吐鲁番锦鸡儿地上部分化学成分的研究

贾月梅， 李雪征， 贾新岳， 独孤佳秀， 石明辉， 贾晓光*， 潘 兰*

(1.新疆维吾尔自治区市场监督审核评价中心，新疆 乌鲁木齐 830002；2.延边大学附属医院药学部，吉林 延吉 133000；3.新疆维吾尔自治区中药民族药研究所，新疆 乌鲁木齐 830002)

吐鲁番锦鸡儿Caraganaturfanensis(Krassn.) Kom.为豆科锦鸡儿属植物，分布于新疆伊犁地区、塔里木盆地、吐鲁番盆地，生于海拔2 100 m的山坡、河流阶地、峭壁[1]。《药用植物辞典》记载，吐鲁番锦鸡儿以根入药，具有活血、利尿、止痛、强壮的功效[2]，地上部分的资源多作为柴火利用。为了对吐鲁番锦鸡儿资源进行充分开发利用，课题组前期对其地上部分的研究发现，乙醇提取物对A549(人类肺腺癌细胞)及HeLa(人类宫颈癌细胞)均有显著的抑制作用，并从中分离鉴定出5个黄酮和1个甾体[3]。本研究在前期工作的基础上，继续对吐鲁番锦鸡儿地上部分乙酸乙酯、正丁醇部位的化学成分进行研究，从中共分离鉴定出17个化合物，其中化合物3、10为首次从该属植物中得到，4、6～9、13、16为首次从该植物中发现。

1 材料

AV-300、AV-400核磁共振仪(德国Bruker公司)；SYNAPT G2-S型高分辨率质谱仪(美国Waters公司)；ZF-20C暗箱式紫外分析仪(上海宝山顾村电光仪器厂)；FL-LC050高效液相色谱仪(天津Bonna-Agela公司)；GF254薄层层析硅胶、柱层析硅胶(200～300、300～400目，青岛海洋化工厂)；ODS填料(50 μm，日本YMC公司)；ODS制备型色谱柱(5 μm，日本YMC公司)。甲醇、石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷试剂均为分析纯。

吐鲁番锦鸡儿采于新疆克尔克孜州乌恰县，经新疆维吾尔自治区中药民族药研究所王果平研究员鉴定为吐鲁番锦鸡儿Caraganaturfanensis(Krassn.) Kom.的地上部分，凭证标本均存放于新疆维吾尔自治区中药民族药研究所。

2 提取与分离

取吐鲁番锦鸡儿地上部分10 kg，粉碎，干燥，用8倍量95%乙醇溶液回流提取3次(2 h/次)，减压回收溶剂得乙醇浸膏950 g，用水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液减压回收，得石油醚萃取物(47 g)、乙酸乙酯萃取物(144 g)、正丁醇萃取物(200 g)。

取乙酸乙酯萃取物40 g，经二氯甲烷-甲醇(100∶0～0∶100)梯度洗脱，TLC检识合并相同组分，得10个馏分。Fr.3(1.5 g)选取硅胶柱分离，经石油醚-乙酸乙酯(30∶1～10∶1)梯度洗脱，得Fr.4-9析出方晶，反复重结晶得化合物11。Fr.4(5.0 g)经硅胶柱分离，用二氯甲烷-甲醇(70∶1～10∶1)梯度洗脱，TLC合并得5个馏分Fr.4A～Fr.4E，Fr.4A(200 mg)经反复硅胶柱分离得化合物12(13 mg)；Fr.4B(1.3 g)经硅胶柱分离，用二氯甲烷-甲醇(100∶1～50∶1)梯度洗脱，TLC合并得4个馏分Fr.4B1～Fr.4B4，Fr.4B2(270 mg)采用半制备HPLC甲醇-水(55∶45)分离，得化合物13(13 mg)、15(10 mg)。Fr.5(6.5 g)采用ODS柱层析分离，经30%甲醇～甲醇洗脱，合并得到6个馏分Fr.5A～Fr.4F，Fr.5C(1.6 g)采用半制备HPLC甲醇-水(50∶50)分离得化合物8(4 mg)，Fr.5E(780 mg)采用硅胶柱二氯甲烷-甲醇(70∶1)分离得化合物9(6 mg)。Fr.7(10.4 g)经硅胶柱二氯甲烷-甲醇(20∶1～1∶1)，分离得6个馏分Fr.7A～Fr.7F，Fr.7C(930 mg)经半制备HPLC甲醇-水(41∶59)分离得化合物16(15 mg)；Fr.7E(6.2 g)经ODS柱层析分离，用35%～75%甲醇洗脱，得4个馏分Fr.7E1～Fr.7E4，Fr.7E1(360 mg)采用半制备HPLC甲醇-水(43∶57)分离得化合物3(12 mg)、17(50 mg)，Fr.7E3(580 mg)采用半制备HPLC甲醇-水(42∶58)分离得化合物1(11 mg)、2(20 mg)。

