香菇多糖对中央型非小细胞肺癌肺气亏虚型患者外周血及肺泡灌洗液IL-4、IL-12的影响*

张趁英 吴兴萍 李春华 李家树

近年来，因为社会老龄化、环境污染严重及不良生活习惯等缘故，癌症不但成为当前的重要大众健康问题和死亡的首要原因，而且其导致的经济负担也正在急速增加[1]。在我国，肺癌发病率极高，是癌症死亡的首要因素，其5年存活率仅有16.1%[2]，如何预防和治疗癌症的发生发展成为我们必须面对的问题。众所周知，免疫紊乱普遍存在于恶性肿瘤患者，肿瘤的产生、成长等与免疫紊乱密不可分。在中医内科学上无“肺癌”这一病名，属于中医“肺积”“息贲”等范畴，现亦称为“肺癌”，中医学认为，肺癌的病因病机为“正虚”与“癌毒”相互作用，由于肺气亏虚，肺失肃降，母病及子，肺肾亏耗，气血津液逆乱导致痰瘀内生，日久酿生癌毒，壅结于肺所致[3]。其中《黄帝内经》所云“正气存内，邪不可干”，再次表明治疗晚期肺癌“扶正”的重要性。香菇是我们日常饮食中的常见蔬菜，是担子菌纲侧耳科真菌的干燥子实体，味甘，性平、凉，入肝、胃二经，具有健胃益气的功效，香菇多糖是从香菇子实体中获得的活性成分，具有调理免疫力、抗肿瘤、抗病毒、抗炎等药理活性[4，5]。从中提取的香菇多糖目前在临床已经应用，经现代医学研究其重要起效成分β-葡聚糖可以调节机体免疫功能，增加癌症患者免疫力，故本研究探讨香菇多糖对中央型非小细胞肺癌肺气亏虚型患者BALF及血清IL-4、IL-12表达的影响，以期寻找中央型非小细胞肺癌患者更好的治疗方案。

1 资料与方法

1.1 一般资料本研究采用前瞻性研究方法，选择2018年1月—2019年11月连云港市第一人民医院呼吸内科病房新发现的C-ros原癌基因1(C-ros oncogene 1，ROS1)、表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)、 间变性淋巴瘤激酶 (Anaplastic lymphoma kinase,ALK) 三者皆为阴性，晚期中央型非小细胞肺癌肺气亏虚型(经评估均不能接受手术肺切除)患者62例为研究对象，随机分为对照组和观察组，每组31例。对照组年龄46～80 岁，平均年龄(68.11±9.31)岁；病理分型：腺鳞癌9例，腺癌 12 例，鳞癌10 例。观察组年龄 51～75 岁，平均年龄(65.12±8.53)岁；病理分型：腺鳞癌8例，腺癌 13 例，鳞癌 10 例。对照组采用常规TP化疗，观察组采用TP +香菇多糖治疗，2组患者治疗前、治疗21 d后均留取外周血及BALF行相关指标检测。本研究经医院伦理委员会准许，并签署患者知情同意书。

1.2 诊断标准西医诊断标准：参考人民卫生出版社2018年出版的第九版教材《内科学》。有临床症状及放射学征象，且被怀疑为肺癌的患者先行胸部及腹部CT检查，发现肿瘤的原发部位、纵膈淋巴结侵犯就其他部位播撒情况，必须取得组织学标本诊断可通过有创技术获取，如支气管镜、胸腔镜、淋巴结活检等，确定非小细胞肺癌后评估是否能行手术治疗，不适宜手术治疗者纳入该方案[6]。中医证候诊断标准：参照中华中医药学会制定的《中医内科常见病诊疗指南》，2009版。肺气亏虚证:咳嗽，气喘，声音低微，痰多，色白而黏，胸闷气短，腹胀纳少，恶风，怕冷，倦怠乏力，面色无华，大便溏薄，小便无力，舌质淡红苔薄白或少苔，脉细缓。

