11376例呼吸道感染9种病原体检测结果分析

2020-06-29 07:43成守金许贺春赵丽萍
实验与检验医学 2020年3期
关键词:病原体检出率荧光

成守金,许贺春,赵丽萍

(焦作煤业(集团)有限责任公司中央医院,河南 焦作 454000)

呼吸道感染是临床常见疾病,通常由病毒、细菌、支原体、衣原体、立克次体等病原微生物引起,在不同地区引起呼吸道感染的病原体有一定的差异, 为了解焦作地区呼吸道感染病原体的分布情况,我们对11376 例呼吸道感染患者血液中LP 等9 项病原体IgM 抗体进行了测定,报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料 2016 年 1 月至 2018 年 12 月我院门诊和住院呼吸道感染患者11376 例, 其中男6829 例,平均年龄 48.2±6.5 岁,女 4125 例,平均年龄 44.2±5.8 岁。

1.2 仪器与试剂

1.2.1 BX51TR-32FB3-F01 正置荧光显微镜 日本奥林巴斯

1.2.2 试剂 西班牙VIRCELL 公司生产的荧光免疫分析试剂盒(国食药监械(进)字2010 第3400 365 号)。

1.3 试验方法

1.3.1 标本要求 采用无菌消毒技术抽取调查对象静脉血 2ml,2h 内分离血清(3500r/min,离心 5min),超过4h 未检测标本放入2~8°C 冷藏保存, 保存时间不超过48h。

1.3.2 采用间接免疫荧光技术,严格按照操作规程进行操作。

1.3.3 阳性结果判定 可以观察到ADV、流感病毒、RSV 或PIVS 的包被孔中有1~15%细胞的细胞核、胞浆或胞膜出现绿色荧光;LP、CP 或COX 中所有的细菌呈现出绿色荧光;MP 对阳性血清在细胞外围呈现绿色荧光。

1.3.4 标本阴性结果判定 可观察到 LP、CP 和COX 无荧光出现,视野清洗干净,MP、ADV、IFA 和IFB、RSV 和PIVS 呈现清晰红色,无绿色的荧光出现。

1.4 1 年4 季的划分 以公历时间为准,每年的3月 1 日-5 月 31 日为春季;6 月 1 日-8 月 31 日为夏季;9 月 1 日-11 月 30 日为秋季;12 月 1 日-2月28 日为冬季。

1.5 年龄组划分 将调查对象分为0~6、6.1~18、18.1~60 以及>60 岁的人群进行分析。

1.6 统计学处理 采用SPSS 12.0 版本软件建立数据库,样本间率的比较用χ2检验,表1 数据采用单因素方差分析,P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 11376 例呼吸道感染患者不同病原体检测结果 在纳入统计的11376 例呼吸道感染患者中,9种病原体检测阳性率为 64.98%(7392/11376),其中单项病原体检出率为 48.89%(5676/11376);混合感染率为 15.08%(1716/11376),其中 2 项、3 项、4 项病原体混合感染检出率依次为7.91%(900/11376)、4.80% (546/11376)、2.37% (270/11376)。引起本地区呼吸道感染的病原体主要为MP、IFB、LP 和 PIVS 感染,占总感染率的 88.9 %,见表1。

2.2 不同季节呼吸道感染9 项病原体检测结果比较 在春夏秋冬的不同季节,LP、MP、RSV、IFB 四种病原体检出率有明显不同(P<0.01),其他几种检出率均无显著性差异(P >0.05),见表2 。

2.3 不同性别呼吸道感染9 项病原体检测结果比较 不同性别间呼吸道感染人群9 种病原体检出率无明显差异(P>0.05),见表3。

2.4 不同年龄呼吸道感染人群9 项病原体检测结果比较 在不同年龄人群中,LP、MP、RSV、ADV、IFB 以及 PIVS 检出率有明显差异(P<0.01)而其他几种病原体检出率无明显差别(P>0.05),见表4 。

3 讨论

能够引起呼吸道感染的病原体种类较多,不同的病原体感染人体后的临床症状相似,仅靠临床表现很难进行区分,从而很难使患者达到早期的诊断和治疗,因此必须依靠实验室进行检测区分病原体的类型,从而合理选择有效的药物,避免抗生素的浪费,使患者达到早日康复 。

