24%虱螨脲·虫螨腈悬浮剂的高效液相色谱分析

李二润*，路超亚

(宁波三江益农化学有限公司，宁波 315204)

虱螨脲(lufenuron)是一种高效、安全、广谱的苯甲酰脲类杀虫剂，是昆虫蜕皮抑制剂，抑制昆虫几丁质的合成，主要用于防治棉花、果树、玉米等鳞翅目害虫幼虫[1-2]。虫螨腈(chlorfenapyr)是一种芳基吡咯类杀虫杀螨剂，由天然抗生素改造合成。其作用于害虫体内细胞线粒体上，破坏细胞内的能量产生过程，从而使细胞衰竭，最终导致害虫死亡。该药具有杀虫谱广，高效，与其他杀虫药剂无交互抗性，对作物安全，对抗性害虫防效优异等特点[3-4]。目前，虱螨脲、虫螨腈单剂或与其他药剂复配制剂的检测方法已有报道，但二者复配产品的检测方法未见报道。本文采用反相高效液相色谱法对24%虱螨脲·虫螨腈悬浮剂中的虱螨脲和虫螨腈同时进行分离测定。

1 试验部分

1.1 仪器和试剂

美国安捷伦 HP1200型高效液相色谱仪，具有可变波长紫外检测器；150×4.6 mm(i.d.)不锈钢柱，内装Eclipse XDB-C18，粒径5 µm；KH7200DE超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)；BSA224S万分之一电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司)；甲醇(色谱纯)；水(二次重蒸馏)；虱螨脲标样(纯度≥98.0%)，虫螨腈标样(纯度≥98.0%)；24%虱螨脲·虫螨腈悬浮剂(5%虱螨脲+19%虫螨腈，由宁波三江益农化学有限公司研制)。

1.2 色谱操作条件

流动相：甲醇∶水＝75∶25(体积比)；检测波长：254 nm；流速：1.0 mL/min；进样体积：5 µL；柱温：室温。虫螨腈的保留时间约为7.8 min；虱螨脲的保留时间约为10.9 min。

上述色谱操作条件系典型操作参数，检测时可根据不同仪器特点，对方法中给定的操作参数作适当的调整，以获得最佳效果。虱螨脲、虫螨腈标样和24%虱螨脲·虫螨腈悬浮剂的典型的液相色谱图见图1、图2。

图1 虱螨脲、虫螨腈标样的高效液相色谱图

图2 24%虱螨脲·虫螨腈悬浮剂的高效液相色谱图

1.3 溶液配制

1.3.1 标样溶液的配制

分别称取虱螨脲标样0.03 g、虫螨腈标样 0.08 g(精确至0.000 1 g)，置于100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解，再用超声波振荡5 min使标样充分溶解，摇匀，定容至刻度。

1.3.2 试样溶液的配制

准确称取试样 0.4 g (精确至 0.000 02 g)，置于100 mL容量瓶中，加入适量流动相溶解，再用超声波振荡5 min使试样充分溶解，摇匀，定容至刻度，过0.45 µm有机系滤膜，待测。

1.4 测定

在上述色谱操作条件下，待仪器运行稳定后，先注入数针标样溶液，当连续两针进样的峰面积相对偏差不大于1%时，再进行定量分析。按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液顺序进样。

1.5 计算

将测得的2针试样溶液及试样溶液前后2针标样溶液中虱螨脲(虫螨腈)的峰面积分别进行平均，试样中虱螨脲(虫螨腈)质量分数X按下式计算：

式中：A1为标样溶液中虱螨脲或虫螨腈峰面积的平均值；A2为试样溶液中虱螨脲或虫螨腈峰面积的平均值；m1为虱螨脲或虫螨腈标样的质量，g；m2为试样的质量，g；P为标样中虱螨脲或虫螨腈的纯度，%。

1.6 允许差

两次平行测定结果之差，虱螨脲、虫螨腈分别应不大于0.3%、0.5%，取其算术平均值，作为测定结果。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的选择

通过Agilent 1200高效液相色谱仪的光谱数据采集功能，经过全波长扫描，考虑到短波长处紫外吸收会有溶剂或助剂的干扰，同时兼顾虱螨脲和虫螨腈的峰面积和峰高的差距尽量小，最终选择254 nm作为虱螨脲、虫螨腈的检测波长。在该波长下2种有效成分液相色谱图分离峰形都很好，响应值和峰高比例都较为合适。

2.2 流动相的选择

试验选择 Eclipse XDB-C18色谱柱，分别试用不同比例的甲醇+水、乙腈+水、甲醇+乙腈+水作为流动相对试样进行分离检测。经过反复试验发现，用甲醇+水=75+25(体积比)作为流动相，流速控制在1.0 mL/min时，各组分能有效分离，无其他组分的干扰，且峰形尖锐、对称，且保留时间适中，因此选用甲醇+水=75+25(体积比)作为流动相。

2.3 分析方法的线性关系曲线

配制5个不同浓度的虱螨脲(虫螨腈)标样溶液，在上述色谱条件下测定虱螨脲(虫螨腈)，取两次测定的平均值作为测定结果。以虱螨脲(虫螨腈)的浓度(mg/mL)为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，得到虱螨脲的回归方程为y=1.865 0x+0.033 8,r=0.999 3(图3)；虫螨腈的回归方程为y=1.668 6x-0.012 3,r=0.999 9 (图4)。结果表明该方法的线性关系良好。

2.4 分析方法的精密度

在上述色谱操作条件下对同一个 24%虱螨脲·虫螨腈悬浮剂试样进行10次平行测定。测得虱螨脲和虫螨腈的标准偏差分别为0.04和0.07；变异系数分别为0.82%和0.35%(表1)。结果表明此方法的精密度能够满足定量分析的要求。

表1 24%虱螨脲·虫螨腈悬浮剂精密度测定

图3 虱螨脲相关线性关系图

图4 虫螨腈相关线性关系图

表2 24%虱螨脲·虫螨腈悬浮剂回收率测定

2.5 分析方法的准确度

在已知质量分数的24%虱螨脲·虫螨腈悬浮剂中加入一定量的虱螨脲、虫螨腈的标样，在上述色谱操作条件下进行测定，计算每个试样的回收率和平均回收率。得到虱螨脲的回收率为 99.28%～100.6%，平均回收率为99.80%；虫螨腈的回收率为99.61%～100.3%，平均回收率为99.91%(表2)。由以上结果可知该方法具有较高的准确度，满足定量分析要求。

3 结 论

上述试验结果表明，本文中的分析方法拥有较好的分离效果，其精密度和准确度较高，线性关系良好，具有省时、简便、准确度高的优点，可以满足生产企业生产中的质量控制要求，是此复配产品较理想的分析检测方法。