉素、替考拉宁的耐药性较差，耐药率<10%。因此，临床上进行抗感染治疗时，应结合药敏试验，选择这些耐药性低的药物治疗，可能会获得更佳的治疗效果。女性生殖道受真菌感染时，其生殖道分泌物呈“豆腐渣样”改变，患者常伴有明显外阴灼痛感、瘙痒，易反复性发作、较难根治[15-16]。近年来，随着抗真菌药物在临床上的大量应用，病菌(真菌)的耐药率也在不断上升[17-18]。在贵阳地区，女性生殖道感染(真菌)对酮康唑、伊曲康唑的耐药率为50%[19]。本研究中白色假丝酵母菌和克柔假丝酵母菌对酮康唑的耐药性也很高(达80%以上)，对克霉唑耐药率为0。女性生殖道感染(真菌)耐药性较强的原因可能与临床仅凭经验用药，急于采取治疗有关，致使容易出现高耐药率。这提示临床医生在给患者用药治疗前，应高度重视生殖道感染病菌的鉴定与药敏检验，根据检验结果选取合理的治疗药物，才能有效抑制病菌，减少耐药菌株的产生。对于携带病菌而无临床症状的患者，更不应急于过度治疗，以免适得其反，造成不可挽回的严重后果。

综上所述，不孕女性生殖道感染主要是支原体，其次是细菌、真菌。这些病菌对某些常用的抗感染药物具有较强的耐药性。因此，临床上需针对不孕女性生殖道感染病菌药敏试验来制订合理的治疗对策。