取正丁醇萃取物70 g，经二氯甲烷-甲醇(100∶1～1∶1)梯度洗脱，TLC检识合并相同组分，得10个馏分Fr.1～Fr.10，Fr.4(10.5 g)用二氯甲烷-甲醇(100∶1～10∶1)梯度洗脱，TLC检识合并得8个馏分Fr.4A～Fr.4H，Fr.4C(5.1 g)选取ODS反相硅胶柱层析分离，经30%甲醇～70%甲醇洗脱，得6个馏分Fr.4C1～Fr.4C6，Fr.4C3(1.2 g)用半制备HPLC甲醇-水(43∶57)分离得化合物4(35 mg)、7(7 mg)，Fr.4C4(900 mg)用半制备HPLC甲醇-水(41∶59)分离得化合物14(10 mg)，Fr.4C5(1.4 g)用半制备HPLC甲醇-水(39∶61)分离得化合物10(6 mg)。

3 结构鉴定

化合物1：淡黄色针晶，ESI-MSm/z: 227.1[M-H]-，分子式C14H12O3。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ:7.35 (2H, d,J=8.6 Hz, H-2, 6), 6.96 (1H, d,J=16.3 Hz, H-7), 6.79 (1H, d,J=16.3 Hz, H-8), 6.76 (2H, d,J=8.6 Hz, H-3, 5), 6.45 (2H, d,J=2.1 Hz, H-10, 14), 6.16 (1H, t,J=2.1 Hz, H-12)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 159.7 (C-3, 5), 158.4 (C-12), 141.3 (C-1), 130.4 (C-9), 129.4 (C-7), 128.8 (C-10, 14), 127.0 (C-8), 116.5 (C-11, 13), 105.8 (C-2, 6), 102.6 (C-4)。以上数据与文献[3]基本一致，故鉴定为白黎芦醇。

化合物2：淡棕色粉末，ESI-MSm/z: 243.1[M-H]-，分子式C14H12O4。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 6.98 (1H, brs, H-10), 6.87 (1H, d,J=16.0 Hz, H-7), 6.84 (1H, brs, H-14), 6.74 (1H, brs, H-13), 6.73 (1H, d,J=16.0 Hz, H-8), 6.40 (2H, s, H-2, 6), 6.14 (1H, s, H-4);13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 158.6 (C-3, 5), 145.6 (C-12), 145.5 (C-11), 139.4 (C-1), 128.8 (C-9), 128.4 (C-8), 125.7 (C-7), 118.8 (C-14), 115.9 (C-10), 113.4 (C-13), 104.5 (C-2, 6), 101.9 (C-4)。以上数据与文献[4]基本一致，故鉴定为白杉皮醇。