1.3 治疗方法及观察指标所有患者治疗前行纤支镜留取病理及BALF，确诊后对照组行TP化疗方案：第1天将135 mg/m2紫杉醇注射液 (四川升和药业股份有限公司) 溶入500 ml生理盐水(科伦制药)中,静脉滴注180 min；顺铂(江苏豪森制药，10 mg/支)总量为75 mg/m2，根据每个患者的身高、体质量计算出各自的体表面积，将总量均分至0.9%氯化钠注射液500 ml(科伦制药)连续缓慢静脉滴注3 d，21 d 为一个化疗周期。观察组在TP化疗方案的基础上补充注射用香菇多糖(南京绿叶思科药业有限公司生产，规格: 1 mg /支)。将1 mg 香菇多糖溶于250 ml 5%葡萄糖注射液(科伦制药)中静脉滴注，每周2次，连续2周。21 d后2组患者再次行纤支镜留BALF及外周血。外周血及BALF中IL-4、IL-12的表达用ELISA法检测，人ELISA 试剂盒均购自美国R&D公司。

2 结果

2.1 2组患者治疗前后外周血清IL-4、IL-12表达量对比2组患者治疗前外周血清中IL-4、IL-12浓度差别无统计学意义(P>0.05)；与治疗前比，2组患者治疗后血清中IL-4浓度下降，IL-12浓度提高，且观察组浓度变化更显著(P<0.05)。见表1。

表1 2组患者治疗前后外周血清IL-4、IL-12表达量对比 (例，

2.2 2组患者治疗前后BALF中IL-4、IL-12表达量对比2组患者治疗前BALF中IL-4、IL-12浓度差异无统计学意义(P>0.05)；与治疗前比，2组患者治疗后BALF中IL-4浓度降低，IL-12浓度升高，且观察组浓度变化更明显(P<0.05)。见表2。

表2 2组患者治疗前后BALF中IL-4、IL-12表达量对比 (例，

2.3 观察组患者治疗前后血清与BALF 中IL-4、IL-12相关性分析观察组患者治疗前后BALF与血清中IL-4、IL-12分别成正相关。见表3。

表3 观察组患者治疗前后血清与BALF 中IL-4、IL-12相关性分析

3 讨论

中医学认为晚期非小细胞肺癌多属于中医"肺积”范畴，周仲瑛教授认为晚期肺癌病机主要与癌毒与肺脏功能失调及虚损有关。癌毒的滋生，多由于肺气亏耗，邪气深伏久滞，酿成癌毒所致。癌毒郁结，阻碍了气血的正常运行，津液输布失职则留结为痰，血脉流行不畅则停留为瘀，癌毒与痰瘀搏结，最终形成肺积[7]。肺癌晚期不单有痰热、痰湿、血瘀等标实体现，还会有不同程度气虚、阴虚等虚象，经常虚实混杂。癌毒损伤正气，肺气亏虚，宣发肃降失职，不能制约癌毒，则癌毒旺盛，更加耗伤人体正气，且癌毒走注，随气血而流散全身各处，频频如此，最后形成毒盛正虚难以恢复之恶境[7]。诚如《素问·评热病论》所言“邪之所凑，其气必虚”，所以在治疗晚期肺癌的患者中我们常以补肺益气、化痰解毒为主要治疗原则，因而可知，我们在对于晚期肺癌的治疗中，不但要重视攻邪，而且还要加强扶正的作用。笔者在临床治疗过程中发现，香菇多糖对于中央型非小细胞肺癌肺气亏虚型患者具有明显扶正抗癌的疗效，同时其对于BALF及血清IL-4、IL-12表达具有显著影响。