研究显示, 本地区呼吸道感染9 项病原体的IgM 抗体总检出率为64.95%,高于国内其他学者报告水平[1-4],这可能与不同地区的气候环境、空气质量差异及检测方法不同有关。在引起呼吸道感染的病原体中,MP 高居榜首, 说明肺炎支原体仍然是引起呼吸道感染的首要原因,这与荀春华报道一致[5]。MP 是一类无细胞壁,可通过滤菌器的原核细胞型微生物,由于其特殊的尖端结构可以粘附于上皮细胞表面受体上,并释放有毒的代谢产物使宿主上皮细胞纤毛运动减弱,从而导致了细胞的受损。MP 在本地区1 年4 季呼吸道感染人群中均可以检出,夏、秋季高于冬、春季节,这与以往的报道不尽相同,国内荀春华、孙惠泉、涂智杰等分别对九江、苏州及景德镇等地区MP 的感染做过分析,MP的高检出率在秋冬季节[6,7]。分析原因,可能与我们的地理位置环境有关,本地区属于典型的暖温带湿润季风气候,夏季降水充沛,空气湿润,适合MP 的生长,也可能与我们选择的人群有关。

表1 9 种病原体单项及混合感染检出情况一览表

表2 不同季节呼吸道感染9 项病原体检测结果比较[例数(%)]

表3 不同性别呼吸道感染9 项病原体检测结果比较[例(%)]

表4 不同年龄呼吸道感染人群9 项病原体检测结果比较[例数(%)]

研究显示,本地区呼吸道感染患者中病毒检出率较高,占病原体检出的50.16%,在所检测到的5种病毒中,检出率依次为 IFB(29.02%)、PIVS(12.58%)、RSV(5.92%)、ADV(2.38%)、IFA(0.26%)。这与国内郑辉、李芸报道的较为一致[8,9]。流感病毒是一种易造成人类及动物患流行性感冒的RNA 病毒。传染性极强,人群普遍易感,以患者和隐形感染者作为主要传染源由呼吸道飞沫传播,侵入宿主的呼吸道粘膜上皮细胞,经不断地复制和重组,导致宿主细胞变性、坏死、脱落[10,11]。由于乙型流感病毒表面的抗原具有一定的变异性,因此容易引起局部、中小型的流行,发病率较高。

需要值得注意的是,本地区呼吸道感染患者军团菌检出率较高,在呼吸道1 年4 季的检出率依次为冬、夏、秋、春季,这与国内其他学者报道的不一致[12,13]。国内一般研究认为,LP 最易高发季节在夏季,原因可能是由于近年来中央空调的使用日益普及,不管是工作单位的集体供暖,还是家庭住宅的商品房里冷风、暖风的统一供应,都为LP 的传播提供了便利的条件,随着目前中央空调的大量推广使用,嗜肺军团菌可能通过其冷凝水导致上呼吸道感染型军团菌病的病例日渐增多,同时LP 也是引起院内感染的重要病原体之一。这非常值得引起我们的高度重视,怎样才能使我们享受中央空调舒服便利的同时又能有效预防军团菌的发生是一个重要的课题。

研究显示,不同性别呼吸道感染人群9 种常见病原体检出率虽略有不同,但无显著性差异,通过对本地区不同季节呼吸道感染人群中病原体感染分析,虽然病原体总的检出率没有显著性差异,但病原体感染的种类不同, 春季以IFB、MP 和PIVS为主,夏季以 MP、LP 和 PIVS 为主,秋季以 MP、LP和 RSV 为主。有 6 种病原体(LP、CP、RSV、ADA、IFA、IFB) 在冬季检出率明显偏高, 尤其是病毒感染,冬季更是高发季节。究其原因,主要是冬季北方气温较低,人们习惯聚集在室内而大量减少了户外活动,这为增加疾病的传染创造了有利条件。在严寒的冬季,人们为了抵御寒冷,往往开着暖气、紧闭门窗,这样室内外的空气很难流通,在相对静止、温度适宜的室内空气的有利条件下,病原体在空气中大量生长繁殖,加上由于人们在室内停留的时间较长, 因此便导致了呼吸道感染性疾病的发生。

研究显示,不同年龄组人群病原体检出率有明显差别,LP、MP、RSV、ADV、IFB、PIVS 在学龄前儿童及老年人群检出率明显高于其他年龄段人群,一方面是因为婴幼儿的免疫功能不健全,抵抗力较差,幼儿园的集体生活环境易造成相互交叉感染;另一方面由于老年人免疫力较低,导致呼吸道粘膜上皮细胞清除异物的能力偏低,一旦有细菌、病毒侵入,很难靠自身免疫力清除,从而引起呼吸道感染的发生,引起比较严重的临床症状[14-16]。

总之,作为一种常见病、多发病,对于呼吸道病原体感染引起的呼吸道疾病,我们一定要提高警惕,引起重视,坚持以预防和治疗相结合的原则,减少其流行的机会,对已经发生呼吸道感染性疾病的患者,一定要及早进行病原体的IgM 抗体检测(IgM是机体受到抗原刺激后产生体液免疫应答过程中最早产生的抗体),以便使患者早日达到正确的诊断和治疗,避免抗菌药物的滥用。

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