化合物3：白色粉末，ESI-MSm/z: 451.1[M-H]-，分子式C25H24O8。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ: 9.12 (1H, s, 5-OH), 9.01 (1H, s, 3-OH), 8.90 (1H, s, 11-OH), 8.85 (1H, s, 12-OH), 8.04 (1H, s, 4′-OH), 6.77 (1H, d,J=1.7 Hz, H-10), 6.71 (1H, d,J=8.0 Hz, H-13), 6.64 (1H, dd,J=8.0, 1.7 Hz, H-14), 6.24 (2H, s, H-2′, 6′), 6.13 (2H, d,J=1.8 Hz, H-4, 6), 4.54 (1H, d,J=4.0 Hz, H-8), 4.35 (1H, t,J=8.3 Hz, H-9′b), 4.01 (1H, s, H-7′), 3.66 (1H, dd,J=8.4, 4.0 Hz, H-7), 3.63 (6H, s, 2×OCH3), 3.37 (1H, t,J=8.3 Hz, H-9′a), 2.87 (1H, q,J=8.3 Hz, H-8′)；13C-NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ: 158.6 (C-3), 154.9 (C-5), 147.7 (C-3′, 5′), 147.0 (C-1), 145.2 (C-11), 144.6 (C-12), 136.0 (C-9), 133.7 (C-2), 133.5 (C-1′), 121.1 (C-4′), 117.1 (C-14), 115.4 (C-13), 113.7 (C-10), 104.7 (C-2′, 6′), 101.6 (C-4, 6), 86.9 (C-8), 73.2 (C-9′), 58.1 (C-7), 54.3 (C-8′), 50.1 (C-7′)。以上数据与文献[4]基本一致，故鉴定为maakoline。

化合物4：淡棕色粉末，ESI-MSm/z: 451.1[M-H]-，分子式C25H24O8。1H-NMR (300 MHz, CD3OD)δ: 6.84 (1H, d,J=1.7 Hz, H-10), 6.75 (2H, m, H-13, 14), 6.31 (2H, s, H-2′, 6′), 6.24 (1H, brs, H-6), 6.19 (1H, brs, H-4), 4.65 (1H, d,J=4.6 Hz, H-8), 4.47 (1H, t,J=8.4 Hz, H-9′α), 4.13 (1H, s, H-7′), 3.77 (1H, dd,J=8.6, 4.6 Hz, H-7), 3.72 (6H, s, 3′, 5′-OCH3), 3.55 (1H, t,J=8.4 Hz, H-9′β), 3.04 (1H, m, H-8′)；13C-NMR(75 MHz, CD3OD)δ: 160.0 (C-5), 156.3 (C-3), 149.1 (C-3′, 5′), 148.6 (C-1), 146.5 (C-12), 146.0 (C-11), 137.9 (C-1′), 135.2 (C-9), 134.6 (C-4′), 123.0 (C-2), 119.1 (C-14), 116.3 (C-13), 114.5 (C-10), 105.4 (C-2′, 6′), 103.2 (C-6), 102.8 (C-4), 89.3 (C-8), 74.9 (C-9′), 59.8 (C-7), 56.6 (3′, 5′-OCH3), 56.5 (C-8′), 52.1 (C-7′)。以上数据与文献[5]基本一致，故鉴定为kompasinol A。

化合物5：无色油状，ESI-MSm/z: 579.2[M-H]-，分子式C28H36O13。1H-NMR (300 MHz, CD3OD)δ: 6.67 (2H, s, H-2′, 6′), 6.61 (2H, s, H-2, 6), 4.81 (1H, d,J=3.8 Hz, H-1″), 4.71 (1H, d,J=3.8 Hz, H-7′), 4.67 (1H, d,J=3.8 Hz, H-7), 4.23 (2H, m, Hb-9, 9′), 3.81 (6H, s, 3′, 5′-OCH3), 3.79 (6H, s, 3, 5-OCH3)；13C-NMR (75 MHz, CD3OD)δ: 154.4 (C-3′, 5′), 149.3 (C-3, 5), 139.5 (C-4′), 135.5 (C-4), 135.0 (C-1′), 133.0 (C-1), 105.3 (C-1″), 104.8 (C-2′, 6′), 104.4 (C-2, 6), 87.5 (C-7), 87.1 (C-7′), 78.3 (C-5″), 77.8 (C-3″), 75.6 (C-2″), 72.9 (C-9, 9′), 71.2 (C-4″), 62.5 (C-6″), 57.0 (3, 5-OCH3), 56.8 (3′, 5′-OCH3)，55.7 (C-8), 55.5 (C-8′)。以上数据与文献[6]基本一致，故鉴定为丁香树脂酚葡萄糖苷。

