乳腺癌中PD-L1的表达状况与临床病理特征

王艳芳

吉林省前卫医院病理科,吉林 长春 130021

BC是女性群体中发病率最高的恶性肿瘤，近些年患病群体有年轻化趋向，侵袭与转移是造成治疗失败及患者死亡的主要因素。人体PD-L1也被称之为CD279，位于染色体2q37.35，由细胞外区、跨膜区与胞内区共同构成。现有研究发现[1]，PD-L1在BC淋巴细胞、单核及巨噬细胞表面广泛表达，在人类肿瘤细胞株内表达上调，这提示PD-L1和肿瘤发生、发展间存在密切相关性，程序性死亡分子1(PD-1)是PD-L1的受体。目前，关于PD-L1作为BC免疫治疗预测标志物的研究偏少，故而探究其在BC组织内的表达情况有一定现实意义，本文基于以上宗旨做出分析报道。

1 资料与方法

1.1一般资料 采集2017.8～2019.8期间我院120份BC石蜡标本，基于肿瘤组织的核心区建设组织微阵列(TMA)。入选的120例患者年龄27～74岁；平均(51.8±10.9)岁；流体直径0.7～7，平均(4.8±1.52)；结合《WHO乳腺肿瘤分类》[2]内标准判断入组患者肿瘤分化程度:SBR I、II、III级分别有8、102、10例；把BC分为如下4组分子亚型：Luminnal A型15例、Luminnal B型47例、HER-2过表达型30例、TNBC型28例；TNM分期[3]：I+II期93例，III+IV期27例。

1.2方法 选用免疫组化SP法染色，用柠檬酸钠溶液诱导5μm切片TMA组织抗原修复过程，过氧化氢抑制内源性过氧化物酶表达过程，滴入事前稀释的PD-L1(E1L3N)单克隆抗体，安放在37℃温箱内1h。采用标准DAB技术完成免疫染色，苏木精溶液复染。

1.3判断标准 局部或整个细胞膜染色(≥1+)肿瘤细胞在整个肿瘤中所占比例≥1%则判断PD-L1为阳性，反之则为阴性；Ki67将20%设为截点，用于判断PD-L1表达程度的高低。

2 结 果

2.1BC的临床病理特征 出现淋巴结转移、血管侵犯者分别有50例、25例，占41.7%、20.83%。SBR分类表明， I、II、III级分别有8、102、10例，占6.7%、85.0%、8.3%。免疫组织化学染色发现，ER、PR与HER-2阳性率依次为30.8%(37/120)、38.3%(46/120)、44.2%(53/120)。且还评估了Ki67的表达情况，高、低表达者依次有86例、54例，各占71.7%、28.3%。分子分型结果表明，Luminnal B型最为常见，占39.2%(47/120)。

2.2PD-L1表达和BC临床病理参数间的相关性分析 PD-L1表达主要定位在肿瘤细胞细胞膜或细胞质。入选的120例乳腺患者PD-LI阳性率为16.7%(20/120)，在BC患者TNBC型内PD-L1的阳性率最高，为35.7%(10/28)，其次为HER-2过表达型，占16.7%(5/30)，Luminnal A型占13.3%(2/15)，Luminnal B型为6.3%(3/47)。不同分子分型者PD-L1表达情况之间有统计学意义。进一步分析表明，PD-L1表达情况和BC组织分化程度、分子分型、瘤体直径、ER状态、PR状态、HER状态以及Ki67表达存在相关性(P<0.05)，与病患年龄、TNM分期、淋巴结转移与血管侵犯情况无相关性(P>0.05)。具体见表1。

表1 PD-L1表达和120例BC患者病理参数特征的相关性分析

3 讨 论

程序性死亡分子1(PD-1)有两个配体，即PD-L1与PD-L2，他们均是B7家族的成员。PD-L1蛋白在响应LPS与GM-CSF处置后的巨噬细胞与树突状细胞(DC)上被上调，且在传导TCR与B细胞受体信号时上调T细胞与B细胞，在静息状态的小鼠体内，可以于心脏、、肺、胸腺、脾及肾内检出PD-L1 mRNA。采用IFN-γ处理PD-L1时其基本上在全部鼠肿瘤细胞中表达，包括PA1骨髓瘤、P815肥大细胞瘤与B16黑素瘤内。

PD-L1属于I型跨膜蛋白，在非造血细胞和非淋巴器官内组成型表达 ，且在多种恶性肿瘤微环境内上调。PD-L1诱导T细胞活化与增殖能力降低过程，抑制抗细胞凋亡分子表达，但促进炎性细胞因素释放过程，进而削弱癌症有关免疫细胞原性，抑制免疫应答，以上这种机制诱导疾病进展过程。

本次研究入选的120例乳腺患者PD-LI阳性率为16.7%，PD-L1表达情况和BC组织分化程度、分子分型、瘤体直径、ER状态、PR状态、HER状态以及Ki67高表达性等不良病理特征相关，HEQin等[4]部分研究结果相似，提示PD-LI为肿瘤侵入性偏高的指标，并且PD-LI在TNBC内的较高表达性可能会成为TNBC患者临床靶向治疗的靶标，且可能是TNBC患者预后的重要标志物之一。本次研究表明PD-L1表达和淋巴转移之间无相关性，和过往文献研究结果存在一定差异，分析其原因可能和纳入样本量偏少，患者较为单一相关。抗PD-LI单抗治疗荷瘤小鼠模型提示明显抑制肿瘤生长过程，肿瘤细胞被清除。局部完全缓解，联合细胞毒性T细胞，和单纯采用细胞毒性T细胞疗法相比，较明显提升了荷瘤小鼠的生存率，这提示PD-L1可能参与乳腺癌亚型的复发转移过程。

TNBC是一类高度异质性肿瘤，尽管免疫表型均不表达ER、PR与HER-2，在其在生物学行为形成有很大异质性，在黏液癌与微乳头癌上不表达。综合本文论述的内容，可以看出PD-L1在TNBC内高表达，可以作为TNBC患者临床免疫治疗的靶标与预后标记物；肿瘤直径大、Ki67增殖指数高是PD-L1表达的危险因素[5]。结合PD-L1在肿瘤细胞中的表达特征，笔者推测其可能和BC患者临床治疗效果相关，其可能会对后续几年中BC患者免疫治疗做出一定科学指导。