Xpert MTB/RIF在肺结核病及耐药结核菌检测中的应用价值分析

2021-01-13 11:15骆妙卡
白求恩医学杂志 2020年4期
关键词:抗酸结核菌肺结核病

骆妙卡

结核病是临床常见的传染性疾病,我国作为结核病发病最为严重的国家之一,每年新发结核病患者超过130万,占到全球每年新发病例的15%左右[1]。由此可见,结核病的防治形势不容乐观,须进一步加强防治工作。目前,对于肺结核病的诊治和检测方法较多,常见的有痰液培养、药敏试验等技术,尽管具有较为广泛的开展率,但存在一定的不足,痰涂片阳性率较低,结核杆菌培养条件要求高,药敏试验周期长,容易造成误诊[2]。随着分子生物学的快速发展以及对结核杆菌基因组的分析,新型的检测方法Xpert MTB/RIF得到了广泛的关注,在痰涂片及常规检测手段上进行改进,可在短时间内完成对结核杆菌及其耐药性的检测,得到了许多国家认可,对结核病的诊断做出了重要贡献,但我国对其研究较少[3]。为此我院选取120例初诊疑似肺结核病患者展开分析,对比不同方法对结核病的诊断情况,结果报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年1~6月我院收治的120例疑似肺结核病患者,其中男57例(47.5%),女63例(52.5%);年龄21~78(54.16±3.59)岁。其中年龄≥60岁31例(25.83%),40~59岁59例(49.17%),<40岁23例(19.17%)。痰液性状:干酪样痰35例、黏液痰62例、血痰23例。

1.2方法

1.2.1检测所用仪器设备和试剂 Xpert MTB/RIF检测系统及试剂;酸性培养基;药敏培养基。在检测过程中,严格按照《结核病诊断细菌学检验规程》[4]相关要求操作。

1.2.2检测操作 ①采用碱处理固体培养法进行分离培养药敏试验,若结果为阳性,则进行比例法药敏试验;②Xpert MTB/RIF检测:根据1∶2的比例原则,将1 ml的标本溶于处理液中,轻微振动并将混合液摇匀,静置15 min;③利用菌吸管吸取混合液,吸取量为2 ml,然后转移至一次性反应盒中,放入检测系统中进行检测,并于2 h后利用检测软件读取数据。

1.3观察指标及评价标准 以传统比例法药敏试验为金标准,分析不同方法检测痰标本中结核杆菌及耐药菌的阳性率以及抗酸染色法和Xpert MTB/RIF3的灵敏度、特异性。阳性:金标准确诊有该疾病,试验检出的阳性例数;阴性:金标准确诊无该疾病,试验检出的阴性例数。

1.4统计学方法 数据采用SPSS 19.0软件进行统计学分析,定性数据采用χ2检验,以P≤0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1固体培养法与Xpert MTB/RIF法检测结核杆菌的阳性率比较 见表1。120例患者中,Xpert MTB/RIF检测结核杆菌的阳性率为70.00%,高于固体培养法的55.00%(χ2=5.76,P<0.05)。

表1 固体培养法与Xpert MTB/RIF法检测结核杆菌的阳性率比较 [例(%)]

2.2固体培养法与抗酸染色法检测结核杆菌的阳性率比较 见表2。120例患者中,抗酸染色法检测结核杆菌的阳性率为40.83%,低于固体培养法的55.0%(χ2=4.83,P<0.05)。

表2 固体培养法与抗酸染色法检测结核杆菌的阳性率比较 [例(%)]

2.3Xpert MTB/RIF与抗酸染色法检测结核杆菌的灵敏度、特异度比较 Xpert MTB/RIF检测结核杆菌的灵敏度为70.83%(85/120),特异度为88.33%(106/120);抗酸染色法检测结核杆菌的灵敏度为48.33%(58/120),特异度为53.33%(64/120);Xpert MTB/RIF检测结核杆菌的灵敏度高于抗酸染色法(χ2=12.61,P<0.01),特异度亦高于抗酸染色法(χ2=35.58,P<0.01)。

3 讨 论

结核病作为一种传染性疾病,其耐药情况较为严重,受到了全社会的广泛关注[5]。目前认为,涂片镜检法、传统药检等是检测结核菌的有效方式,但所需时间较长,特异度较低,影响药敏报告的时效性。传统固体培养法和比例法体外药敏试验需要时间为4~8周,因此在临床诊疗过程中常延误结核病的早期诊断和治疗而导致预后不佳[6]。为此,探求合理的诊断方式对患者的治疗至关重要。

随着临床医疗卫生事业的不断发展,针对结核病的检测技术日趋丰富,检测水平有了明显提高。其中Xpert MTB/RIF检测技术是一种半巢式实时荧光定量PCR体外诊断技术,针对rpoB基因81 bp利福平耐药核心区间设计引物、探针,对其是否发生突变进行检测,同时对是否为肺结核病,或者是否对利福平耐药进行检测[7]。从世界各国对肺结核病及耐药结核菌检测技术的应用来看,Xpert MTB/RIF检测技术是当前首选的检测技术,其效果受到了社会的高度认可,在全自动检测系统中完成检验,最终可以取得较准确的诊断结果。

本研究尝试将Xpert MTB/RIF检测技术应用于肺结核病及耐药菌的检测中,取得了理想的效果。研究结果显示,在120例患者中,Xpert MTB/RIF的检测阳性率(70.00%)高于固体培养法(55.00%),说明对于疑似肺结核病患者Xpert MTB/RIF检测应用价值高于固体培养法,与陆小玲[8]的研究结果一致。究其原因,固体培养法在应用酸、碱进行前处理时,会损伤标本中40%~70%结核菌活性,一定程度上影响结果的判别,同时部分患者痰液不是从肺深部咳出,含菌量少,其在玻片上黏附力差,在后续染色过程中会造成部分成分的大量丢失,导致检出率降低。Xpert MTB/RIF检测系统采用了实时荧光定量核酸扩增技术,操作简单,全自动运行,降低污染,实施快速检测,阳性率高。本研究结果显示,固体培养法与抗酸染色法进行比较,抗酸染色法的阳性率(40.83%)低于固体培养法(55.0%),说明对于疑似肺结核病患者固体培养法的阳性检测值高于抗酸染色法,与周洪经等[9]研究结果一致。究其原因,抗酸染色法操作简单、快速,但灵敏度较低,容易出现漏检,从而影响诊断结果,其中不排除检测人员技术水平,是否按照操作要求执行的问题,固体培养法是传统的结核杆菌检验方法,可准确判断出患者是否有结核杆菌耐药菌的感染。

本文采用Xpert MTB/RIF、抗酸染色法、固体培养法三种方法进行检测,研究结果显示,Xpert MTB/RIF比抗酸染色法灵敏度高(70.83%)、特异性强(88.33%),与孙蕊等[10]研究结果相符。究其原因,固体培养法耗时较长,无法满足结核病快速诊断的要求,抗酸染色方法简便快捷,但阳性率较低,结核病痰标本结核菌数目需>5000条/ml才能得到阳性结果,灵敏度较低,特异性较差,Xpert MTB/RIF检测结核杆菌敏感、方法简单、操作便捷快速、安全,准确度高,对基层单位结核患者的早期发现、早期诊断及治疗具有重要的意义,因而此技术在实验室结核病诊断中具有可行性。

综上所述,采用Xpert MTB/RIF检测肺结核病及耐药结核菌,检测的灵敏度、特异性较高,在各级结核病防治机构均有广泛的应用前景。

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