化合物6: 灰白色粉末，ESI-MSm/z: 741.3[M-H]-，分子式C34H46O18。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ: 6.60 (4H, s, H-2, 6, 2′, 6′), 4.91 (2H, d,J=4.6 Hz, H-1″, 1‴), 4.80 (1H, d,J=2.9 Hz, H-7), 4.61 (1H, d,J=2.9 Hz, H-7′), 4.27 (2H, m, H-9, 9′), 3.70 (12H, s, 3, 5, 3′, 5′-OCH3), 3.10 (2H, m, H-8, 8′)；13C-NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ: 152.7 (C-3, 5, 3′, 5′), 137.2 (C-4, 4′), 133.7 (C-1, 1′), 104.2 (C-2, 6, 2′, 6′), 102.7 (C-1″, 1‴), 85.1 (C-7, 7′), 77.3 (C-3″, 3‴), 76.5 (C-2″, 2‴), 74.2 (C-5″, 5‴), 71.4 (C-4″, 4‴), 70.0 (C-9, 9′), 60.9 (C-6″, 6‴), 56.5 (3,5, 3′, 5′-OCH3)。以上数据与文献[7]基本一致，故鉴定为双环氧木脂素。

化合物7：黄色无定型粉末，ESI-MSm/z: 419.2[M-H]-，分子式C22H28O8。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ: 6.58 (1H, s, H-6), 6.38 (2H, s, H-2′, 6′), 4.31 (1H, d,J=5.7 Hz, H-7′), 3.85 (3H, s, 5-OCH3), 3.73 (6H, s, 3′, 5′-OCH3), 3.61 (2H, m, H-9b, 9b′), 3.51 (2H, m, H-9a, 9a′), 3.37 (3H, s, 3-OCH3), 2.68 (1H, m, H-7b), 2.61 (1H, m, H-7a), 1.97 (1H, m, H-8′), 1.62 (1H, m, H-8);13C-NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ: 148.9 (C-3′, 5′), 148.6 (C-5), 147.7 (C-3), 139.3 (C-1′), 138.8 (C-4), 134.5 (C-4′), 130.1 (C-1), 126.2 (C-2), 107.7 (C-6), 106.8 (C-2′, 6′), 66.7 (C-9), 64.1 (C-9′), 60.1 (3-OCH3), 56.7 (3′, 5′-OCH3), 56.6 (5-OCH3), 49.0 (C-8′), 42.3 (C-7′), 40.8 (C-8), 33.5 (C-7)。以上数据与文献[8]基本一致，故鉴定为南烛木树脂酚。

化合物8：黄色无定形粉末，ESI-MSm/z: 285.0[M-H]-，分子式C15H10O6。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 8.10 (2H, d,J=8.2 Hz, H-2′, 6′), 6.98 (2H, d,J=8.2 Hz, H-3′, 5′), 6.49 (1H, brs, H-8), 6.25 (1H, brs, H-6)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 175.9 (C-4), 164.0 (C-7), 159.2 (C-5, 4′), 156.3 (C-9), 146.8 (C-2), 135.9 (C-3), 129.5 (C-2′, 6′), 121.8 (C-1′), 115.4 (C-3′, 5′), 103.1 (C-10), 98.3 (C-6), 93.5 (C-8)。以上数据与文献[9]基本一致，故鉴定为山柰酚。

