临床微生物快速检验技术研究进展

2020-12-26 14:15天津第四中心医院300140赵群莉
首都食品与医药 2020年16期
关键词:探针荧光细菌

天津第四中心医院(300140)赵群莉

近年来感染性疾病有逐年上升的发病趋势,感染性疾病对于人体的身体机能影响较大,引发感染性疾病的微生物较多。当前临床上对于微生物化验快速检验技术的研究较多,以下为有关检验方法。

1 自动化培养鉴定技术

传统的微生物检验技术中需要制作染色体图片,进行一系列的培养和生化鉴定,检验操作过程非常繁杂且需要花费大量的时间,无法满足临床上治疗患者需求。为解决这一难题,开发了各种自动化的培养以及鉴定系统,用于完善微生物检验方法。可利用微生物鉴定专家系统进行微生物快速检验,利用不同微生物的酶系统不同的特点,其分解的物质不同。可通过间接检测微生物代谢产物的方法,检测微生物。利用菌类特殊的生化反应,根据其工作原理制作微生物鉴定专家系统,检测到细菌所使用的底物后,根据反应液中色原性、pH值以及酶降解反应进行判断。将需要检测的细菌制作成悬浮液注入相应的鉴定卡中,将其插入培养箱中进行培养,通过定时扫描比较阳性阈值,最后采取计算机系统分析培养数据,自动形成鉴定报告。血培养仪器是在传统的血液细菌培养方法之上增加双向增菌培养瓶,能够省略细菌转种过程而直接形成菌落,可自动感应细菌生成的二氧化碳物质,检测的灵敏性得到有效提升,可达到快速诊断的检验效果。分枝杆菌培养是在90年代初使用的荧光标记系统上配合荧光检测和二氧化碳气体检测,根据气体压力变化,快速分析细菌的生物学特征,采取数据处理的方式制作检验报告[1]。

2 免疫学检测技术

免疫学检验技术已经较为成熟,其中酶免疫分析法是采用高效酶催化剂与抗原抗体免疫反应结合,当酶催化底物发生有关化学反应后,溶液颜色变化,可清晰显示抗原抗体,常用于检测肺炎球菌和大肠埃希菌。荧光免疫分析在抗原抗体反应检验中的特异性非常高,使用荧光素进行标记,借助荧光显微镜进行快速观察,其特异性非常高,但是受限于操作流程繁杂、标本保存时间短问题,该项技术仍然需要进行完善。

3 分子生物学检测技术

对于培养难度高或者不能进行培养的微生物,可采取分子生物学检验技术,临床检验中常使用的分子生物学检验技术有聚合酶链反应技术和核酸杂交技术,聚合酶链技术模拟天然的DNA复制过程,将待检测基因在数小时之内扩增百万倍,可实现快速检测。核酸杂交技术利用核酸复性、变性特性,根据碱基对互补原则,固相或液相中形成异质双链,使用DNA探针进行检测,该项技术不受病菌的影响,可快速检验出待测细菌[2]。

4 生物传感器检验技术

生物传感器检验技术的操作步骤较为简单且检验准确性高,可广泛用于实验室检验中。DNA生物传感器属于临床中应用最广的病毒微生物检验传感器,与核酸检验技术相比,检验准确性更高,在临床中推广的难度更小,临床应用的发展空间较大。

5 生物芯片检验技术

生物芯片检验技术是将蛋白质、多肽以及基因片段等生物大分子,固定在支持物上,形成生物大分子点阵,当生物大分子与芯片中的探针分子发生相互作用后,获取检测样品的序列信号以及分子数量,根据检测探针分子杂交信号的强度,可实现高通量快速检测。生物芯片的探针种类有DNA、蛋白质以及细胞等类型,以DNA芯片为例,可快速有效获取检验物质的遗传信息,用于检测变异的细菌、耐药机制、基因序列抗感染药物的研究中,基因芯片分析技术分析速度快,对检测样品的污染程度非常小,可进行多样品处理,检测的样本用量非常少,一次使用一张芯片,即可对混合感染标本进行检验,能够在极短的时间内获取大量的检验信息。病原微生物发生变异、种类复杂会对患者药物敏感性产生影响,应用基因检测技术可快速查清患者病情,可为临床医生制定治疗方案提供有效的医学诊断信息,能够减轻患者的治疗痛苦。

6 质谱检测技术

质谱是一种与光谱并列的谱学方法,通常意义是指广泛应用于各个领域中通过制备、分离、检测气象离子来鉴定化合物的一种专门技术。应用于微生物检测,具有快速准确的特点。

7 结束语

感染性疾病传播速度加剧,对于人体的身体健康损害较大,医学界为解决这一问题,需要采取快速准确的微生物检验技术。当前计算机技术发展非常快,微生物检验技术可结合计算机技术,向自动化、高速化方向发展。多学科的融合能够促使微生物检验技术不断发展,可为临床微生物检验提供较高的诊疗价值。

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