康复医院397例痰培养病原菌分布及药敏分析

汤 进

（沭阳铭和康复医院，江苏 宿迁 223600）

痰培养为临床常用病原微生物诊断方法，多以自然咳痰法或气管插管吸痰法选取痰液标本，其中自然咳痰法收集标本时，痰液经上呼吸道时可能受到正常菌群污染；气管插管法多用于难以自主咳痰者。随着抗菌药物大量使用，呼吸道感染病原菌越发复杂，细菌耐药性逐渐提升，因此监测呼吸道病原菌种类及耐药性极为重要[1]。本文以397例痰培养标本为样本，分析病原菌分布情况及耐药性，报告如下。

1 资料和方法

1.1 资料

时间2019年10月-2020年10月，共选取397例痰培养标本。选入标本均为合格标本，所有样本鳞状上皮细胞均≤10个，白细胞均≥25个，或上述指标比例低于1∶2.5为合格标本。研究经伦理委员会批准。

1.2 方法

采集标本方案：可自主咯痰者，收取晨起第一口痰液，随后准备清水反复漱口，指导患者经气管深处咳痰，收集标本置入无菌痰杯内进行检查，难以自主咳痰者，利用导管吸取病灶附近痰液进行检查，注意检查需在获取痰液标本后2h内进行[2]。

细菌培养、鉴定与药敏实验方案：获取痰标本后开展涂片检查，确定涂片白细胞数量与上皮细胞数量，评判标本是否合格。若标本合格将痰液按无菌操作在生物安全柜中，接种到准备好的哥伦比亚血琼脂培养基、巧克力培养基、沙保罗培养基及麦康凯培养基放培养箱中进行培养，细菌培养成功后，挑选单个菌落制成细菌悬液加入相应的生化药敏鉴定条里面，培养18-24小时后，加入相应的辅助试剂，35℃孵育10分钟，利用恒星HX-21B细菌鉴定药敏分析仪鉴定[3]。 肠杆菌、非发酵菌、肠/链球菌、葡萄球菌和酵母样真菌等分别选取恒星科技开发有限公司的相应的药敏条及药敏试剂盒进行检测。

1.3 统计学研究

SPSS 21.0对选入397例痰培养标本数据进行计算，%、±s记录计数、计量指标变化，检验方案为x2、t。P＜0.05具备统计学差异。

2 结 果

2.1 分析痰标本内病原菌分布

送检397例痰培养标本中，共检查75株病原菌，占比18.89%，其中58株为革兰阴性杆菌，占比77.33%，分别为7株鲍曼不动杆菌、4株产碱假单胞菌、4株产气肠杆菌、1株大肠埃希菌、2株恶臭假单胞菌、2株格高菲肠杆菌、1株聚团肠杆菌、1株卡他莫拉菌、4株洛菲不动杆菌、1株食神鞘氨醇杆菌、1株嗜麦芽窄食单胞菌、15株铜绿假单胞菌、7株洋葱伯克霍尔德菌、3株液化沙雷菌、1株荧光假单胞菌、1株粘质沙雷菌、1株尿道寡源菌、2株肺炎克雷伯菌 ；9株为革兰阳性球菌，占比12.00%，分别为1株肠球菌属、1株华纳葡萄球菌、2株金黄色葡萄球菌、2株藤黄微球菌、1株猪葡萄球菌、2株松鼠葡萄球菌；8株为真菌，占比10.67%，分别为5株白色念珠菌、1株季也蒙念珠菌、2株近平滑念珠菌。

2.2 前三位革兰阴性杆菌抗生素耐药性分析

药敏结果显示，大部分革兰阴性杆菌对头孢硫脒、庆大霉素及左氧氟沙星耐药性较高，铜绿假单胞菌对复方新诺明及头孢硫脒耐药性较高，分别占比93.3%、93.3%；鲍曼不动杆菌对环丙沙星及头孢硫脒耐药性较高，分别占比71.4%、100%；洋葱伯克霍尔德菌对环丙沙星、庆大霉素及头孢硫脒耐药性较高，分别占比85.7%、71.4%、71.4%。见表1。

表1 前三位革兰阴性杆菌抗生素耐药性分析表（n,%）

2.2 前三位革兰阳性球菌抗生素耐药性分析

药敏结果显示，革兰阳性球菌对阿莫西林/克拉维酸、苯唑西林、青霉素耐药性较高，其中金黄色葡萄球菌，藤黄微球菌、松鼠葡萄球菌等革兰阳性球菌耐药性分析见表2。

表2 前三位革兰阳性球菌抗生素耐药性分析

3 讨 论

近年来，痰培养诊断逐渐应用于临床，本次研究要求患者反复漱口后咳出深部痰液，以降低正常菌群对定值菌污染，获取高质量痰液标本，提升检出准确率[4]。随着我国抗菌药物滥用率逐年增加，肺部病原菌菌谱与药物敏感性随之变化，结合本次研究分析，397例痰培养标本检出率为18.89%，病原菌多为革兰阴性杆菌，占比77.33%，且近年来仍呈上升趋势，其中铜绿假单胞菌菌株分离最多，其次为鲍曼不动杆菌与洋葱伯克霍尔德菌；检出革兰阳性球菌占比12.00%，主要以金黄色葡萄球菌，藤黄微球菌、松鼠葡萄球菌为主。本次研究病原菌中检出率最高菌株为铜绿假单胞菌，耐药机制复杂，因此治疗此类病菌时，需结合药敏结果进行联合抗菌药物治疗，严格遵循药物分级原则选取药物治疗。此外，本次研究中，检出真菌占比10.67%，分析原因可知，真菌感染与抗生素滥用率增加、患者自身免疫力降低导致致病性真菌感染或服用激素及免疫抑制剂类药物导致器官损伤有关，因此临床需重视鉴别真菌感染，降低患者死亡风险[5]。

综上所述，痰培养标本中革兰阴性杆菌占比较高，常见类型为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、洋葱伯克霍尔德菌，对头孢硫脒、庆大霉素及左氧氟沙星耐药性较高，而革兰阳性球菌对阿莫西林/克拉维酸、苯唑西林、青霉素耐药性较高，与滥用抗生素类药物密切相关。因此要求临床医师掌握细菌多变性，未明确病原菌时谨慎用药，同时密切配合检验科人员，及时获取病原菌报告及药敏试验结果，以便为临床安全用药提供依据，进而减少耐药菌株、降低菌群失调情况[6]。