化合物9：黄色粉末，ESI-MSm/z: 609.1[M-H]-，分子式C27H30O16。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 7.56 (1H, d,J=9.0 Hz, H-6′), 7.54 (1H, s, H-2′), 6.83 (1H, d,J=9.0 Hz, H-5′), 6.38 (1H, brs, H-8), 6.18 (1H, brs, H-6), 1.00 (3H, d,J=5.9 Hz, -CH3)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 177.2 (C-4), 164.4 (C-7), 161.1 (C-5), 156.4 (C-2), 156.3 (C-9), 148.4 (C-4′), 144.9 (C-3′), 133.2 (C-3), 121.5 (C-6′), 121.0 (C-1′), 116.1 (C-5′), 115.2 (C-2′), 103.7 (C-10), 101.1 (C-1″), 100.6 (C-1‴), 98.7 (C-6), 93.5 (C-8), 76.3 (C-3″), 75.8 (C-5″), 74.0 (C-2″), 71.7 (C-4‴), 70.4 (C-3‴), 70.3 (C-2‴), 69.9 (C-4″), 68.1 (C-5‴), 66.9 (C-6″), 17.6 (C-6‴)。以上数据与文献[10]基本一致，故鉴定为芦丁。

化合物10：黄色颗粒状粉末，ESI-MSm/z: 447.1[M-H]-，分子式C22H24O10。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ: 12.67 (1H, s, 5-OH), 10.33 (1H, s, 4′-OH), 7.97 (2H, d,J=8.8 Hz, H-2′, 6′), 6.97 (2H, d,J=8.8 Hz, H-3′, 5′), 6.80 (1H, d,J=2.2 Hz, H-8), 6.44 (1H, d,J=2.2 Hz, H-6), 5.42 (1H, d,J=4.5 Hz, H-1″), 3.80 (3H, s, 3-OCH3)；13C-NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ: 178.1 (C-4), 162.9 (C-7), 160.9 (C-9), 160.3 (C-2), 156.2 (C-5), 156.0 (C-4′), 137.9 (C-3), 130.3 (C-2′, 6′), 120.4 (C-1′), 115.7 (C-3′, 5′), 105.9 (C-10), 99.9 (C-1″), 99.2 (C-6), 94.6 (C-8), 77.2 (C-3″), 76.4 (C-5″), 73.1 (C-2″), 69.6 (C-4″), 60.6 (C-6″), 59.7 (3-OCH3)。以上数据与文献[11]基本一致，故鉴定为异山奈素-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷。

化合物11：淡黄色油状物，ESI-MSm/z: 147.0[M-H]-，分子式C9H8O2。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 7.69 (1H, d,J=3.5 Hz, H-2), 7.67 (1H, d,J=2.2 Hz, H-6), 7.59 (1H, d,J=16.0 Hz, H-7), 7.42 (1H, s, H-4), 7.41 (2H, s, H-3, 5), 6.53 (1H, d,J=16.0 Hz, H-8)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 167.6 (C-9), 143.9 (C-7), 134.3 (C-1), 130.3 (C-4), 128.9 (C-3, 5), 128.2 (C-2, 6), 119.3 (C-8)。以上数据与文献[12]基本一致，故鉴定为桂皮酸。

化合物12：白色粉末，ESI-MSm/z: 163.0[M-H]-，分子式C9H8O3。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 7.60 (1H, d,J=15.9 Hz, H-7), 7.44 (2H, d,J=8.6 Hz, H-2, 6), 6.80 (2H, d,J=8.6 Hz, H-3, 5), 6.28 (1H, d,J=15.9 Hz, H-8)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 171.3 (-COOH), 161.2 (C-4), 146.7 (C-7), 131.3 (C-2, 6), 127.3 (C-1), 117.0 (C-3, 5), 115.7 (C-8)。以上数据与文献[13]基本一致，故鉴定为对羟基桂皮酸。

化合物13：白色结晶，ESI-MSm/z: 137.0[M-H]-，分子式C7H6O3。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 7.87 (2H, d,J=8.1 Hz, H-2, 6), 6.81 (2H, d,J=8.1 Hz, H-3, 5)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 163.5 (-COOH), 159.4 (C-4), 133.2 (C-2, 6), 123.2 (C-1), 116.1 (C-3, 5)。以上数据与文献[14]基本一致，故鉴定为对羟基苯甲酸。