香菇属担子菌纲伞菌目口蘑科香菇属，也被称为香菇，花菇，俗称蘑菇，是我国常见的食药用培植真菌，传统中医已经对香菇的药性及功用有相关记录，如《医林篡要》 中香菇“味甘、性寒”“可排毒”；《日用本草》 中香菇“益气、不饥、治风破血”；《本经逢源》 中香菇“大益胃气”。随着现代医学的发展，我们逐渐发现香菇的药用价值，并产出香菇多糖，其中最重要的成分是β-葡聚糖[8]，巨噬细胞、树突状细胞和淋巴细胞等免疫细胞受β-葡聚糖干预刺激可增强机体免疫[9]，人体获得性免疫和天然免疫都可受β-葡聚糖调理[10]。各个免疫细胞表面的多个受体均可受β-葡聚糖调节，例如人树突状细胞源性C型凝集素样受体-1 (Dendritic cell-derived C type lectin-1，Dectin-1)、补体受体3等。在巨噬细胞、树突状细胞等免疫细胞中都可有Dectin-1的发现，其可与β-葡聚糖相结合进一步促进机体非特异性免疫反应，比如促进机体炎性因子释放、激活细胞吞噬等[11]。β-葡聚糖也能够与补体受体3结合，进而启动补体系统，抑制肿瘤细胞的产生及成长[12]。

在人体的免疫反应中，CD4+T细胞是必不可少的，因为它们的细胞因子各不相同，它们被分为Th1和Th2细胞亚群。IL-12、IFN-γ及 TNF-α等因子由Th1细胞分泌，这些因子能增强免疫细胞的的活化及增殖，从而参与机体细胞免疫功能[13, 14]；IL-4，IL-6等由Th2细胞分泌，这可以增加B细胞的数量并干预体液免疫[15]；在健康的人体中，2种Th细胞分泌的差别细胞因子保持动态平衡，其中任何一个的改变均可导致 Th1/Th2 比值的变化，进而导致免疫稳态被打破，从而免疫相关的疾病就会发生发展，比如恶性肿瘤[16]。进一步的研究表明，当Th1/Th2 比值变小，机体处于免疫抑制，并有可能促进肿瘤的产生[17，18]。

Th1分泌的细胞因子具有提高机体免疫进而抗肿瘤的作用，也可以抑制或者减缓细胞转化为恶性肿瘤细胞，Th1 细胞功能的变化可能导致肿瘤的发生[19]。Th1细胞可分泌IL-12，反过来，IL-12能够增强Th1 细胞的繁殖及分泌功能，二者互相促进，可见IL-12在维持细胞免疫中起重要作用，是一种极为重要的抗肿瘤因子[20]，实验证明[21]， IL-12 能够增强 NK 细胞的杀伤活性，且功能最强，它不仅能对 NK 细胞作用的靶细胞产生杀伤作用，而且能杀伤对 NK细胞有包被抗体的恶性肿瘤细胞。IL-4由Th2细胞分泌，其促进Th2细胞的成熟，抑制Th1细胞的产生，并促进Th1细胞向Th2细胞的迁移，从而导致 Th1/Th2 比例的失调，产生恶性循环，进而导致肿瘤组织的生长，IL-4与肿瘤的发生密切相关。

本研究可见治疗前BALF和外周血清中IL-4和IL-12的浓度未见显著差异性；与治疗前比，2组患者治疗后BALF和外周血清IL-4浓度降低，IL-12浓度升高，且香菇多糖+TP组患者浓度变化更甚，提示中央型晚期非小细胞肺癌患者予以香菇多糖+TP较单纯TP化疗更能降低BALF和外周血清IL-4浓度，升高IL-12浓度，这同时提示香菇多糖+TP较单纯TP化疗方案可优化Th1/Th2比值，进而改善患者机体免疫功能；我们同时对观察组患者治疗前后BALF与血清中IL-4、IL-12相关性分析发现其均成正相关，提示BALF中IL-4、IL-12浓度变化与血清中变化同步，亦可用于肺癌诊断及治疗的观察指标。同时本研究进一步提示中药及中药提取物在调节患者免疫方面存在较为客观的临床价值，说明中西医结合在治疗恶性肿瘤方面存在巨大的发展空间，在西医积极抗肿瘤的同时，适时加入中医药干预，能调节患者免疫，达到扶正驱邪外出的目的。然而目前对香菇多糖在非小细胞肺癌患者研究还很少，相关机制尚不明了，且本研究样本量相对较小，相关研究还需进一步深入。