GC法测定二益丸中乙酸龙脑酯的鉴别方法研究＊

丁 辉，朱仁愿，邱国玉，李 岩，姬良亮，刘兴国

（兰州市食品药品检验所，甘肃 兰州 730050）

二益丸是国家中药保护品种，其处方砂仁等22味中药加工制成；具调经止带，温暖子宫之效；临床用于经脉不调，行经腹痛，淤血痨症，下元虚寒，腰膝酸痛，赤白带下。二益丸收载于卫生部标准中药成方制剂第一册，质量控制内容仅包括制剂通则、性状检查、显微鉴别和丁香酚的薄层鉴别，无法充分保证制剂的安全有效。本研究根据《中国药典》《中药新药质量标准研究的技术要求》等文件要求，对二益丸的质量标准进行提高研究，旨在为二益丸建立简便可控的质量标准，确保药品的安全有效，为企业制定制剂质量的内部控制标准，同时为上升国家标准提供参考。

砂仁属名贵中药材，《中国药典》2015年版[1]中通过测定乙酸龙脑酯的含量对其质量进行控制。二益丸处方中亦有砂仁，本研究采用气相色谱法，通过大量实验摸索，确定了乙酸龙脑酯鉴别方法，保证了二益丸的质量。

1 仪器及试药

日本岛津GC-2010plus型气相色谱仪；德国赛多利斯BSA224S-CW型万分之一电子分析天平，瑞士梅特勒MS105DU型十万分之一电子分析天平；宁波新芝生物科技SBL-10DT型超声清洗仪（功率300W，频率 50kHz）。

乙酸龙脑酯对照品（110759-201105，纯度：99.6%），购自中国食品药品检定研究院；无水乙醇为分析纯。二益丸：规格为4g/丸；生产厂家为兰州佛慈制药股份有限公司；批号分别为17H5、17H6、17H7、17H8、18A1、18A2、18A3、18A4、18A5、18F9。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：安捷伦DB-1毛细管柱（柱长为30m，内径为0.25mm，膜厚度为0.25μm）；载气和尾吹气均为氮气；色谱柱流量：3.00mL·min-1；柱温为程序升温（见表 1）；进样口温度 230℃，检测器（FID）温度250℃，氢气和尾吹气流量：40mL·min-1，空气流量：400mL·min-1；不分流模式；进样量：1μL；理论塔板数按乙酸龙脑酯峰计不低于10000，分离度大于1.5。

表1 程序升温模式

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液

称取乙酸龙脑酯对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每lmL含0.3mg的溶液。

2.2.2 供试品溶液

取二益丸供试品，剪碎，混匀，取约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入无水乙醇20mL，密塞，超声处理30min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液既得。

2.2.3 阴性对照溶液

按处方量配制缺砂仁药材的阴性对照样品，按2.2.2项下方法制备阴性对照溶液。

2.2.4 全药材对照溶液

按处方量称取22味药材粉末配制全药材对照样品，按2.2.2项下方法制备全药材对照溶液。

2.2.5 砂仁（盐炙）对照药材溶液

称取砂仁（盐炙）药材0.1g，按2.2.2项下方法制备砂仁（盐炙）对照药材溶液。

2.2.6 空白溶液

取无水乙醇按2.2.2项下方法制备空白溶液。

2.3 溶液测定

取“2.2”项下制备的对照品溶液、全药材对照溶液、砂仁（盐炙）对照药材溶液、供试品溶液、阴性对照溶液和空白溶液按照“2.1”项下色谱条件进行测定，测定结果如图1所示。

图1 各溶液GC色谱图

2.4 样品测定

取10批次二益丸供试品按照“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，并按“2.1”项下色谱条件进行测定，测定结果如图2所示。

图2 供试品溶液GC色谱图

3 讨论

二益丸处方包含22味中药材，其中砂仁属于较为名贵的中药材，但是现行质量标准较为简单，没有针对砂仁的相关控制项目，无法有效保障药品质量。本研究采用气相色谱法对处方中砂仁的指标性成分乙酸龙脑酯进行定性鉴别，处理方法操作简单，结果可靠，适于二益丸的质量控制。

二益丸因处方中药味较多，化学组分复杂，采用GC方法对砂仁中乙酸龙脑酯进行定性鉴别时，考虑到分离度因素，故柱温采用程序升温模式。通过大量实验，不断优化，最终确定为：初始温度50℃，保留5min，然后以2℃每min的速率升温至130℃，保留5min；在该色谱条件下，基线平稳，各组分分离度较好。

测定结果显示，对照品溶液、全药材对照溶液、砂仁（盐炙）对照药材溶液和供试品溶液中，在28.330min位置处均有相应的色谱峰，即乙酸龙脑酯色谱峰；而阴性对照溶液和空白溶液在该位置无色谱峰，表明该方法结果准确。