化合物14：白色粉末，ESI-MSm/z: 359.1[M-H]-，分子式C15H20O10。1H-NMR (300 MHz, CD3OD)δ: 7.35 (2H, s, H-2,6), 5.06 (1H, d,J=7.3 Hz,H-1′),3.88 (6H, s, 3, 5-OCH3), 3.75(1H, m, H-6′a), 3.65 (1H, m, H-6′b)；13C-NMR (75 MHz, CD3OD)δ:169.5(C-7),154.1 (C-3,5), 139.8 (C-4), 130.1 (C-1), 108.6 (C-2, 6), 104.5 (C-1′), 78.5 (C-5′), 77.9 (C-3′), 75.7 (C-2′), 71.3 (C-4′), 62.5 (C-6′), 57.0 (3, 5-OCH3)。以上数据与文献[15]基本一致，故鉴定为丁香酸吡喃葡萄糖苷。

化合物15：白色结晶，ESI-MSm/z: 137[M-H]-，分子式C7H6O3。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 9.64 (1H, s, -CHO), 7.22 (1H, brd,J=6.9 Hz, H-6), 7.18 (1H, s, H-2), 6.83 (1H, d,J=6.0 Hz, H-5)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ:191.0 (-CHO), 152.9 (C-4), 145.7 (C-3), 130.9 (C-1), 125.1 (C-6), 117.7 (C-5), 116.8 (C-2)。以上数据与文献[16]基本一致，故鉴定为原儿茶醛。

化合物16：白色粉末，ESI-MSm/z: 298.1[M-H]-，分子式C17H17NO4。1H-NMR (300 MHz, CH3OD)δ: 7.36 (1H, d,J=15.7 Hz, H-7), 7.03 (2H, d,J=8.3 Hz, H-2′, 6′), 6.97 (1H, d,J=1.8 Hz, H-2), 6.88 (1H, dd,J=8.3, 1.8 Hz, H-6), 6.74 (1H, d,J=8.3 Hz, H-5), 6.70 (2H, d,J=8.3 Hz, H-3′, 5′), 6.31(1H, d,J=15.7 Hz, H-8), 3.43 (2H, t,J=7.6 Hz, H-8′), 2.43 (2H, t,J=7.6 Hz, H-7′);13C-NMR (75 MHz, CH3OD)δ: 169.3 (C-9), 156.9 (C-4′), 148.8 (C-4), 146.7 (C-3), 142.2 (C-7), 131.3 (C-1′), 130.7 (C-2′, 6′), 128.3 (C-1), 122.1 (C-6), 118.4 (C-8), 116.5 (C-5), 116.3 (C-3′, 5′), 115.0 (C-2), 42.6 (C-8′), 35.8 (C-7′)。以上数据与文献[17]基本一致，故鉴定为反式-咖啡酰酪胺。

化合物17：白色粉末，溶于CH2Cl2、CH3OH 混合溶剂，硫酸乙醇显紫红色。与胡萝卜苷对照品进行共薄层检查，鉴定为胡萝卜苷。

4 讨论

本实验从吐鲁番锦鸡儿地上部分乙酸乙酯和正丁醇提取物中分离得到17个化合物，其中二苯乙烯4个(1～4)，木脂素 3个(5～7)，黄酮3个(8～10)，有机酸5个(11～14)，醛(15)，生物碱(16)和甾体(17)各1个;化合物3、10为首次从该属中分离得到，4、6～9、13、16为首次从该植物中分离得到。

前期实验发现，吐鲁番锦鸡儿中含有大量的黄酮类化合物，具有抗炎、抗肿瘤、抗溃疡等作用[18]。化合物9是植物中一种重要的次生代谢产物，具有免疫调节、抗炎、抗病毒等作用[19]；化合物8具有抗肿瘤、抗氧化、抗骨质疏松的作用[20]；二苯乙烯在锦鸡儿属植物中大量存在，为该属植物特征性成分，在抗肿瘤、抗炎镇痛、抗氧化、抗HIV、雌激素样作用等方面都具有较好活性[21]。因此，推测吐鲁番锦鸡儿中上述成分可能与这些药理活性相关，具体的药效物质基础及作用机制需要进一步研究。