百花定喘片中4味药材的薄层色谱鉴别

刘学良 汪永明 石春兰 韩达斌 陈鹏 俞雅琼 陈丽 刘海青

摘要：目的建立百花定喘片的薄层色谱鉴别方法。方法采用薄层色谱法，对百花定喘片中的麻黄、五味子、牡丹皮、黄芩进行定性鉴别。结果在薄层色谱中，4味药材均能得到很好的鉴别。结论该法专属性强，重复性好，且操作简单，可用于百花定喘片的质量控制。

关键词： 百花定喘片;薄层色谱;鉴别

【中图分类号】R97  【文献标识码】A  【文章编号】1673-9026（2021）14--01

百花定喘方为中医验方，收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第一册[1]。

由麻黄、五味子、牡丹皮等17味药味组方而成，用于治疗新久咳嗽，喘咳痰多，劳嗽咳血。该制剂质量标准中仅有性状和片剂的常规检查项，无任何鉴别和含量测定项。为了提高该制剂的质量控制水平，有效控制该药品质量，参考文献[2～6 ] ，对制剂中的4味药材的薄层鉴别方法进行研究，建立了其薄层鉴别方法，可用于该制剂的质量控制。

1 仪器与试药

BT224S 型电子天平（ 德国赛多利斯仪器有限公司）;KQ5200B 型超聲机（ 昆山超声仪器有限公司）;CAMA-GREPROSTAR3型薄层数码成像系统（ 瑞士）;TDL-5-A 型台式离心机（上海安亭科学仪器厂）。丹皮酚对照品（ 批号：110708-201407），盐酸麻黄碱（ 批号：171241-201007），五味子对照药材（批号：120922-201610）五味子甲素（ 批号：110764-20100），五味子乙素（ 批号：110765-201311），黄芩苷对照品（ 批号：110715-201318），，均购于中国食品药品检定研究院;百花定喘片（天津中新药业集团股份有限公司隆顺榕制药厂，批号：CD36031、CE36033、DD36035;广东万方制药有限公司，批号：141201、150201、150202）;薄层层析硅胶G 板（ 青岛海洋化工厂分厂）;水为超纯水;其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1麻黄

取本品20片，研细，加浓氨试液1ml，加氯仿25ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液。取盐酸麻黄碱对照品， 加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。另取缺麻黄的阴性样品，同法制成缺麻黄的阴性对照溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2020年版四部通则 0502）试验，吸取上述溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨试液（40：10：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果见图1。

1、盐酸麻黄碱对照品   2、3、4、6、7、8百花定喘片样品（批号CD36031、CE36033、DD36035、141201、150201、150202）  5、麻黄阴性对照

2.2五味子

取本品20片，研细，加氯仿25ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液。取五味子对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。取五味子甲素、五味子乙素对照品， 加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。另取缺五味子的阴性样品，同法制成缺五味子的阴性对照溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2020年版四部通则 0502）试验，吸取上述溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30℃～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果见图2。

1-6、百花定喘片样品（批号CD36031、CE36033、DD36035、141201、150201、150202）7、五味子阴性对照  8、五味子对照药材  8、五味子甲素对照品  9、五味子乙素对照品

2.3  牡丹皮

取本品20片，研细，加乙醇25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加30ml乙醚使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。另取缺牡丹皮的阴性样品，同法制成缺牡丹皮的阴性对照溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2020年版四部通则 0502）试验，吸取上述溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5%的三氯化铁乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果见图3。

1、牡丹皮阴性对照   2、丹皮酚对照品3-8、百花定喘片样品（批号CD36031、CE36033、DD36035、141201、150201、150202）

2.4 黄芩

取本品20片，研细，加甲醇25ml，超声处理15分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加水10ml搅拌使溶解，加稀盐酸调pH值至2，离心，收集沉淀，加水5ml水充分混匀，离心，收集沉淀，水浴挥干残留液体，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。取黄芩苷对照品， 加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。另取缺黄芩的阴性样品，同法制成缺黄芩的阴性对照溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2020年版四部通则 0502）试验，吸取上述溶液各5µl（百花定喘丸供试品溶液8µl），分别点于1%氢氧化钠制备的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇试液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果见图4。

1-6、百花定喘片样品（批号CD36031、CE36033、DD36035、141201、150201、150202）7、8、黄芩苷对照品   9、黄芩阴性对照

3  结果与讨论

按上述建立方法分别对2家生产企业的6批次样品进行牡丹皮、麻黄、五味子、黄芩4味药材的TLC分析测定，6批次百花定喘片均检出相应斑点。综合比较，发现同一厂家不同批号的样品差异不大，不同企业之间的样品存在斑点大小及颜色深浅不一或微弱检出的问题，说明企业对原料药材质量把控不严。

经过多次试验，发现牡丹皮、黄芩鉴别项中提取相应的对照药材溶液点样后，色谱图中只有一个主斑点，为其特征成分丹皮酚、黄芩苷，而麻黄、五味子鉴别项中提取相应的对照药材溶液点样后，对照药材中的部分斑点与样品不能全部对应，所以百花定喘片中4味药材的薄层色谱鉴别仅以其相应的特征成分为对照进行鉴别，方法简单，阴性对照无干扰，紫外光下斑点清晰，结果较好。曾对制剂中的其他药味采用不同的提取方法和展开剂、显色剂进行薄层色谱鉴别，其阴性对照干扰较大，试验未获成功。

建立的百花定喘片处方中麻黃等4味药材的薄层鉴别方法简单，重复性好，专属性强，斑点清晰，能提高质量标准对药材的可控度，保证生产企业对药材投料，增强了现行标准药品有效性的控制，可用于百花定喘片的质量控制。

参考文献：

[1] 卫生部药品标准中药成方制剂：第十三册[S].1995

[2] 陈阿丽，杨永霞，梁生旺，等.百花定喘片中药材的鉴别及其黄芩苷、橙皮苷的测定[J]. 华西药学杂志，2014， 29（3） ∶318-320.

[3] 侯小涛， 李耀华， 卢小芳.复方百部止咳冲剂中黄芩和陈皮的鉴别及黄芩苷的含量测定[J]. 华西药学杂志，2005， 20（2）：165-167

[4] 姚琳，孙妍，谭思思，等.瓜桔止嗽丸薄层鉴别及桔梗皂苷D 的含量测定

[5] 雷成康，郭玲. 麻黄止嗽胶囊质量标准的建立[J].中国药师，2016，19（4）：681-684.

[6] 许广华，王虎，李小伟，等.芪精愈消胶囊薄层鉴别及含量测定研究[J].安徽医药，2016，20（4）：660-663.

基金项目：青海省基础研究项目（编号2020-ZJ747）

作者简介：刘学良（1980—），男，副主任药师，主要从事药品审评工作。